磁性殼聚糖微球的合成及其在固定化血管緊張素轉化酶的應用

周敬豪，徐存華，李玉嬋，黃順禮，熊珍愛，孫建華，蔣林斌，童張法，廖丹葵

（廣西大學化學化工學院，廣西 南寧 530004）

磁性微球是近 20年來發展起來的一種新型功能高分子材料，由于它同時具有無機磁性載體、超順磁響應性以及表面功能化修飾等優點[1]，在外磁場作用下可快速從反應介質中分離出來，因而在生物技術、化學、環境治理等領域得到了廣泛的應用[2]。殼聚糖是具有很好生物相容性的天然多糖材料，其分子鏈上含大量的羥基和氨基可進行修飾和功能化，因此廣泛用于酶的固定化[3-4]。

血管緊張素轉化酶（angiotensin converting enzyme，ACE）是腎素-血管緊張素系統中的一種酶類，其在體內不僅可以將血管緊張素Ⅰ轉化為血管緊張素Ⅱ，還會分解緩激肽，這都會導致人體內血壓的升高。許多科研工作者通過篩選ACE抑制劑來尋找抗高血壓類物質，但篩選ACE抑制劑需要大量的ACE[5]。商業ACE價格十分昂貴，從動物組織中提取ACE卻又存在過程繁瑣，產量極低，易失活等缺點。若將ACE固定在載體上，可以大大提高酶穩定性和循環利用率。

洪韞嘉、劉宏等[5-6]以硫酸銨分級沉淀、透析平衡、親和分離等多步純化的高純度豬肺 ACE為原料，研究了殼聚糖和Sepharose CL-4B固定化ACE的性質，但以豬肺二級沉淀粗提ACE為原料的固定化ACE尚無文獻報道，因此，本實驗擬以豬肺二級沉淀粗提ACE為原料，研究磁性殼聚糖固定化ACE的效果和固定化酶性質，為簡化固定化酶的前處理提供依據。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

殼聚糖，脫乙酰度≥95%，浙江金殼生物化學有限公司；……