標本不同處理因素對部分生化項目的影響

胡鶴娟，徐銀根，徐喜林，張雅娟（蘇州衛生職業技術學院檢驗藥學系，江蘇蘇州 215009）

臨床生化檢驗在輔助臨床醫生診斷疾病、觀察療效等醫療過程中具有重要地位。但在日常檢測中常存在一些分析誤差，甚至超過病情變化，導致檢驗結果不準確。影響生化檢驗結果的因素很多，也很復雜，其中標本因素是主要的原因之一。血液標本采集后若不能及時檢測，其放置時間，是否封閉放置保存，是否血清分離放置保存都可能影響檢驗結果。

1 材料與方法

1.1 標本 健康成年人靜脈血液標本。

1.2 儀器與試劑 日立7020型自動生化分析儀，試劑使用德賽診斷系統（上海）有限公司生產的相關分析試劑和質控血清（TruLab N復合定值質控血清Lot.No.15207）及標準品（Tru－Cal U復合校準血清 Lot.No.6480）。

1.3 方法

1.3.1 放置時間對部分項目的影響 以丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰轉肽酶（GGT）、乳酸脫氫酶（LDH）為分析項目，根據《全國臨床檢驗操作規程》［1］，靜脈采集血液標本后，靜置20 min待血液收縮，4 000r／min離心10min，分離血清，立即檢測，作為對照組；3h組：靜脈血室溫放置3h后離心，檢測血清；7h組：靜脈血室溫放置7h后離心，檢測血清；24h組：靜脈血室溫放置24h后離心，檢測血清。

1.3.2 全血保存與血清分離保存對檢測結果的影響 以ALT、LDH、血糖（GLU）為例，對照組：根據操作規程，血液標本采集后，靜置20min待血塊收縮，4 000r／min離心10min，分離血清，立即檢測；全血保存組：全血4℃保存24h離心，檢測血清；血清保存組：血液標本分離出血清，4℃保存24h，檢測血清。

1.3.3 是否密封保存對檢測結果的影響 以ALP為例，對照組：根據操作規程，血液標本采集后，靜置20min待血塊收縮，4 000r／min離心10min，分離血清，立即檢測；實驗組1：加蓋密封全血4℃保存24h離心，檢測血清；實驗組2：分離出血清，加蓋密封4℃保存24h，檢測血清；實驗組3：全血未密封4℃保存24h，檢測血清；實驗組4：分離出血清后，未密封4℃保存24h，檢測血清。

1.4 統計學方法 實驗數據經統計軟件SPSS13.0進行配對t檢驗處理。

2 結 果

2.1 放置時間對生化檢驗部分指標檢測結果的影響，以ALT、AST、ALP、GGT為例，結果見表1。

表1 放置時間對部分酶指標的影響（，U／L）

表1 放置時間對部分酶指標的影響（，U／L）

注：與對照組比較，＊P＜0.01，＊＊P＜0.01。

組別 n 2 183.8±21.96 3h組 10 16.01±6.72 18.2±4.68 77.1±15.82 11.3±5.65 183.3±22.74 7h組 10 16.37±6.92 19.1±4.33 78.2±16.55 12.0±5.33 188.4±25.15＊24h組 10 16.57±7.09 17.8±4.75 77.4±16.15 12.0±5.69 196.2±26.41 ALT AST ALP GGT LDH對照組 10 16.00±6.48 18.3±4.72 78.1±16.28 11.4±5.6＊＊

2.2 全血保存與血清分離保存對生化檢驗指標檢測結果的影響，以ALT、LDH、GLU為例，結果表2。

表2 全血保存與血清分離保存對部分指標的影響（n＝12，）

表2 全血保存與血清分離保存對部分指標的影響（n＝12，）

注：與對照組比較，＊P＜0.01，＊＊P＜0.01。

組別 ALT（U／L） LDH（U／L） GLU（mmol／L）11.29±3.19 194.83±27.09 4.88±0.68全血保存 12.14±3.07 217.41±28.35＊ 3.30±0.81＊＊血清保存對照組11.41±2.97 202.75±27.22 5.08±0.80

2.3 是否密封保存對檢測結果的影響，以ALP為例，未密封保存時數值升高，并且有統計學意義，結果見表3。

表3 是否密封保存對ALP檢測結果的影響（，U／L）

表3 是否密封保存對ALP檢測結果的影響（，U／L）

注：與對照組比較，＊P＜0.01，＊＊P＜0.01。

組別 n ALP對照組（密封）15 74.33±11.79實驗組1 15 74.60±12.05實驗組2 15 74.66±11.61對照組（未密封） 15 70.80±7.85實驗組3 15 85.86±6.65＊實驗組4 15 92.60±5.67＊＊

3 討 論

生化標本應盡早測定，盡量降低影響因素［2－3］，但臨床工作中，從病區標本采集，經集中運輸、標本分類、編號及前處理到上機檢測，至少3h甚至更長時間。本文通過實驗發現，血液標本長時間（3、7、24h）保存對部分酶指標，如 ALT、AST、ALP、GGT，沒有顯著性影響，而對LDH檢測結果有明顯影響，尤其是7h組、24h組。紅細胞中LDH活性比血清約高100倍［4－6］，而且全血保存24h后，由于 ATP能量產生障礙，細胞膜通透性增加，導致細胞內化學成分發生轉移和釋放，酶活性受到影響，因而LDH顯著升高。

與對照組比較，全血保存及血清分離保存對ALT檢測無差異。參照對照組，血清分離保存24h，對LDH和GLU指標分析無影響；但全血保存24h，LDH值升高，GLU下降，均有顯著差異。由于紅細胞中進行糖酵解，室溫下糖酵解速率為每小時5%～7%，使血中GLU濃度減少，差異顯著。所以，臨床實際工作中，血液標本較長時間放置對部分酶指標影響不顯著，但是對LDH、GLU檢測值產生明顯差異，故對LDH項目，標本采集后若3h內不能完成檢測，應分離血清保存或采用含惰性分離膠的真空采血管采集標本。對GLU項目，標本離體后應立即檢測，若不能完成，則應分離血清保存。

血液標本敞開保存時，ALP檢驗結果升高，與對照組比較，差異有統計學意義?？赡苡捎谖疵芊獗４鏁r，標本水分蒸發，血清濃縮，檢驗結果升高；對比全血保存組，血清分離保存組升高值更大，可能與全血保存時，血液細胞中水分擴散有關。細胞膜存在水通道，水分子從滲透壓低的一側向滲透壓高的一側移動［7－8］。在密封保存狀態下，全血保存組及血清分離保存組與對照組比較，無統計學差異。在臨床工作中，為保證檢驗結果的準確性，標本采集后，若不能立即檢測，建議用真空采血管密封保存或普通試管上加蓋保存。作者將進一步分析探討血液標本放置時間及全血、血清分離保存對其他生化檢驗項目的影響，以期為臨床實際工作提供有用信息，從而降低分析前誤差，做好室內質控。

［1］ 葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程［M］.2版.南京：東南大學出版社，1997：313.

［2］ 托馬斯.臨床實驗診斷學［M］.上海：上?？茖W技術出版社，2004：107.

［3］ 王喜棟，王翠霞.生化檢驗標本放置時間對結果的影響［J］.河北醫科大學學報，2002，6（25）：26.

［4］ 鄭鐵生，鄢盛愷.臨床生物化學檢驗［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：59.

［5］ 徐杰鋒，雷敏.靜脈血標本放置時間對常規生化檢查結果的影響［J］.中國基層醫藥，2012，19（9）：1353－1354.

［6］張曄.影響生化檢驗結果的標本誤差及解決辦法探討［J］.中國醫藥指南，2012，10（8）：312－313.

［7］ 楊恬，左伋，劉艷平，等.細胞生物學［M］.北京：人民衛生出版社，2010：93.

［8］ 謝寧芳.溶血標本對生化檢驗指標結果影響分析［J］.臨床合理用藥雜志，2012，5（8）：97.