某進口HIV檢測試劑的室間質評呈假陰性結果分析

蘇武錦

（廣西壯族自治區南寧市中心血站 530003）

人類免疫缺陷病毒（HIV）主要經血液以及性傳播途徑傳播。GB18467-2001《獻血者健康檢查要求》明確規定對獻血者進行HIV抗體的篩查，所用方法為酶聯免疫法。目前第3代試劑檢測HIV-1／2抗體，第4代試劑既檢測 HIV-1／2抗體，也檢測HIV-1P24抗原。為保證血液篩查試劑的質量，本血站實驗室所選用試劑均符合國家相關標準，且每批試劑投入使用前都進行確認，同時每年定期參加衛生部臨床檢驗中心的室間質量評價，通過分析實驗中存在的問題，采取相應措施提高檢驗質量。本文對2011年度本站實驗室參加衛生部第3次室間質評HIV項目的結果進行了總結分析，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 衛生部臨床檢驗中心提供室間質量評價（EQA）樣品5份。

1.2 試劑 某國產第3代抗-HIV（1／2）型診斷試劑盒；某進口第4代HIV抗體（1／2）及抗原（P24）聯合檢測試劑盒；兩種試劑均有批準文號與批檢報告，有效期內使用。

1.3 儀器 全自動加樣器（STAR）、全自動酶免分析儀（瑞士Hamilton公司）。

1.4 方法

1.4.1 操作嚴格按SOP進行，常規條件下進行測定，由進行常規檢測的工作人員執行，EQA樣品按常規標本進行檢測。

1.4.2 根據血站系統以血液篩查為目的的檢測策略，標本檢測兩種試劑都呈無反應性，則判為陰性反應；任一種試劑呈反應性或同時兩種試劑都呈反應性的標本，判為篩查反應性。

1.4.3 衛生部臨床檢驗中心對血站系統檢測項目的兩種試劑的檢測結果進行數據采集，但參評實驗室的成績僅按最終結果（1.4.2的結論）進行評價。

2 結 果

2.1 5份EQA樣品檢測符合率為100%，但參加質評的1172號標本，國產試劑檢測呈反應性而進口試劑檢測呈無反應性，見表1。

2.2 衛生部臨床檢驗中心1172號標本的確認結果為gp120＋，gp41＋＋，gp31＋，gp117－，gp36－，p24－，p17＋，符合HIV-1抗體陽性判定標準：（1）至少有2條env帶（gp41和gp160／gp120）出現，或至少1條env帶和p24帶同時出現；（2）符合試劑盒提供的陽性判定標準，見表1。

2.3 5份EQA樣品HIV項目不同試劑檢測S／CO值結果見表2。

表1 5份EQA樣品的HIV項目檢測結果

表2 5份EQA樣品HIV項目不同試劑檢測S／CO值結果＊

3 討 論

3.1 本次EQA活動有5個樣品，除了1172號樣品兩種試劑檢測結果不一致，其余樣品的兩種試劑檢測結果均一致，即1172號標本國產試劑檢測有反應性而進口試劑檢測呈無反應性，見表1。根據標本檢測任一種試劑呈反應性或同時兩種試劑都呈反應性的標本即判為篩查反應性的原則，本室判定該標本為篩查反應性作為樣品篩查的最終結果，并按要求上報質評結果。盡管衛生部臨床檢驗中心對采供血機構實驗室的檢測項目的兩次檢測結果均進行了數據采集，但實驗室的成績僅按最終結果評價；因此本次5個EQA樣品HIV的檢測結論與衛生部臨床檢驗中心回報結果一致，檢測結論符合率為100%。說明了國產試劑檢測1172號標本呈反應性符合預期結果，而進口試劑檢測呈無反應性未符合預期結果。

3.2 阻斷經輸血傳播疾病，保證臨床用血安全，決定了血站系統必須以血液篩查為目的的檢測策略，這就要求血站實驗室必須加強實驗室管理，選擇特異性好、靈敏度高的檢測試劑，強化檢測過程的質量控制。雖然本室參加衛生部臨床檢驗中心血清標志物室間質評結果表明總體結果成功，但存在個別試劑檢測結果與預期值不符。而本站實驗室進行EQA活動，已經從樣品接收、處理、準備、方法、審核、檢驗的每一步驟和結果的報告都進行了文件化管理；檢測試劑更是從試劑的采購與入庫、試劑的貯存、試劑的驗收與確認、試劑的使用等方面進行規范管理。因此本室個別試劑檢測結果與預期值不符，可以排除：（1）書寫誤差；（2）方法學問題；（3）技術問題；（4）質評樣本問題；（5）結果評價問題等［1］。

3.3 對照衛生部臨床檢驗中心反饋的117批抗-HIV不同試劑檢測S／CO值結果（表2）發現：全國血站實驗室參加EQA所使用試劑有13種試劑，分別由11家試劑廠生產，其中8家國產，3家進口；使用單位數達886個，國產使用單位數679個，占使用總數78.41%，進口使用單位數187個，占使用總數21.59%；而1172號EQA陽性標本，8家國產試劑檢測的S／CO平均值均大于1.0，3家進口試劑檢測的S／CO平均值均未達到1.0。說明了進口試劑對1172號陽性標本的檢測能力較差。而本站實驗室使用的進口3試劑，全國血站使用單位數達130個，占進口試劑使用總數的69.52%（130／187），其 S／CO平均值僅為0.5，標準差0.24，說明了全國130個使用單位使用該試劑檢測1172號陽性標本均呈假陰性結果。

3.4 李秀華等［2］研究報告指出：我國目前流行的HIV毒株中以泰國B亞型（B′亞型）和BC重組型最多，約占80%以上，其次為AE重組型，約占10%左右；而進口試劑檢測不同基因型樣品的敏感性低于大部分國產試劑，國產試劑檢測不同基因型的樣品的敏感性無明顯差異，而進口試劑檢測B′亞型抗體的能力低于檢測BC重組型抗體的能力。不少專家在實際應用中也發現，采用兩種HIV檢測試劑檢測，相對于國產試劑，進口試劑靈敏度、特異性并無明顯優勢［3－4］，甚至有部分國產試劑在敏感性和特異性上與進口試劑相比具有一定優勢［5］。

因此，為保證獻血者血液檢測質量，防止輸血感染，不是單純選擇用一個國產試劑和一個進口試劑來進行聯合檢測，就能保證HIV抗體試劑檢測的準確性。作者在選擇試劑時，必須對預使用的試劑進行確認，同時應充分利用室間質評的客觀證據輔助質量評價（包括使用前、中、后3個階段），而非盲目推崇進口試劑。

［1］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：108-109.

［2］ 李秀華，許四宏，宋愛京，等.不同HIV抗體檢測試劑檢測抗HIV-1膜蛋白抗體的敏感性［J］.中國生物制品學雜志，2009，22（1）：69-71.

［3］ 秦艷蘭，劉景春，劉仁強，等.國產和進口HIV酶聯免疫試劑盒精確性檢測比較［J］.中國熱帶醫學，2009，9（3）：546-548.

［4］ 戴涌，陳慧萍，湯恒，等.2004年湖北省內使用的HIV抗體ELISA診斷試劑的評估分析［J］.江西醫藥，2005，40（10）：623-624.

［5］ 余剛寶.某國產與進口HIV診斷試劑檢測結果分析［J］.臨床輸血與檢驗，2010，12（1）：57-58.