XE－5000檢測網(wǎng)織血小板在血液病中的臨床應(yīng)用

蔡早育，戴偉良（廣東省佛山市第一人民醫(yī)院檢驗科 528000）

網(wǎng)織血小板（IPF）是新近從骨髓中釋放的血小板，可反映骨髓中紅系生成狀態(tài)，具有較高的止血活性［1］。測定外周血IPF能反映骨髓中巨核細(xì)胞產(chǎn)生血小板的狀態(tài)。Sysmex XE－5000是較先進(jìn)的全自動血細(xì)胞分析儀，其用于外周血IPF檢查的敏感性和特異性較好［2］。作者用XE－5000檢測網(wǎng)織血小板來協(xié)助診斷血液疾病，取得了較好的效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選自本院門診及住院患者，其中特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）32例、再生障礙性貧血（AA）30例、急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）35例、急性單核細(xì)胞白血病（AML）35例、急性早幼粒細(xì)胞白血病（APL）35例、慢性粒細(xì)胞白血病（CGL）和骨髓增生異常綜合征（MDS）各10例，所有疾病診斷均通過骨髓細(xì)胞學(xué)及細(xì)胞化學(xué)染色確認(rèn)。另選取本院健康體檢者30例，其中男16例，女14例，年齡7～68歲，平均年齡（37.5±4.5）歲。

1.2 檢測方法 Sysmex XE－5000血細(xì)胞分析儀及配套原裝試劑，儀器按規(guī)定校正，每次測試前采用原裝質(zhì)控物測試在控。病例組與健康對照組于入院當(dāng)日、ITP組治療后的清晨空腹采集靜脈血2mL，放入15%乙二胺四乙酸二鉀抗凝真空管中混勻，標(biāo)本不能有溶血或凝塊，不能使用振搖器混勻標(biāo)本［3］。應(yīng)用XE－5000全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計數(shù)（PLT）、平均血小板體積（MPV）、網(wǎng)織血小板比值（IPF%）和網(wǎng)織血小板絕對值［IPF（×109／L）］檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS11.5統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。以表示計量資料，各組間結(jié)果的比較采用單因素方差分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組的PLT、IPF%、IPF、MPV與健康對照組比較 （1）PLT：CGL組的PLT顯著高于健康對照組（P＜0.05），其他各組顯著低于健康對照組（P＜0.05）。（2）IPF%：ITP組、CGL組的IPF%顯著高于健康對照組（P＜0.05），其他各組與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（3）IPF：CGL組的IPF顯著高于健康對照組（P＜0.05），其他各組與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（4）MPV：ITP組的 MPV顯著高于健康對照組（P＜0.05）。其他各組與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 各組PLT、IPF%、IPF、MPV檢測結(jié)果（）

表1 各組PLT、IPF%、IPF、MPV檢測結(jié)果（）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.05。

組別 PLT（×109／L） IPF% IPF（×109／L） MPV（fL）健康對照組 225.81±15.15 2.65±1.21 5.81±1.56 11.25±1.67疾病組ITP 38.15±16.53＊ 17.92±6.18＊ 4.85±1.23 12.88±2.12＊AA 30.96±16.02＊ 3.87±1.45 1.84±0.21 10.31±1.53 ALL 68.27±12.21＊ 5.75±2.89 8.28±3.35 11.57±1.56 AML 66.83±15.23＊ 5.89±1.79 8.45±2.98 11.62±1.78 APL 67.12±14.56＊ 5.45±1.23 8.78±2.67 12.10±3.14 CGL 754.80±68.19＊ 16.34±6.35＊ 112.71±45.31＊ 11.21±1.45 MDS 87.74±17.34＊ 4.72±2.16 7.89±2.67 11.87±1.48 F 31.97 29.45 47.38 5.12

2.2 ITP組治療前后PLT、IPF%、IPF、MPV比較 ITP組治療后的 MPV顯著降低，PLT、IPF顯著升高（P＜0.05）。其他指標(biāo)治療前后差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 ITP組治療前后PLT、IPF%、IPF、MPV比較（）

表2 ITP組治療前后PLT、IPF%、IPF、MPV比較（）

注：與健康對照組比較，＊P＜0.05；與治療前比較，△P＜0.05。

組別 PLT（×109／L） IPF% IPF（×109／L） MPV（fL）健康對照組 225.81±15.15 2.65±1.21 5.81±1.56 11.25±1.67 IFP組 治療前 38.15±16.53＊17.92±6.18 4.85±1.23 12.88±2.12治療后 152.06±34.76△ 3.95±1.23△ 6.56±2.65△ 10.56±2.34△F 11.56 9.87 5.38 4.98

3 討 論

血液病常見血小板減少，慢性粒細(xì)胞白血病血小板常增多。骨髓中血小板生成狀況的評估，以前主要是依靠骨髓巨核細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查、PLT、MPV的測定，通過觀察骨髓巨核細(xì)胞的數(shù)量及成熟情況作為依據(jù)。但是骨髓巨核細(xì)胞學(xué)檢查對患者具有創(chuàng)傷性，患者的痛苦較大，而且受取材、制片及操作者個人主觀因素的影響［4］，結(jié)果常有一定的偏差，難以作為血小板生成狀態(tài)的動態(tài)評估。Sysmex XE－5000是新一代較先進(jìn)的全自動血細(xì)胞分析儀，其在流式細(xì)胞儀的基礎(chǔ)上，采用鞘流電阻抗、在網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測通道采用熒光染色結(jié)合流式法兩種方法計數(shù)血小板［5］，使用Polymehtine和Oxazine兩種特殊的熒光染料，穿透細(xì)胞膜進(jìn)入胞質(zhì)，與IPF中的RNA結(jié)合，染色后的細(xì)胞通過半導(dǎo)激光束，形成不同的前向散射光和熒光強(qiáng)度，其分別代表了細(xì)胞的體積和RNA的含量，在常規(guī)血細(xì)胞檢測的同時，可以將網(wǎng)織血小板作為全血細(xì)胞檢測的一部分進(jìn)行測定。根據(jù)細(xì)胞大小分開紅細(xì)胞區(qū)和血小板區(qū)，同時根據(jù)RNA含量區(qū)分成熟細(xì)胞和未成熟細(xì)胞，可將細(xì)胞分為成熟紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞、成熟血小板和網(wǎng)織血小板4個不同的區(qū)域，通過分析可以得到IPF%和IPF的絕對值。有研究顯示，應(yīng)用XE－5000檢測網(wǎng)織血小板其靈敏度為91%～96%，特異度為67%～100%。而且用XE－5000檢測網(wǎng)織血小板，標(biāo)本不需要預(yù)處理，速度快操作簡單，重復(fù)性好，可在做血細(xì)胞分析的同時進(jìn)行測定。

IPF是新近從骨髓中釋放入外周血中的血小板，是一種未成熟血小板，IPF數(shù)目反映了人體血小板的更新速度、血小板生成能力［6］。當(dāng)骨髓生成血小板活躍時，網(wǎng)織血小板增高；而當(dāng)骨髓生成血小板抑制時，網(wǎng)織血小板減低。IPF是分析血小板生成狀態(tài)的有用指標(biāo)，而網(wǎng)織血小板檢測方法的進(jìn)步，又為網(wǎng)織血小板在臨床上的應(yīng)用創(chuàng)造了有利的條件。近年來，網(wǎng)織血小板在各種疾病中的研究越來越廣泛，如在造血干細(xì)胞移植中作為血小板早期恢復(fù)指標(biāo)，以及在甲亢及肝臟、腎臟疾病中逐漸應(yīng)用［7］。本研究結(jié)果顯示，CGL組的PLT顯著高于健康對照組（P＜0.05）；其他各組顯著低于健康對照組（P＜0.05）。ITP組、CGL組的IPF%顯著高于健康對照組（P＜0.05）；CGL組的IPF顯著高于健康對照組（P＜0.05）。ITP組的 MPV顯著高于健康對照組（P＜0.05）。ITP稱特發(fā)性血小板減少性紫癜，是一類較為常見的出血性血液病，是一種因免疫機(jī)制使血小板破壞增多的臨床綜合征，其特點(diǎn)為單核－巨噬系統(tǒng)對血小板吞噬、破壞增加，血小板壽命縮短，骨髓巨核細(xì)胞增多［8］。ITP組治療后的 MPV顯著降低，IPF顯著升高（P＜0.05）。這提示ITP患者經(jīng)過治療后其血小板在外周血中的破壞減少，骨髓巨核細(xì)胞逐漸恢復(fù)正常。AA是一種由多種原因引起的骨髓造血功能衰竭的一組綜合征，主要表現(xiàn)為骨髓造血功能低下、全血細(xì)胞減少和貧血、出血、感染。骨髓中的巨核細(xì)胞減少，血小板生成出現(xiàn)障礙，新生血小板減少。有研究顯示，IPF可反映急性白血病患者的不同病理狀態(tài)，也是化療后骨髓恢復(fù)的早期且敏感指標(biāo)，這可能與患者本身骨髓巨核細(xì)胞生成狀態(tài)有關(guān)，應(yīng)根據(jù)每個患者的不同情況具體分析結(jié)果方有診斷價值。CGL是造血干細(xì)胞克隆惡性增生性疾病，CGL組的PLT和IPF顯著高于健康對照組（P＜0.05），與慢性粒細(xì)胞白血病患者的骨髓巨核細(xì)胞增生有關(guān)。而10例MDS患者網(wǎng)織血小板百分比增高可能與MDS骨髓巨核細(xì)胞病態(tài)造血，外周血中巨大血小板增多有關(guān)。

綜上所述，網(wǎng)織血小板的檢測可反映骨髓巨核系統(tǒng)生成血小板的情況，有利于血液病的病因診斷，也是療效判定的有效指標(biāo)。

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