丹參飲口服液的質量標準鑒定方法分析

王躍紅

長春市雙陽區中醫院，吉林長春 130600

臨床上應用的丹參飲口服液為丹參、砂仁、檀香3味中藥材經提取分離、濃縮制成的一種口服液，主要功效為活血祛瘀、行氣止痛，主要用于治療氣滯血瘀引起的心胃諸痛。臨床效果比較理想[1]。本次研究中出于對丹參飲口服液的質量標準鑒定方法進行分析探討的目的，分別采取薄層色譜、紫外-可見分光光度法、高效液相色譜法對丹參進行鑒別、對丹參素鈉含量進行檢測，現匯報實驗結果如下。

1 儀器與試藥

1.1 實驗儀器

實驗中所用儀器包括我實驗室現有的高效液相色譜儀、紫外分析儀、雙光束紫外可見分光光度計；還會用到電子天平、脈動真空壓力蒸汽滅菌器等。

1.2 實驗藥材與試劑

本次實驗中所用藥材包括丹參、檀香和砂仁藥材，丹參飲口服液。所用試劑包括：丹參素鈉對照品，甲醇為色譜純，水為實驗室應用的純化水，其他所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 丹參的薄層鑒別

對照品：丹參素鈉加甲醇制成濃度為2 mg/mL溶液；對照藥材溶液：1 g丹參藥材經水煎煮后，放冷，過濾后經鹽酸條pH值至2.0,經20 mL乙酸乙酯提取，蒸干，殘渣經1 mL甲醇溶解待用；供試品溶液：20 mL丹參飲口服液，經超聲處理后，經鹽酸條pH至2.0,過濾，濾液經乙酸乙酯提取，蒸干，殘渣中加1 mL甲醇溶液待用。另設陰性對照品，即不含有丹參藥材的丹參飲口服溶液[2]。

薄層色譜展開劑為：氯仿-丙酮-甲酸（10:4:2），薄層板為硅膠G板。實驗時，吸取10 uL上述所制備的四種溶液，分別點在同一塊硅膠G薄層板上，在上述展開劑中展開，而后經氨蒸汽顯色，在紫外燈下進行檢視。結果發現，供試品與對照品在相同的位置存在同顏色的熒光斑點，并且陰性對照組無明顯干擾。詳見下圖。

2.2 紫外-可見分光光度法對丹參素鈉的含量進行檢測

對照品：丹參素鈉對照品0.0083 g，在25 mL的棕色量瓶中，加甲醇定容，準確吸取2 mL，在25 mL容量瓶中經甲醇定容，搖勻后待用；供試品：精密量取丹參飲口服液5 mL，蒸干后將殘渣經甲醇溶解，在50 mL經甲醇定容，搖勻后過濾，吸取濾液5 mL在100 mL容量瓶中加甲醇定容，搖勻后既得供試品溶液[3]。

實驗時，采用3 mL的甲醇溶液進行參比，經紫外－可見分光光度計展開基線校準，而后不改變參照池，取對照品3 mL，放置在空置的樣品池中，經紫外－可見光譜展開測定；紫外-可見分光光度計的相關參數為：掃描范圍在210~300 nm之間，中速采樣間隔為1 nm。最終結果發現，在282 nm處，丹參素鈉紫外－可見光譜圖存在最大吸收峰，陰性樣品未出現吸收峰。在282 nm處對3批供試品的吸光度進行了檢測，結果分別為0.609,0.613,0,624，RSD為0.8%。這一結果證實，該檢測方法準確可靠。最終計算得到該批樣品每1 mL中含有丹參素鈉吸光度不低于0.6。

2.3 高效液相色譜法對丹參素鈉含量進行檢測

所用色譜柱為：Inertsil ODS-C18柱，規格為250 mm×4.6 mm，5 um。柱溫為40℃，流動相為：甲醇－1%的冰乙酸=13:87，檢測時采取二元梯度洗脫法，流速控制在1.0 mL/min，檢測波長為280 nm,進樣量為10 uL。

表1 加樣回收實驗檢測結果統計

對照品：精稱丹參素鈉對照品0.0083 g，經甲醇在25 mL棕色量瓶中溶解后定容，所得溶液濃度為0.332 mg/mL，待用；供試品：精密吸取丹參飲口服液適量，經0.45 um的微孔濾膜過濾后待用[4]。

在實驗時，分別吸取上述所制備的對照品和供試品溶液10uL,注入到液相色譜儀后，測定結果，在線性實驗中所得丹參素鈉回歸方程為A=105C-649876，（n=5），丹參素鈉在0.83~6.64 ug內具有良好的線性關系；精密度實驗結果顯示，峰面積均值為1448754，RSD為1.15%，證實實驗儀器的精密度良好；穩定性實驗結果顯示，峰面積平均值為1410772，RSD為3.19%，證實供試品溶液具有良好的穩定性；重復性實驗結果顯示，丹參素鈉的平均含量為0.18mg/g，RSD為1.03%，證實分析方法的重復性良好；加樣回收實驗結果顯示，丹參素鈉的平均回收率為97.26%，RSD為1.15%。證實分析方法準確可靠。詳見表1。

3 討論

在臨床上丹參經常用來對婦科病、缺血性中風、冠心病、動脈粥樣硬化等疾病展開治療，活性成分包括脂溶性、水溶性兩類，脂溶性成分包括：隱丹參酮、丹參酮、丹參酮ⅡA等。最近幾年，在國內外對丹參的脂溶性成分展開了諸多的實驗研究，在丹參中分離得到二萜醌類化合物超過40種，并且存在有不同的藥理作用[5]。對于傳統中醫藥臨床治療工作而言，丹參多數采取水煎的方式，也就是說應用的多位水溶性成分，因此對丹參的水溶性成分展開實驗研究的意義更大。曾有相關實驗證實，丹參的水溶性成分包括丹參素、迷迭香酸、原兒茶醛、紫草酸以及丹酚酸（A、B、C、D、E、F、G）等。近幾年研究制成的丹參飲口服液在臨床中得到了廣泛的應用，其對氣滯血瘀引起的心胃諸痛具有良好的臨床治療效果[6]。本次研究中出于對丹參飲口服液的質量標準鑒定方法進行分析探討的目的，分別采取薄層色譜、紫外－可見光譜以及高效液相色譜法對丹參飲口服液中丹參素鈉的含量展開了檢測和鑒別，最終發現，本次實驗中所建立的丹參素鈉高效液相色譜法具有較強的專屬性，且其重現性好，操作簡單，結果可靠，在丹參飲口服液質量控制中具有重要作用，值得關注。

[1] 蒲清榮,陳玉蘭,黃銳,等.丹參飲口服液水提取工藝研究[J].藥物評價研究,2012,35(4):270-271.

[2] 朱榮,朱斌.婦女痛經丸質量控制標準鑒定研究[J].臨床合理用藥,2012,5(2B):27-28.

[3] 劉省存,凡小慶,陳先亮,等.不同產地丹參的紫外光譜[J].光譜實驗室,2011,28(2):573-574.

[4] 李化,于艷秋,楊濱.黃酮化合物與Fe（Ⅱ）絡合反應的動力學研究[J].中國實驗方劑學雜,2010,16(17):99-100.

[5] 李海燕,李振國,宋漢敏,等.HPLC測定冠心生脈口服液中丹參素鈉的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2010,16(12):78-79.

[6] 周靜,李惠芬,王洪志,等.丹參水溶性成分與脂溶性成分抑菌作用的考察[J].時珍國醫國藥,2008,19(9):2130.