肺炎克雷伯菌耐藥分析

陳國華

肺炎克雷伯菌耐藥分析

陳國華

目的探討醫院分離1094株肺炎克雷伯菌的產酶情況。方法采用2012年CLSI推薦產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLS)和碳青霉烯酶的檢出方法，主要是紙片擴散法和改良Hodge試驗。結果1094株肺炎克雷伯菌產ESBLs率為69.7%，改良Hodge試驗陽性株22株。結論肺炎克雷伯菌的產ESBLs率一直居高，對碳青霉烯類抗生素的耐藥現狀十分嚴峻，臨床工作人員應做到密切觀察，提前預防。

肺炎克雷伯菌；產超廣譜β-內酰胺酶；碳青霉烯酶

肺炎克雷伯菌是一種重要的條件致病菌，常引起血液、痰液、尿液、膽汁、手術切口、軟組織損傷等多個部位感染，也在逐漸成為醫院感染重要病原菌之一。

1 資料

1.1菌株來源 臨床分離肺炎克雷伯菌1094株，采用美國BD公司PHOENIX100全自動細菌鑒儀進行菌株鑒定。

1.2質控菌株 大腸埃希菌ATCC25922。

1.3藥敏紙片與培養基 藥敏紙片均來自于英國OXOID公司；MH平板來自于鄭州安圖生物試劑公司。

2 方法

2.1WHONET5.5軟件進行統計分析。

2.2ESBLs檢測方法 滿足任一抑菌環直徑頭孢他啶/克拉維酸(30/10 μg)-頭孢他啶(30 μg)≥5 mm或頭孢噻肟/克拉維酸(30/10 μg)-頭孢噻肟(30 μg)≥5 mm條件的肺炎克雷伯菌為ESBLs陽性株。

2.3改良Hodge試驗 取ATCC25922配制0.5 mCF，1:10稀釋成0.05 MCF，將制備的菌懸液均勻涂滿整個MH平板，干燥3～5 min，將10 μg美羅培南紙片貼在MH平板中心，然后用無菌棉簽蘸取待測菌或質控菌3～5個菌落，從美羅培南紙片邊緣向MH瓊脂板邊緣劃線(20～25 mm)，16～20 h觀察結果。

3 結果

3.11094株肺炎克雷伯菌產ESBLs率為69.7%，對頭孢他啶的耐藥率為68.2%，對頭孢噻肟的耐藥率為71.3%，對頭孢吡肟的耐藥率為68.5%。

3.21094株肺炎克雷伯菌對美洛培南的敏感率為90.4%，對亞胺培南的敏感率為88.8%。

3.3美洛培南抑菌環≤21 mm的菌株數為73株，占6.7%，改良Hodge試驗陽性菌株22株。

4 討論

近年來，由于抗生素的濫用和隨之而產生的新型廣譜抗菌藥物出現在臨床并廣泛應用，導致肺炎克雷伯菌感染有明顯增減的趨勢，并表現為對以β-內酰胺類抗生素為主的多種抗菌藥物出現耐藥情況，給臨床治療帶來很大的困難。

肺炎克雷伯菌對β-內酰胺類抗生素的耐藥機制以產β-內酰胺酶為主， β-內酰胺酶是一類由細菌產生，能夠水解抗生素β-內酰胺環使之失活的酶，根據水解底物范圍可分為：青霉素酶、AmpC酶、ESBLs、碳青霉烯酶等。肺炎克雷伯菌主要產生ESBLs和碳青霉烯酶。ESBLs是一類由質粒介導的能夠使細菌對多種β-內酰胺類抗生素和單酰環類抗生素耐藥的酶，屬于Ambler分類的A類，Bush分類的2be群，包括TEM、SHV、CTX-M和OXA型[1]，可在細菌菌株之間水平傳遞和垂直傳播。

碳青霉烯類抗生素是目前臨床使用的抗菌藥物中抗菌譜抗廣、抗菌活性最強、具有快速殺菌作用的一類抗生素，然而隨著碳青霉烯類抗生素在臨床上使用增加，逐漸出現了對碳青霉烯類抗生素不敏的菌株。細菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機制主要有產生碳青霉烯酶、外排泵、膜通透性下降和青霉素結合蛋白親和力的降低。其中產碳青霉烯酶是重要因素。2001年Yigit[2]等首次報道在美國北卡羅來納州肺炎克雷伯菌中發現的碳青霉烯酶KPC-1型，因其由質粒介導易向其他菌株傳遞[3]，已經成為臨床實驗室重點監測的目標菌。

本次分析1094株肺炎克雷伯菌，ESBLs的發生率為69.7%，高于全國平均水平。改良Hodge試驗篩選菌株產酶率占30.1%，篩選菌株數量大，且改良Hodge試驗陽性株均為耐美洛培南肺炎克雷伯菌，且同時對包括喹諾酮類抗生素在內的多種抗生素出現泛耐藥現象，致使臨床醫生無藥可選，治療難度大，應從根源上及早預防，減少產酶菌的發生和傳播。

[1] 唐曙明，方紅輝，楊自華.產ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥型與基因分型.中國現代醫學雜志，2009，9(11)：1653-1657.

[2] Yigit H, Queenan AM, Anderson GJ, et al. Novel carbapenem-hydrolyzing beta-lactamase, KPC-1, from a carbapenem-resistant strain of Klebsiella pn eumonia. Antimicrob Agents Chemother, 2001, 45(4):1151-1161.

[3] Naas T, Cuzon G, Villegas MV,et al. Genetic structures at the origin of acquisition of the beta-lactamase blaKPC gene. Antimicrobial agents and chemotherapy, 2008,52(4):1257-1263.

450000 河南省鄭州市中醫院檢驗科