Her-2蛋白在宮頸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義

朱軍義

子宮頸癌作為世界上最常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于乳腺癌。現(xiàn)在我國每年仍然有新發(fā)病例l0萬左右，且呈現(xiàn)年輕化的趨勢［1］。在近幾十年來，隨著宮頸細(xì)胞學(xué)的檢查、陰道鏡檢查等子宮頸癌的早期篩查方法的普遍推廣與應(yīng)用，子宮頸癌的發(fā)病率明顯下降，但是患者的長期生存率仍然很低，嚴(yán)重影響女性的身心健康，為女性帶來極大的痛苦。目前，伴隨著腫瘤學(xué)的迅猛發(fā)展，國內(nèi)外針對腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移的機(jī)制探討已進(jìn)入分子生物學(xué)的水平。眾多研究表明，宮頸鱗癌的發(fā)生與HPV感染有關(guān)。為此，筆者采用免疫組化SP法檢測正常宮頸組織30例、宮頸腺癌40例及鱗癌40例中的P185c-erbB-2蛋白的表達(dá)情況，分析其在組織細(xì)胞之間的相互關(guān)系。為臨床宮頸癌的篩選、診斷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為治療宮頸癌提供新的策略。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取河南省南陽市中心醫(yī)院2011年4月至2012年4月收治的子宮腺癌、鱗癌患者，各隨機(jī)抽取40例患者的病理標(biāo)本進(jìn)行研究。30例正常的宮頸組織為常規(guī)體檢時(shí)所取。所有患者在獲取標(biāo)本前均未采取任何治療。正常的宮頸組織用甲醛液固定，常規(guī)石蠟包埋，厚4 μm連續(xù)切片備用。所有患者的年齡在26～48歲，平均年齡為(35.4±2.34)歲。宮頸癌臨床分期依據(jù)FIGO標(biāo)準(zhǔn)，其中I期患者37例，II期患者33例，III期患者10例；細(xì)胞分化程度：I級(jí)33例，II級(jí)26例，III級(jí)21例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移36例，淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移44例。

1.2 免疫組化染色 ①將標(biāo)本切片放入90℃烤箱，烤片約20 min或者放入60℃恒溫箱，烤片2 h。②將石蠟切片進(jìn)行常規(guī)二甲苯脫蠟及梯度乙醇脫水。③將玻片擦干凈后，滴入3%H2O2，將內(nèi)源性過氧化物酶進(jìn)行滅活。檸檬酸鹽緩沖液抗原修復(fù)30 min。④在玻片上滴入15%正常山羊血清工作液恒溫封閉10 min。⑤第一抗體4℃過夜。⑥生物素標(biāo)記第二抗體溫室作用下30 min。⑦滴入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素卵白素工作液，恒溫30 min。⑧滴加適量的DAB/H2O2進(jìn)行反應(yīng)染色，在顯微鏡下控制染色深度及背景，在滿意后及時(shí)用水充分進(jìn)行沖洗，蘇木素復(fù)染，用純水沖10 min。鏡下觀察。

1.3 陽性結(jié)果判斷［2］在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察，在200倍視野下觀察，未見陽性細(xì)胞為(-)，陽性細(xì)胞數(shù)/100個(gè)細(xì)胞＜10%為(+)，陽性細(xì)胞數(shù)/100個(gè)細(xì)胞10% ～50%為(++)，陽性細(xì)胞數(shù)/100個(gè)細(xì)胞＞50%為(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)通過SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

P185c-erbB-2在子宮腺癌、鱗癌中陽性表達(dá)率均高于正常組，在正常組織中不進(jìn)行表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；但鱗癌組與子宮腺癌組中P185c-erbB-2的陽性表達(dá)率差異不明顯，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。具體見表1。

表1 P185c-erbB-2在宮頸癌中的表達(dá)［n(%)］

3 討論

HER-2基因又稱C-erbB-2，是EGFR家族即人類表皮生長因子受體家族的第二個(gè)成員，其編碼的蛋白產(chǎn)物p185是一種跨膜受體蛋白，定位于細(xì)胞膜。HER-2基因存在于正常的人體組織內(nèi)，是一種原癌基因，對腫瘤的生長與分化有著至關(guān)重要的作用。文獻(xiàn)報(bào)道用免疫組化方法檢測子宮頸病變中HER-2基因的陽性表達(dá)率在2.5%～50%。

在本組的實(shí)驗(yàn)研究表明，HER-2蛋白在宮頸鱗癌組織的表達(dá)均高于在宮頸正常組織的表達(dá)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這樣說明了HER-2基因在宮頸鱗癌癌變的蛋白水平上的表達(dá)有上調(diào)現(xiàn)象，表明HER-2過表達(dá)的腫瘤具有強(qiáng)侵襲力，提示宮頸鱗癌的發(fā)生與發(fā)展與HER-2的過表達(dá)具有一定的關(guān)系。在國外的研究中，Narisawae-Saito等研究證明HER-2的過表達(dá)是通過HPVl6-E6調(diào)節(jié)的，HER-2基因轉(zhuǎn)錄或翻譯后的調(diào)控在子宮頸癌發(fā)生中起一定的作用［3］。

綜上所述，通過本組實(shí)驗(yàn)研究并研讀國外實(shí)驗(yàn)，認(rèn)定HER-2蛋白在宮頸癌組織中具有高表達(dá)率，認(rèn)定HER-2基因是上皮細(xì)胞起源的腫瘤治療的有效靶點(diǎn)之一。因此，通過對HER-2基因的檢測做到對子宮頸癌早期篩查、病情監(jiān)測和評(píng)價(jià)預(yù)后的指標(biāo)。為宮頸癌的治療提供新的方法。

［1］ 彭玉池，HER-2、hTERC在子宮頸上皮脫落細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義．中國婦幼保健，2008，23(33)：4744-4748．

［2］ 劉玉．宮頸癌組織與細(xì)胞中HER-2/neu和Pas的表達(dá)及意義．現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2007，15(1)：69-72．

［3］ 王巍，宮頸癌組織中HER-2/neu和Ras表達(dá)的意義．第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，27(19)：1085-1087．