馬齒莧多糖對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能、血液代謝激素和血脂的影響

葛 劍 楊翠軍 孫茂紅

(河北北方學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院1，張家口 075131)

(河北北方學(xué)院生命科學(xué)研究中心2，張家口 075000)

近年來綠色養(yǎng)殖的概念越來越深入人心，人們對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品安全提出了更高的要求。隨著生物制藥的不斷發(fā)展，尋求高效、環(huán)保、低毒副作用的藥物已成為畜牧養(yǎng)殖業(yè)的熱點(diǎn)問題。天然植物性多糖是從植物中分離出的高效活性物質(zhì)，不僅具有安全低毒、不易在動(dòng)物產(chǎn)品中產(chǎn)生有害殘留等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)具有促生長(zhǎng)、抗腫瘤、抗炎癥、抗病毒、抗凝血、降血糖、降血脂、抗疲勞、抗衰老，提高機(jī)體免疫力等作用［1－6］。

馬齒莧(Portulaca oleracea L.)，又名馬莧菜、五行草等，系馬齒莧科馬齒莧屬一年生草本植物。馬齒莧多糖(Portulaca oleracea L.polysaccharide，POP)是馬齒莧的主要活性成分之一。研究表明，POP具有提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，提高正常家兔淋巴細(xì)胞和PHA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞的增殖能力;扶植腸道正常菌群生長(zhǎng)，調(diào)整菌群失調(diào)，防治感染的功能;并具有促進(jìn)大鼠受損結(jié)腸粘膜修復(fù)，緩解大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的效應(yīng)［7－11］。目前關(guān)于 POP在家禽中的應(yīng)用研究較少，本試驗(yàn)以雛雞為試驗(yàn)動(dòng)物，研究不同濃度的POP對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能、內(nèi)分泌激素及血脂水平的影響，旨在為進(jìn)一步研究并開發(fā)利用多糖類飼料添加劑提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 馬齒莧多糖的提取

馬齒莧原藥經(jīng)粉碎，過40目篩，準(zhǔn)確稱取馬齒莧干粉末10 g，經(jīng)石油醚脫去表面脂肪，80%乙醇脫去小分子糖、生物堿等，濾渣風(fēng)干后以料水比1∶40加熱提取，靜置離心除去雜質(zhì)，濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至最小體積，濃縮液經(jīng)95%乙醇沉淀、離心，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮洗滌數(shù)次，經(jīng)真空干燥制得馬齒莧粗多糖。使用時(shí)再經(jīng)蒸餾水溶解制得馬齒莧水溶液。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

試驗(yàn)選用28日齡冀西北本地柴雞60只，隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每重復(fù)3只，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組每天分別灌服0.5 mL 2、20、40 mg/mL的馬齒莧多糖(POP)，連續(xù)給藥7 d，對(duì)照組灌服相同體積的生理鹽水。基礎(chǔ)日糧均統(tǒng)一飼喂育雛料(日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1)，自由采食和飲水。試驗(yàn)為期3周，分別于用藥后第1周(35日齡)、第2周(42日齡)及第3周(49日齡)，以重復(fù)為單位空腹稱重，計(jì)算平均耗料量和料重比，每周末每重復(fù)隨機(jī)抽取1只雞進(jìn)行無菌心臟采血，并分離血清，置于－20℃冰箱保存，用于測(cè)定血脂及血清激素指標(biāo)。

1.3 血清激素指標(biāo)測(cè)定

雞血清生長(zhǎng)激素(GH)、雞促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)、胰島素樣生長(zhǎng)因子－1(IGF－1)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、和甲狀腺素(T4)均采用放射免疫法測(cè)定。放免試劑盒購(gòu)自北京科美東雅生物有限技術(shù)公司，血樣均在張家口二五一醫(yī)院，采用GC－911 r－放射免疫計(jì)數(shù)器(廈門中佳光電科技有限公司)，按照試劑盒說明測(cè)定。

1.4 血脂測(cè)定

三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，按照試劑盒說明書測(cè)定雛雞血脂指標(biāo)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel處理，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，LSD法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異達(dá)顯著水平，P＜0.01表示差異達(dá)極顯著水平。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

2 結(jié)果與分析

2.1 馬齒莧多糖對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，不同濃度的馬齒莧多糖均能不同程度地提高雛雞日增重。42日齡試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組平均日增重分別高于對(duì)照組11.93%和5.17%(P ＜0.05)，49 日齡試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組分別高于對(duì)照組14.89%和14.75%(P ＜0.05)，整個(gè)試驗(yàn)期，試驗(yàn)Ⅰ組日增重與對(duì)照組相比無顯著差異，且試驗(yàn)組間差異均不顯著。

在35日齡時(shí)，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組只日耗料量與對(duì)照組相比降低13.17%和 12.32%(P ＜0.05);42日齡試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組耗料量與對(duì)照組相比，分別降低8.16%(P ＜0.05)和10.36%(P ＜0.01);49日齡各組耗料量比較差異均不顯著。

35日齡POP各劑量組料重比與對(duì)照組相比均有降低的趨勢(shì)，但差異不顯著;42日齡試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組分別較對(duì)照組降低 12.96%和 14.02%(P ＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組比對(duì)照組降低20.63%(P＜0.01);49日齡各個(gè)試驗(yàn)組料重比均低于對(duì)照組(P＜0.05)，各試驗(yàn)組間差異均不顯著;可以看出，整個(gè)試驗(yàn)期以試驗(yàn)Ⅱ組飼料轉(zhuǎn)化率最高。

表2 POP對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 馬齒莧多糖對(duì)雛雞血清激素水平的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，35日齡時(shí)試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組血清GH分別提高6.76%(P＜0.05)和9.46%(P＜0.01)，其他激素水平各組間比較差異均不顯著。

在42日齡時(shí)，除試驗(yàn)Ⅱ組T3水平高于對(duì)照組7.24%(P＜0.05)外，其他各組相比差異不顯著。試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組T4水平與對(duì)照組相比分別降低14.48%和17.92%(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組在降低 T4效果方面并不顯著，但與對(duì)照組相比，IGF－1和GH水平分別顯著提高7.67%和 12.41%(P ＜0.05)。

表3 POP對(duì)雛雞血清激素水平的影響/ng/mL

隨試驗(yàn)期的延長(zhǎng)，在雛雞49日齡時(shí)，不同濃度的POP試驗(yàn)組對(duì)血清T3的提升較為顯著，其中，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組分別較對(duì)照組提高9.55%和10.03%(P ＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組提高 12.26%(P ＜0.01)。各試驗(yàn)組IGF－1水平分別較對(duì)照組提高6.93%(P＜0.05)、11.90%(P ＜0.01)和9.10%(P ＜0.05)。各試驗(yàn)組血清GH水平均較對(duì)照組提高(P＜0.05或P＜0.01)，且試驗(yàn)Ⅲ組要高于試驗(yàn)Ⅰ組13.14(P＜0.05)。由整個(gè)試驗(yàn)期看，不同濃度的POP試驗(yàn)組對(duì)血清T4和GHRH影響效果均不顯著。

2.3 馬齒莧多糖對(duì)雛雞血脂含量的影響

由表4可知，不同濃度的POP試驗(yàn)組雛雞血清TG、TC和LDL－C含量均呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，HDL－C和HDL－C/TC呈現(xiàn)不同程度的提高。在35日齡時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組TC含量與對(duì)照組相比降低7.26%和5.91%(P ＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組LDL－C 含量和 HDLC/TC分別較對(duì)照組降低20.18%和提高11.59%(P＜0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組LDL－C含量和 HDL－C/TC與對(duì)照組相比，分別降低19.30%和提高8.70%(P＜0.05)，其余各組間比較差異均不顯著。

42日齡試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組血清TG含量分別比對(duì)照組降低 8.33%、33.33%(P ＜ 0.01)和 27.08%(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組TC含量比對(duì)照組降低4.47%(P ＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組均低于對(duì)照組 8.94% 和5.59%(P＜0.01)，且試驗(yàn)Ⅱ組降低膽固醇的效果顯著優(yōu)于試驗(yàn)Ⅰ組(P＜0.05)。試驗(yàn)Ⅱ組HDL－C含量與對(duì)照組相比提高了8.23%(P＜0.05)，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組 LDL－C含量均比對(duì)照組降低 16.67%和20.37%(P ＜0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組 LDL －C 含量低于對(duì)照組(P＜0.01)，HDL－C/TC比值各試驗(yàn)組均顯著或極顯著低于對(duì)照組。

在49日齡時(shí)，雛雞血清TG和HDL－C含量試驗(yàn)Ⅱ組分別低于對(duì)照組34.04%和高于對(duì)照組8.37%(P＜0.05)，TC含量各試驗(yàn)組均低于對(duì)照組(P＜0.05或P＜0.01)，LDL－C 含量試驗(yàn)Ⅱ組相比對(duì)照組降低26.00%(P＜0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組較對(duì)照組降低19.00%(P ＜0.05)，HDL－C/TC 比值各試驗(yàn)組分別較對(duì)照組提高 10.45%(P ＜0.05)、19.40%(P ＜0.01)和11.94%(P ＜0.05)。從整個(gè)試驗(yàn)期來看，試驗(yàn)Ⅱ組降低雛雞血清TG、TC和LDL－C含量及提高HDL－C的效果最好。

表4 POP對(duì)雛雞血脂含量的影響

3 討論

3.1 馬齒莧多糖對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能的影響

近年來，中草藥中提取的活性多糖作為一種綠色飼料添加劑，在畜禽飼養(yǎng)中的應(yīng)用越來越引起重視。有文獻(xiàn)報(bào)道，在雛雞飼料中添加一定質(zhì)量濃度的中藥多糖能有效提高雛雞生長(zhǎng)性能，如白術(shù)多糖［12］、苜蓿多糖［13］、黃芪多糖［14－16］等，其可能的機(jī)制是，多糖能增強(qiáng)細(xì)胞生理代謝作用，促進(jìn)血液循環(huán)，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的代謝，促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育，提高家禽等動(dòng)物的生產(chǎn)性能［17］。也有研究證實(shí)中藥多糖對(duì)雛雞增重的效果并不顯著［18－20］，但能顯著降低料肉比，改善飼料利用率［18］。造成結(jié)果差異較大的原因可能與中藥多糖的最適添加量、雛雞飼養(yǎng)環(huán)境等有關(guān)，此外，多糖的給藥途徑也會(huì)影響使用效果，臨床上中草藥多以口服的形式直接發(fā)揮作用，本試驗(yàn)以馬齒莧多糖灌服雛雞，能顯著提高雛雞日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。其中，給藥量以20 mg/mL影響最為明顯，說明適宜的多糖濃度能有效促進(jìn)雛雞生長(zhǎng)，同時(shí)降低飼養(yǎng)成本。

3.2 馬齒莧多糖對(duì)雛雞血液代謝激素的影響

甲狀腺激素(T3、T4)廣泛參與調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝［21］，對(duì)禽類生長(zhǎng)具有雙向調(diào)控作用［22］。其中，T3濃度與禽類生長(zhǎng)呈正相關(guān)［23］，T3水平升高有利于細(xì)胞分化及器官組織發(fā)育［24］，T4濃度降低也可促進(jìn)蛋白質(zhì)的生物合成［25］。試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，馬齒莧多糖可使雛雞血液T3濃度升高，其可能的機(jī)制是促進(jìn)脂肪動(dòng)員和氧化分解，同時(shí)增強(qiáng)生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF－1)的作用而引起的［21］。而T4濃度的降低說明馬齒莧多糖的添加有利于T4向T3的轉(zhuǎn)化，其效應(yīng)可能與靶器官中5－脫氫碘酶的活性升高有關(guān)［26］。

人和動(dòng)物的生長(zhǎng)主要受促生長(zhǎng)激素軸(生長(zhǎng)軸)的調(diào)控，生長(zhǎng)軸主要是由下丘腦—垂體—靶器官所分泌的一系列激素及其受體所組成的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)。GH和IGF－1是生長(zhǎng)軸中調(diào)節(jié)動(dòng)物生長(zhǎng)的主要激素，而生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)刺激GH的分泌，從而誘導(dǎo)靶細(xì)胞產(chǎn)生IGF－1，共同促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，提高蛋白質(zhì)和RNA的生物合成，進(jìn)而促進(jìn)肌肉和內(nèi)臟器官的生長(zhǎng)［21］。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，馬齒莧多糖的添加使GHRH有升高的趨勢(shì)，同時(shí)顯著提高血液GH濃度，這與雛雞生長(zhǎng)性能的提高有著必然的聯(lián)系;而GH濃度的升高有效刺激了IGF－1的分泌，二者共同發(fā)揮生理功效可能是促進(jìn)雛雞生長(zhǎng)的主要原因。

3.3 馬齒莧多糖對(duì)雛雞血脂含量的影響

血脂是血中所含脂質(zhì)的總稱，血脂升高會(huì)增加心血管疾病和冠心病發(fā)生幾率，而常用的降血脂藥，如煙酸酯或他汀類藥物長(zhǎng)期服用對(duì)肝臟有一定損害，因此尋找低毒有效調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的藥物成為臨床研究的熱點(diǎn)。文獻(xiàn)報(bào)道，中藥多糖無毒副作用，并具有顯著降血脂效應(yīng)［27－30］。馬齒莧為藥食兩用馬齒莧科植物，研究證實(shí)，馬齒莧及其多糖對(duì)高血脂大鼠及糖尿病小鼠均具有較強(qiáng)的調(diào)節(jié)血脂代謝的作用［31－32］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，灌服不同劑量的馬齒莧多糖，各試驗(yàn)組雛雞血清TG、TC和LDL－C含量均呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，HDL－C和HDL－C/TC呈現(xiàn)不同程度的提高。從整個(gè)試驗(yàn)期來看，質(zhì)量濃度為20 mg/mL的試驗(yàn)組降低血清TG、TC和LDL－C含量及提高HDL－C的效果最好。這與米糠多糖和枸杞多糖降血脂的作用效果相近［33－34］，認(rèn)為多糖作為降血脂輔助藥物具有廣闊開發(fā)前景。

4 結(jié)論

適宜濃度的馬齒莧多糖(20 mg/mL)能夠通過調(diào)控雛雞血液激素分泌水平，提高雛雞日增重，降低料重比，有效提高飼料轉(zhuǎn)化率，并具有一定的降血脂功效。

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