高效液相色譜－紫外分光光度法測定奧美沙坦酯片劑的含量及有關物質

封宇飛 ，王志宏，倪明月，孫春華

(1.衛生部北京醫院藥學部，北京 100730； 2.北京大學藥學院，北京 100083)

奧美沙坦酯是非肽類血管緊張素Ⅱ－1型（AT1）受體拮抗劑，最早由日本Sankyo公司研制開發，并于2002年5月獲得美國FDA批準上市。本品主要用于治療高血壓。與其他的血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑類藥物相比，本品的劑量小、起效快，服用方便，降壓作用更強而持久，不良反應的發生率低，具有明顯的優點。有關奧美沙坦酯及其代謝產物奧美沙坦在血漿中濃度的測定已有報道[1－7]。筆者采用高效液相色譜－紫外分光光度（HPLC－UV）法測定奧美沙坦片劑的含量及其有關物質，現報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀；奧美沙坦酯對照品（含量99.2%）由北京邁勁醫藥科技有限公司提供，奧美沙坦片（商品名為傲坦，批號分別為 100010，100020，100030，規格為 20 mg），由上海三共制藥有限公司提供；乙腈為色譜純，三乙胺和磷酸為分析純，水為重蒸水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：美國奧泰 Apollo C18柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相：0.1% 甲酸水溶液 － 乙腈（67.5 ∶32.5）；流速 1.0 m L ／min；檢測波長：254 nm；進樣量：10μL。在上述條件下，奧美沙坦酯與其有關物質實現基線分離，理論板數以奧美沙坦酯計算不低于8 000。

2.2 溶液制備

精密稱取片劑適量（約相當于奧美沙坦酯10mg），置100 mL量瓶中，加乙腈適量振搖使溶解，乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液4 m L，置100 m L量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密稱取對照品約10 mg，置100 m L量瓶中，加乙腈適量振搖使溶解，乙腈稀釋至刻度，作為對照品儲備液。精密量取此儲備液4 m L，置100 m L量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 方法學考察

專屬性考察：取奧美沙坦酯對照品適量，分別在下述條件下進行試驗。堿破壞：加0.1 mol／L氫氧化鈉溶液適量使溶解，水浴加熱2 h，放冷，加酸中和，加流動相至規定體積，作為堿降解產物溶液；酸破壞：加0.1mol／L鹽酸溶液適量使溶解，水浴加熱2 h，放冷，加堿中和，加流動相至規定體積，作為酸降解產物溶液；高溫破壞：直火加熱熔融后，放冷，用乙腈溶解，加流動相稀釋，作為高溫降解產物溶液；光破壞：紫外燈下照射48 h，用乙腈溶解，加流動相稀釋，作為光降解產物溶液。色譜圖見圖1。圖中各雜質峰與主峰均有很好的分離。空白溶液色譜圖見圖1A。

線性關系考察：分別精密吸取 2.2項下對照品溶液 0.5，1，2，4，6，8，10m L，置 100 m L 量瓶中，加流動相至刻度，制成不同質量濃度的對照品系列溶液，進樣10μL。結果顯示在0.5～10μg／mL質量濃度范圍內質量與峰面積呈良好線性關系。以峰面積（Y）對質量濃度（X）進行回歸分析，得線性方程 Y＝0.204 3X＋1.042 7，r＝0.999 6（n＝5），定量限為 0.5μg／m L。

精密度試驗：取本品（批號為060060），照2.2項下的方法于同一日內測定5次和連續測定5 d，計算日內和日間精密度，結果日內平均含量為 99.6%，RSD為 0.3%；日間平均含量為99.1%，RSD為0.5%。穩定性試驗：取供試品溶液分別放置0，2，4，6，8，10 h 后進樣品測定，結果在 10 h 內，供試品溶液的峰面積的 RSD為0.3%，表明供試品在流動相中穩定。

加樣回收試驗：精密稱取供試品（批號為110020）9份，各約相當于奧美沙坦10 mg，置100 m L量瓶中，分別加乙腈適量振搖使溶解，并用乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液1mL，置100 mL量瓶中，分別精密加入 2.3項下的貯備液 0.5，2，8 mL各3份，加流動相稀釋至刻度，搖勻，依法測定。結果每個質量濃度的回收率依次為 101.1% ，99.5% ，98.3% ，RSD 分別為 1.2% ，0.7% ，0.3% （n ＝3）。

圖1 高效液相色譜圖

2.4 樣品含量測定

按2.2項下制備供試品溶液和對照品溶液，依法測定，3批樣品的含量測定，結果見表1。

2.5 樣品有關物質檢查

精密量取供試品溶液3 mL，置100 m L的量瓶中，加流動相稀釋至刻度，作為自身對照溶液（3.0%）。精密量取對照品溶液和供試品溶液各40μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2.5倍，按不加校正因子的主成分自身對照法以峰面積計算有關物質的量，結果見表1。

表1 3批樣品的含量測定及有關物質檢查結果(%)

3 討論

取奧美沙坦酯對照品適量，用流動相配制成適當質量濃度的溶液，在200～400 nm波長范圍內進行紫外掃描。結果顯示，奧美沙坦酯在254 nm波長附近有最大吸收，因此，選擇254 nm為檢測波長。

分別用甲醇、稀醋酸溶液、0.1mol／L 鹽酸溶液、0.1mol／L 氫氧化鈉溶液、乙腈、流動相6種不同的介質制備對照品溶液和供試品溶液并進行測定。試驗結果顯示，甲醇、稀醋酸溶液、0.1mol／L鹽酸溶液和流動相對奧美沙坦的溶解性能較差，0.1 mol／L氫氧化鈉溶液和乙腈溶解性能基本一致，但0.1mol／L氫氧化鈉溶液易使樣品降解。考慮與流動相的一致性，決定先用乙腈溶解被測樣品，再用流動相進一步稀釋。

對樣品經酸破壞，堿破壞，高溫破壞，光照破壞后的分解產物的色譜分離試驗結果表明，本法專屬性強，適用于含量測定，也可用于有關物質的測定。

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