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食管癌患者術后切口膿液中檢出溶血二氧化碳嗜纖維桿菌一例

2013-09-11 07:11:36范珊紅汪定成邵海連
檢驗醫學 2013年8期

戈 偉,范珊紅,汪定成,邵海連,楊 銘

(第四軍醫大學唐都醫院感染管理科,陜西 西安 710038)

二氧化碳嗜纖維菌屬是細小梭狀的革蘭陰性桿菌,其與牙周疾病密切相關,也可引起其他系統感染。由該菌引起感染的病例報道國內少見,國外報道也不多[1]。我們從唐都醫院1例食管癌患者術后切口膿液中分離出1株溶血二氧化碳嗜纖維桿菌。

一、病例

患者,男,65歲,工人,以進食后胸骨后疼痛不適半年于2012年2月25日入院,確診為食管癌。于2012年3月7日進行食管部分切除、食管胃胸膜頂器械式吻合加淋巴結清掃術,術后第3天患者體溫升高,達 38.9℃,白細胞 15.15×109/L,中性粒細胞 0.946,淋巴細胞 0.029,紅細胞3.20 ×1012/L,血紅蛋白 99 g/L,血小板164×109/L,肝腎功能均正常。查體:雙肺呼吸音清晰,未聞及干濕啰音,左肺呼吸音低。胸部計算機體層掃描檢查提示,雙側胸膜腔積液,左側胸壁皮下氣腫。行胸腔閉式引流術,引流出淡紅色液體約500 mL及少量氣泡。換藥時見傷口紅腫,局部有滲出,拆開部分見有膿性液體滲出,抽取膿性液體送細菌培養,檢出溶血二氧化碳嗜纖維桿菌,用紙片擴散法做藥物敏感性試驗,結果顯示該菌對亞胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、左氧氟沙星敏感,對哌拉西林、頭孢噻肟、阿米卡星耐藥。臨床采用亞胺培南及美羅培南治療1周后患者雙肺呼吸音清晰,未聞及干濕啰音,傷口無滲出,創面新鮮有肉芽組織長出,愈合良好。

二、細菌學檢查

患者直接涂片為革蘭陰性桿菌,絲狀梭形桿菌,見圖1,接種3塊血瓊脂分別放置需氧環境、厭氧環境及10%CO2環境培養,經35℃培養48 h后,需氧環境平板上無細菌生長,厭氧環境及10%CO2環境平板長出直徑約2~3 mm灰白色、稍凸起、沿劃線擴散生長、呈條紋樣邊緣的菌落。涂片染色鏡檢為革蘭陰性桿菌,菌體呈絲狀,似梭形,見圖2。該菌氧化酶、觸酶均為陰性,采用美國西門子公司的WalkAway-96全自動微生物分析儀苛養菌鑒定板上機檢測,結果為二氧化碳嗜纖維桿菌屬,鑒定值99.99%,生物編碼77477661。進一步做補充生化試驗,葡萄糖O/F發酵、乳糖、蔗糖、硝酸鹽還原、七葉苷、半乳糖苷酶試驗陽性,精氨酸、蜜二糖試驗陰性。根據生化特性與形態染色,確定為溶血二氧化碳嗜纖維桿菌。

圖1 二氧化碳嗜纖維桿菌直接涂片革蘭染色鏡下形態(×1000)

圖2 二氧化碳嗜纖維桿菌純培養涂片革蘭染色鏡下形態(×1000)

三、討論

二氧化碳嗜纖維桿菌屬是1979年提出來的,根據16S RNA的序列分析,該菌屬可分為3個組:(1)溶血二氧化碳嗜纖維桿菌、黃褐二氧化碳嗜纖維桿菌、生痰二氧化碳嗜纖維桿菌;(2)牙齦二氧化碳嗜纖維桿菌、顆粒二氧化碳嗜纖維桿菌;(3)狗咬二氧化碳嗜纖維桿菌、犬咬二氧化碳嗜纖維桿菌[2]。黃褐二氧化碳嗜纖維桿菌、生痰二氧化碳嗜纖維桿菌、牙齦二氧化碳嗜纖維桿菌鑒別比較困難,他們都是氧化酶、觸酶、精氨酸雙水解酶陰性。溶血二氧化碳嗜纖維桿菌、黃褐二氧化碳嗜纖維桿菌能發酵半乳糖、糖原,但硝酸鹽反應陰性,這一點與生痰二氧化碳嗜纖維桿菌不同。牙齦二氧化碳嗜纖維桿菌與其他2種菌不同的是七葉苷、乳糖和蜜三糖的發酵反應陰性或結果可變。另2種寄居在人體的二氧化碳嗜纖維桿菌——顆粒二氧化碳嗜纖維桿菌和溶血二氧化碳嗜纖維桿菌區別是溶血二氧化碳嗜纖維桿菌硝酸鹽反應,水解七葉苷及糖原和菊粉的發酵反應均陽性。從動物中分離的狗咬二氧化碳嗜纖維桿菌與犬咬二氧化碳嗜纖維桿菌與人體分離的二氧化碳嗜纖維桿菌不同之處是他們的氧化酶、觸酶及精氨酸雙水解酶陽性。狗咬二氧化碳嗜纖維桿菌和犬咬二氧化碳嗜纖維桿菌區別是前者不能發酵菊粉、蜜三糖、蔗糖。

二氧化碳嗜纖維桿菌主要寄生人類口腔中,為條件致病菌。本案例為食道癌患者,可能與免疫功能減低引起該菌感染有直接關系。由于二氧化碳嗜纖維桿菌為兼性厭氧菌或微需氧菌,對營養及孵育的條件要求苛刻,生長緩慢,培養周期較長,國內報道該菌引起的感染甚少,應引起臨床及實驗室高度重視。盡管目前試驗技術還沒有商業化,但是DNA同源分析、16S RNA的限制片段長度多態性以及細胞蛋白圖譜等方法已經用來鑒別二氧化碳嗜纖維桿菌屬。

[1]陳東科,胡付品.二氧化碳嗜纖維菌對β-內酰胺類抗生素的耐藥性分析及基因型檢測[J].實用檢驗醫師雜志,2011,3(4):198-202.

[2]徐國建,梁國棟,邢來君,等.臨床微生物學手冊[M].北京:科學出版社,2005:797-804.

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