蒽酮-硫酸法測定蒙藥驢耳風毛菊多糖的含量

師永晶

（錫盟藥品檢驗所，內蒙古 錫林浩特 026000）

菊科(Compositae)風毛菊屬(Saussurea)系多年生草本植物，該屬植物化學成分主要有倍半萜、三萜、甾體、黃酮、香豆素、有機酸、多糖類等。藥理作用主要表現(xiàn)為抗腫瘤、抗炎、抗衰老、改善心血管系統(tǒng)機能等[1]。驢耳風毛菊Saussurea amara（L）DC為常用的民族醫(yī)藥材。蒙醫(yī)學認為，驢耳風毛菊性苦、寒、殺粘，清熱解毒，止痛消腫，用于發(fā)疹，心熱，血熱，感冒發(fā)燒等癥[2]。本文對多糖含量進行了測定。

1 試驗材料

葡萄糖、蒽酮、硫酸均為AR（市售）。210型可見紫外分光光度計（日本島津）。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的配制、顯色劑的配制及蒽酮-硫酸法最大吸收波長的選擇：取葡萄糖約6mg，精密稱定，置100mL量瓶中，用水溶解稀釋至刻度，即為葡萄糖對照品溶液（60μg·mL-1）。蒽酮溶于硫酸中，配制成.5%濃度。棕色瓶保存。精密吸取0.6mL對照品溶液，加蒸餾水至2.0mL，加入0.5%的蒽酮硫酸溶液4mL，混勻，同法制的陰性溶液，振搖10min，置沸水浴中15min，然后置冷水中冷卻30min，同法制得陰性對照溶液，在可見紫外分光光度計200~800nm范圍內測定吸收度，結果最大吸收波長λmax=615nm.

2.2 線性化范圍試驗：精密吸取.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2mL葡萄糖對照品溶液，加蒸餾水至.0mL，加入0.5%的蒽酮溶液4mL，混勻，振搖min，置沸水浴中min，然后置冷水中冷卻30min，在可見紫外分光光度計615nm，處測定吸收度。經回歸處理回歸方程如下A=-0.1120+0.0005x，r=0.999。在,12.0～72.0μg·mL-1范圍內葡萄糖量與吸收度成一條不通過原點的直線，供試品溶液測定可采用外標兩點法定量。

2.3 精密度試驗：精密吸取0.6mL葡萄糖對照品溶液，加蒸餾水至2.0mL，照上述蒽酮 -硫酸法顯色，按上法測定吸收度次，吸收度分別為.265，0.264，0.265，0.267，0.264,RSD=0.46%。

2.4 穩(wěn)定性試驗：精密吸取0.6mL葡萄糖對照品溶液，加蒸餾水至2.0mL，照上述蒽酮-硫酸法顯色，按上法測定吸收度，每隔20min測定1次。結果，RSD=0.98%,在2h內穩(wěn)定。

2.5 加樣回收率的測定：取驢耳風毛菊粉末（80目,105℃干燥h，）約.8g，6份，精密測定，其中份不加葡萄糖對照品，作為隨行對照，其余5份分別加入精密稱定的葡萄糖對照品，余下操作按“2.6.1供試品溶液制備”方法處理，得到5份加樣回收率供試品溶液。精密吸取0.25mL各加樣回收率供試品溶液，按上述蒽酮-硫酸法顯色，按上法測定吸收度，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗

2.6 含量測定

2.6.1 供試品溶液的制備及含量測定：取不同產地驢耳風毛菊粉末（80目,105℃干燥h，）約g，精密稱定，加水100 mL，回流提取次，每次30min。合并提取液，濃縮至mL，加%乙醇至含量%，攪拌min，放置24h，過濾，殘渣用%的乙醇洗滌，然后用丙酮洗滌，自然干燥后用水溶解轉移至100mL量瓶內，用水稀釋至刻度，即得供試品溶液。精密吸取0.25mL供試品溶液，加水至2 mL，照上述蒽酮-硫酸法顯色，按上法測定吸收度，根據外標法計算不同產地驢耳風毛菊中多糖含量，錫盟、阿盟、呼盟、烏盟、呼市多糖含量分別為6.32%、6.11%、5.31%、7.25%、6.52%，平 均 含 量 為6.30%。

3 討 論

硫酸-蒽酮法是測定多糖含量的較為常用的方法，其原理為多糖類在濃硫酸作用下先水解為單糖分子，并迅速脫水生成糠醛衍生物，糠醛衍生物再與蒽酮結合成有色化合物以比色法在適當波長測定多糖含量。本文采用加水回流提取多糖，提取液加乙醇至85%沉淀，沉淀物用85%乙醇、丙酮洗滌，自然干燥，樣品為白色粉末，用蒽酮-硫酸顯色法測定多糖含量。測定結果，驢耳風毛菊多糖平均含量為6.30%。該方法簡單、可靠、重現(xiàn)性好，可用于藥材的質量控制方法之一。

[1]王紅兵,秦國偉．風毛菊屬植物的化學成分和生物活性[J]．國外醫(yī)學－植物藥分冊,20（2）;47．

[2]藥典委員會．中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準－蒙藥分冊 [S]．1998,21.