胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2的表達及臨床意義

張忠祥

窯街煤電有限責任公司總醫院消化科，甘肅蘭州 730080

胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2的表達及臨床意義

張忠祥

窯街煤電有限責任公司總醫院消化科，甘肅蘭州 730080

目的 研究胃癌患者血清中血管內皮生長因子-C（VEGF-C）、血管生成素-2（Ang-2）的表達變化及其與胃癌的臨床病理特征的關系，探討VEGF-C與Ang-2在胃癌中的相互關系。 方法收集120例胃癌患者及49例健康者（對照組）血清，采用酶聯免疫吸附技術（ELISA）檢測血清中VEGF-C、Ang-2水平。 結果 胃癌患者血清中VEGF-C、Ang-2含量較對照組均明顯升高，差異具有統計學意義（P<0.05）；VEGF-C表達水平升高與胃癌淋巴結轉移（P<0.01）、浸潤深度（P<0.05）、TNM 分期（P<0.01）相關；Ang-2 表達水平升高與胃癌淋巴結轉移（P<0.01）、浸潤深度（P<0.01）、TNM 分期（P<0.01）相關；VEGF-C 與 Ang-2 表達成正相關關系（r=0.478，P<0.05）。 結論血清中VEGF-C、Ang-2可作為胃癌生物學指標，兩者聯合可能成為判斷胃癌淋巴結轉移及預后的重要指標。

胃癌；血管內皮生長因子-C；血管生成素-2；酶聯免疫吸附實驗；淋巴結轉移

胃癌是消化系統最常見的惡性腫瘤之一，其死亡率位于消化系統腫瘤首位。胃癌的浸潤和轉移是導致患者死亡和預后較差的重要原因。而胃癌作為實體腫瘤，其浸潤轉移依賴于腫瘤血管生成[1]。目前研究認為腫瘤的血管生成是一系列血管生長刺激因子和抑制因子作用失衡的結果。血管內皮生長因子-C（vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C）屬于VEGF家族成員之一，是特異性的淋巴管生成因子，被認為與腫瘤病理過程中的淋巴管生成密切相關[2]。研究認為VEGF-C是通過自分泌和旁分泌兩種機制同時促進胃癌的進展[3]。 血管生成素-2（angiopoietin-2，Ang-2）是近年來發現的與血管生成及血管成熟有關的因子，Ang-2與Ang-1能夠競爭性結合內皮細胞Tie-2受體，誘導內皮細胞分裂移位，促進新生血管生長[4]。近來研究發現，Ang-2的促進腫瘤血管生成作用可能與VEGF因子的表達密切相關。本研究應用酶聯免疫吸附實驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測胃癌患者血清中VEGF-C及Ang-2蛋白的表達情況，探討其與胃癌發生的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2010年9月～2012年4月本院確診的胃癌住院患者120例，所有病例均經病理確診，采用2010年國際抗癌聯盟/美國癌癥聯合委員會（UICC/AJCC）TNM分期標準，Ⅰ期20例，Ⅱ期26例，Ⅲ期38例，Ⅳ期36例；排除冠心病、高血壓及糖尿病等慢性疾病及胃轉移癌；其中，男75例，女45例，年齡34～79歲，中位年齡48歲。選擇同期本院體檢人員中的健康者49例對照組，其中，男30例，女19例，年齡32～59歲，中位年齡為42.5歲。兩組年齡、性別比較，差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 樣本收集及檢測

所有被檢患者術前均未進行放、化療，取清晨空腹靜脈血3～4 ml，非抗凝管保存，室溫靜置0.5 h后2000 r/min離心分離血清，-80℃保存待測；血清中VEGF-C及Ang-2蛋白的含量按照ELISA試劑盒說明書檢測，在波長450 nm下讀取光密度值并計算VEGF-C、Ang-2的濃度。所有試劑盒均購自美國ADL公司。

1.3 統計學方法

應用SPSS 16.0統計學軟件處理數據，計量資料采用均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗和Pearson相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清VEGF-C和Ang-2水平的比較

胃癌患者血清中VEGF-C、Ang-2含量較對照組明顯升高，差異有統計學意義（P<0.05）（表1）。血清VEGF-C和Ang-2 呈正相關（r=0.478，P<0.05）。

表1 兩組血清VEGF-C和Ang-2水平的比較（ng/ml，±s）

表1 兩組血清VEGF-C和Ang-2水平的比較（ng/ml，±s）

與對照組相比，*P<0.05

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2.2 胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2與臨床病理特征的相關性

血清中VEGF-C含量與胃癌患者淋巴結轉移、浸潤深度、TNM分期有關（P<0.05），與性別、年齡、有無遠處轉移無關（P>0.05）；胃癌患者血清Ang-2含量與淋巴結轉移、浸潤深度、TNM分期有關（P<0.05），與性別、年齡、有無遠處轉移無關（P>0.05）（表 2）。

表2 胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2與臨床病理特征的相關性

3 討論

腫瘤的生長依賴于新生血管且與腫瘤的發展密切相關，新生腫瘤血管不僅供給腫瘤細胞充足的營養及氧氣，其內皮細胞還通過旁分泌作用及產生腫瘤生長啟動因子直接促進腫瘤細胞生長[5]。VEGF-C是目前發現的強力促血管形成因子之一，也是腫瘤細胞分泌的促血管形成的關鍵因子，VEGF-C可直接作用于血管內皮細胞并刺激有絲分裂，改變血管內皮細胞通透性，為新生血管提供基質和支持，從而促進腫瘤細胞的生長和轉移[1]。Hachisuka等[6]研究表明，胃癌組織VEGF-C表達與淋巴結轉移密切相關，可用于胃癌患者術前對淋巴結轉移的判斷。趙金偉[7]等研究發現，胃癌患者術前血清VEGF-C水平較健康人群明顯升高，且胃癌患者血清VEGF-C水平與組織VEGF-C表達無關。本研究發現，胃癌組血清中VEGF-C含量明顯高于對照組，且有淋巴結轉移的VEGF-C水平明顯高于無淋巴結轉移者，浸及漿膜層者VEGF-C水平明顯高于未浸及漿膜層者，TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者VEGF-C水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者，以上結果提示VEGF-C可能參與胃癌浸潤及轉移，有望成為評價胃癌淋巴結轉移及預后的有效指標。

血管生成素是與血管生成有關的一個家族，包括Ang-1、Ang-2、Ang-3和Ang-4 4個成員。Ang-2基因位于第8號染色體短臂（8p23），表達分泌型蛋白。Ang-2與受體Tie-2結合，使后者不能磷酸化，從而阻斷血管穩定信號，引起血管不穩定[4]。Ang-2可促進腫瘤性血管新生，刺激血管內皮始祖細胞增殖，誘導內皮細胞蛋白酶的產生；直接分泌信號肽啟動腫瘤早期血管形成信號，參與腫瘤發生發展[8]。本研究發現，胃癌患者血清中Ang-2含量明顯升高，與胃癌淋巴結轉移、浸潤深度、TNM分期有關，提示Ang-2可能通過調控腫瘤血管生成，參與胃癌的淋巴結轉移及浸潤。Ang-2生物學功能取決于細胞內環境和其他血管再生因子的相互作用。Ley[9]等研究發現在VEGF、bFGF存在時Ang-2能夠促進內皮細胞增殖，缺乏時Ang-2又可誘導細胞凋亡。Engin[4]等發現Ang-2可能由于胞質內容物不同而呈現促進或抑制血管生成的作用，胃癌中Ang-2而不是Ang-1與Tie-2的結合及其在胞質內濃度與腫瘤血管生成相關。Ang-2伴隨VEGF的表達上調，促進新生血管生成；當Ang-2強表達時，局部缺氧得到緩解，VEGF表達水平降低，導致血管的退化[10]。張真真等[11]發現，Ang-2/Ang-1的比值可能是決定胃癌血管生成和腫瘤生長的最終因素，推測在胃癌血管生成中血管生成素及其受體系統的調節作用是以Ang-2的作用為主導的。

目前臨床對于VEGF-C與Ang-2在胃癌中關系的研究比較少，本研究證實在胃癌患者血清中，VEGF-C與Ang-2表達均上調，且兩者呈正相關關系，提示胃癌中這兩種因子可能共表達并共同參與腫瘤血管形成這一病理過程。但具體的分子調控機制尚需進一步實驗證實。隨著對VEGFC及Ang-2研究的深入，VEGF-C和Ang-2可望成為腫瘤臨床治療的新靶點。

[1]Villarejo-Campos P，Padilla-Valverde D，Martin RM，et al.Serum VEGF and VEGF-C values before surgery and after postoperative treatment in gastric cancer[J].Clin Transl Oncol，2013，15（4）：265-270.

[2]Gou HF，Chen XC，Zhu J，et al.Expressions of COX-2 and VEGF-C in gastric cancer：correlations with lymphangiogenesis and prognostic implications[J].J Exp Clin Cancer Res，2011，30：14.

[3]Wang L，Zhang D，Chen XR，et al.Expression of vascular endothelial growth factor（VEGF） and VEGF-C in serum and tissue of Wilms tumor[J].Chin Med J（Engl），2011，124（22）：3716-3720.

[4]Engin H，Ustündag Y，Ozel Tekin I，et al.Plasma concentrations of Ang-1，Ang-2 and Tie-2 in gastric cancer[J].Eur Cytokine Netw，2012，23（1）：21-24.

[5]Belugali Nataraj N，Salimath BP.Crosstalk between VEGF and novel angiogenic protein regulates tumor angiogenesis and contributes to aggressiveness of breast carcinoma[J].Cell Signal，2013，25（1）：277-294.

[6]Hachisuka T，Narikiyo M，Yamada Y，et al.High lymphatic vessel density correlates with overexpression of VEGF-C in gastric cancer[J].Oncol Rep，2005，13（4）：733-737.

[7]趙金偉.胃癌患者血清VEGF-C和VEGF-A的水平變化及VEGFC在胃癌組織中的表達[J].吉林大學學報：醫學版，2006，32（3）：1214-1216.

[8]Liu X，Li Y，Wei J，et al.Role of Ang-2，Tie-2 and VEGFR-2 in angiogenesis in colorecal carcinoma and their prognostic value[J].Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao，2012，32（11）：1658-1662.

[9]Ley CD，Olsen MW，Lund EL，et al.Angiogenic synergy of bFGF and VEGF is antagonized by Angiopoietin-2 in a modified in vivo matrigel assay[J].Microvasc Res，2004，68（3）：161-168.

[10]Danza K，Pilato B，Lacalamita R，et al.Angiogenetic axis angiopoietins/Tie2 and VEGF in familial breast cancer[J].Eur J Hum Genet，2013，21（8）：824-830.

[11]張真真.促血管生成素及其受體的異常表達與胃癌血管生成的關系[J].中華腫瘤雜志，2006，28（4）：280-284.

Expression and clinical significance of serum VEGF-C and Ang-2 in patients with gastric cancer

ZHANG Zhong-xiang

Department of Gastroenterology,Genaral Hospital of Yaojie Coal Electricity Group Co.Ltd in Gansu Province,Lanzhou 730080,China

ObjectiveTo study the relationship between expression changes of serum vascular endothelial growth factor-C(VEGF-C)and angiogenin-2(Ang-2)in patients with gastric cancer and clinicopathological features of gastric cancer,and to investigate the mutual relations of VEGF-C and Ang-2 in gastric cancer.MethodsThe serum of 120 patients with gastric cancer and 49 cases of health people(control group)were collected and levels of VEGF-C and Ang-2 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsThe levels of VEGF-C and Ang-2 in patients with gastric cancer were markedly higher than that of control group with statistically significant difference(P＜0.05).Elevated levels of VEGF-C expression was related to and lymph node metastasis of gastric cancer(P＜0.01),depth of invasion(P＜0.05)and TNM stage(P＜0.01);elevated levels of Ang-2 expression were related to lymph node metastasis of gastric cancer(P＜0.01),depth of invasion(P＜0.01)and TNM stage(P＜0.01);VEGF-C and Ang-2 expression was positively correlated(r=0.478,P＜0.05).ConclusionSerum VEGF-C,Ang-2 can be used as biological indicators of gastric cancer,their combination may become important indicators of judging lymph node metastasis and prognosis of gastric cancer.

Gastric cancer;Vascular endothelial growth factor-C;Angiopoietin-2;Enzyme-linked immunosorbent assay;Lymph node metastasis

R735.2

A

1674-4721（2013）08（c）-0012-03

2013-03-28 本文編輯：魏玉坡）