消炎止癢搽劑體外抑菌試驗研究

李正平 李琳 張莉 徐俊鴻 陳麗敏

“消炎止癢搽劑”(由苦參、白礬、蛇床子、大黃、地膚子、荊芥、黃芩、穿心蓮、黃柏、薄荷腦等中藥組成)，由順德區中醫院院內制劑“消炎止癢散”經改劑型而來，具有消炎殺菌，燥濕止癢的作用，臨床上用于濕疹、疥瘡、細菌性、真菌性皮膚疾病等。臨床應用近20年，療效確切。由于消炎止癢散存在劑型適應范圍小，在使用時需要加熱水浸泡，有效成分溶出率低，療效和質量控制有提高的空間等因素，擬通過劑型改良，使其更適于臨床應用。本文對其劑型改良前后的抑菌作用做一比較，以其為改劑型研究提供實驗基礎，同時為消炎止癢搽劑消炎殺菌、燥濕止癢的臨床功效提供一定的實驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 抑菌試驗待檢藥物 消炎止癢散供試液：取消炎止癢散40 g，加沸水500 ml浸泡提取1 h，時時振搖，濾過，取續濾液濃縮至20 ml，制備成含1 g/ml生藥，滅菌備用[1]。

消炎止癢搽劑：精密吸取消炎止癢搽劑適量，濃縮制備成含1 g/ml生藥，滅菌備用。

1.1.2 供試菌株 白色念珠菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌由廣東省臨檢中心提供。

首先將供試菌種接種在適于生長的培養基內，置于37℃恒溫箱中培養24 h，待菌種復壯后使用。再取復壯的菌種，接種到營養肉湯中，置于37℃恒溫箱中培養24 h備用。

1.1.3 培養基制備 營養肉湯：牛肉膏3 g、蛋白胨10g、氯化鈉5 g、蒸餾水1000 mL，制備，滅菌備用。

營養瓊脂：牛肉膏3 g、蛋白胨10g、氯化鈉5 g、瓊脂20 g、蒸餾水1000 mL，制備，滅菌備用。

1.1.4 試驗器材 離心機、離心管、高壓蒸汽滅菌器、冰箱、培養箱、無菌工作臺、研缽、三角燒瓶、天平、電爐、燒杯、酒精燈、移液器、接種環、游標卡尺、打洞器、棉簽、平皿和試管(高壓滅菌后備用)，以上器材均有廣東海洋大學臨床獸醫學實驗室提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 供試中藥藥物敏感性測定 采用藥敏試驗的平皿打洞法[2]，即用滅菌棉簽蘸取供試菌液，均勻涂布于營養瓊脂平板上，然后用直徑7mm的瓊脂打孔器均勻打孔，每板4孔，去除孔內瓊脂并適當封閉孔底。將供試藥液加于孔中，以滿而不溢為宜并作好標記。置4℃冰箱中作用1 h后取出并置于37℃恒溫箱中培養24 h，觀察結果。結果判定：抑菌圈直徑小于10 mm為耐藥，10～15 mm為中度敏感，大于15 mm為高度敏感。

1.2.2 最小抑菌濃度(MIC)測定 取無菌試管24支，分成兩組，每組12支，編號。除第一管外，各管中都加入無菌肉湯培養基10 ml，然后于第1管加入試液20 ml，吸出10 ml加至第2管中，混勻;再從第2管中吸取10 ml加至第3管。同法稀釋至第10管，11、12管作陰性和陽性對照。

吸取以上各管液體5 ml于滅菌平皿中，加入20 ml普通肉湯瓊脂培養基，混勻放冷至室溫。每管液體作兩塊平皿。除第11、12管外，其余平皿均劃7個區域，分別接種經18 h培養，濃度為105 CFU/ml的菌液0.01 ml，37℃培養24 h，觀察結果，以結果不出現交叉為準。未見細菌生長的最低濃度為MIC。

2 試驗結果

最小抑茵濃度(MIC)測定結果：在37℃溫箱中培養24 h后，取出試管，肉眼觀察各種藥物抑菌效果，判斷細菌生長情況，結果顯示，對白色念珠菌，消炎止癢散的最小抑菌濃度(MIC)為1/4，消炎止癢搽劑的最小抑菌濃度(MIC)為1/32;對銅綠假單胞菌，消炎止癢散不敏感，消炎止癢搽劑的最小抑菌濃度(MIC)為1/32;對金黃色葡萄球菌，消炎止癢散不敏感，消炎止癢搽劑的最小抑菌濃度(MIC)為1/512;對表皮葡萄球菌，消炎止癢散不敏感，消炎止癢搽劑的最小抑菌濃度(MIC)為1/512。見表1。

表1 消炎止癢搽劑改劑型前后對標準菌株抑菌效果

3 小結

綜合以上試驗結果，表明消炎止癢搽劑具有一定的抑菌作用。并且，通過劑型改良后，消炎止癢搽劑對白色念珠菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等的抑菌效果優于消炎止癢散[3，4]。說明通過劑型改良，消炎止癢搽劑在一定程度上體外抑菌作用更好，更適于臨床應用。這可能是由于劑型改良后，藥物中抑菌的有效成分溶出度有所增加而致。這為本院該制劑在皮膚科疾病上的臨床應用提供了一定的參考。相信經過劑型改良，該制劑的社會效益和經濟效益將有所提高，臨床應用前景將更加可觀。

[1]徐淑云，汴如濂，陳修.藥理實驗方法學.第3版.北京：人民衛生出版社，2003：13-62.

[2]曾斌，呂萍，候曉慧.消炎止癢噴霧劑毒理學實驗研究.中國醫藥導報，2008，5(32)：12-13.

[3]鄭永平，王海棠，李錦芳.消炎止癢洗劑聯合特比萘芬治療足癬，2009，11(47)：32.

[4]黃曉敏，廖玲軍，曾松榮，等.梅花冰片3種劑型體外抗菌活性研究.江西中醫學院學報，2005，17(1)：63-65.