謝麗曲 詹湉湉 陳婉如 王長康 林麗花 曾興有
(1.福建農林大學動物科學學院 福州 350002;2.福建省農業科學院畜牧獸醫研究所 福州 350013;3.福建省華龍集團飼料有限公司 福州 350003)
飼用抗生素由于其具有防病促生長作用,在畜禽生產中得到了廣泛應用,但若濫用將對環境和食品安全帶來危害。因此,尋找抗生素替代品,減少或取消抗生素在畜禽生產中的應用已成為迫在眉睫的問題。益生素具備無耐藥性、無殘留、無毒副作用和抗逆性強等特點在眾多飼料添加劑中脫穎而出,成為較為理想的抗生素代替品,它的發現與應用在一定程度上解決了抗生素殘留和動物耐藥性等問題。
凝結芽孢桿菌作為有孢子性乳酸菌,具有調節動物腸道功能紊亂、維持腸道的菌群平衡、提高動物生長性能和機體免疫力等作用,因此,凝結芽孢桿菌作為飼料添加劑受到廣泛關注。前人研究,凝結芽孢桿菌能夠抑制大腸埃希氏菌、沙門氏菌等常見腸道致病菌[1],促進尖吻鱸生長[2],提高廣西黃雞的飼料轉化率、日增重和存活率,且改善其肉質[3]。目前凝結芽孢桿菌在肉鴨上的應用研究報道較少,本研究通過在櫻桃谷肉鴨飼糧中添加不同水平的凝結芽孢桿菌制劑,以探討其對櫻桃谷肉鴨生長性能、血清抗氧化指標、免疫器官指數的影響,為凝結芽孢桿菌在櫻桃谷肉鴨配合飼料中的應用提供科學依據。
1.1 試驗材料與動物 試驗用凝結芽孢桿菌制劑(活菌含量為1×109cfu/g)由福建洛東生物技術有限公司提供。試驗用1日齡櫻桃谷公鴨,由漳州昌龍農牧有限公司提供。
1.2 試驗設計 選取體質健康、體重中等的1日齡櫻桃谷公鴨750 羽,隨機分為5 組,每組5個重復,每重復30 羽。Ⅰ組為空白對照組,飼喂基礎飼糧;Ⅱ組為抗生素對照組,在基礎飼糧中添加30 mg/kg 桿菌肽鋅;Ⅲ~Ⅴ組為試驗組,在基礎飼糧中分別添加100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg的凝結芽孢桿菌制劑,試驗期21 d。基礎飼糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎)
1.3 飼養管理 試驗在漳州昌龍農牧有限公司進行。采用網上平養,24 h 光照,第1 周控溫30 ℃,以后每周下降2 ℃,直至與環境溫度一致。每天喂料1 次,自由采食和飲水,每3 d 刮糞1 次,每周進行1 次帶鴨消毒。鴨群按常規免疫程序免疫。
1.4 測定指標及方法
1.4.1 生長性能指標測定 飼養期間記錄每日采食量,于1日齡和21日齡以重復為單位空腹稱重,計算平均日采食量、平均日增重和料重比(日采食量/日增重);每天記錄鴨存欄數及死淘數,計算成活率(成活率/%=鴨存欄數/飼養鴨數×100)。
1.4.2 血清抗氧化指標測定 于21日齡,每重復組隨機抽取2 羽體質健康、體重中等的櫻桃谷肉鴨,用真空采血管翅靜脈采血10 mL,轉移到離心管中,靜置3 min 后,3 000 r/min 離心10 min 分離血清,做好標記并于-20 ℃保存備用。
選用谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)作為血清抗氧化指標,用Microlab300 半自動生化分析儀測定,試劑盒均購自上海榮盛生物技術有限公司。
1.4.3 免疫器官指數測定 對采血后的鴨只進行屠宰(采血前稱活體重),摘取胸腺、脾臟和法氏囊,用濾紙吸去其表面血液,用手術刀片剝離脂肪,稱重,測定免疫器官指數。免疫器官(胸腺、脾臟、法氏囊)指數=免疫器官重(mg)/活體重(g)。
1.5 數據處理 數據采用spss13.0 統計軟件進行單因素方差分析,差異顯著后進行LSD 多重比較,以P<0.01(差異極顯著),P<0.05(差異顯著)作為差異顯著性判斷標準,結果用平均數±標準差(Mean±SD)表示。
2.1 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨生長性能的影響 由表2 可知,與Ⅰ組相比,試驗組櫻桃谷肉鴨平均日采食量均有所降低,而平均日增重分別提高了0.39%(P>0.05)、0.39%(P>0.05)和1.18%(P>0.05),與Ⅱ組相比差異均不顯著;料重比,試驗組較Ⅰ組分別顯著(P<0.05) 降低了1.25%、1.88%和2.5%,其他各組之間差異均不顯著(P>0.05);各組之間的成活率沒有顯著性差異(P>0.05)。

表2 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨生長性能的影響
2.2 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨血清抗氧化指標的影響 由表3 可知,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組與Ⅰ組相比,櫻桃谷肉鴨血清谷胱甘肽過氧化物酶分別提高了1.96%(P>0.05)、1.64%(P>0.05)和6.53%(P<0.05);其他各組間差異不顯著(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組的血清總超氧化物歧化酶較Ⅰ組有不同程度的提高,其中Ⅴ組提高了3.62%,但差異均不顯著(P>0.05)。各組間血清丙二醛含量差異不顯著,但試驗組均低于對照組。

表3 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨血清抗氧化指標的影響
2.3 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨免疫器官指數的影響 由表4 可知,與Ⅰ組相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組胸腺指數均有所提高,其中Ⅴ組較Ⅰ組顯著提高26.67%(P<0.05)、較Ⅲ組顯著提高26.02%(P<0.05),其他各組間差異不顯著(P>0.05)。試驗組脾臟指數較空白對照組呈上升趨勢。Ⅴ組法氏囊指數較Ⅰ組和Ⅱ均顯著提高6.37%(P<0.05)。

表4 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨免疫器官指數的影響
3.1 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨生長性能的影響 眾多研究表明凝結芽孢桿菌能產生多種營養物質供動物機體吸收利用,如維生素、短鏈脂肪酸、氨基酸、促生長因子等,它們不僅可參與動物機體的新陳代謝,還能促進小腸蠕動,改善腸道功能,從而促進機體對營養物質的消化與吸收[4-5]。試驗表明,在櫻桃谷肉鴨飼糧中添加凝結芽孢桿菌制劑能有效提高肉鴨的生長性能,降低其料重比,提高經濟效益。MARK等[6]通過研究證明,凝結芽孢桿菌在50 ℃、pH為5.0的條件下能利用戊糖-磷酸鹽途徑有效地發酵分解木質素等。李國建等[7]研究表明,生長肥育豬飼料中添加凝結芽孢桿菌制劑可顯著提高豬的平均日增重,降低飼料成本。霍軍等[8]研究也表明,在生長育肥豬飼料中添加凝結芽孢桿菌制劑可以顯著提高平均日增重,降低飼料成本和沙門氏菌陽性率,飼養效果與喹乙醇沒有差異。王彥波等[9]在羅非魚中的研究也證明了這一觀點。ALEX等[10]為評估凝結芽孢桿菌ATCC7050 對肉用仔雞生產性能、腸道組織結構及微生物菌群的影響,采用600 羽1日齡肉用仔雞隨機分成5個處理組,每個處理四個重復,試驗期42 d,結果表明,凝結芽孢桿菌ATCC7050 能提高肉用仔雞的飼料轉化率。這些研究結果與本研究結果一致。
3.2 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨血清抗氧化指標的影響 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)是一種重要的催化過氧化氫分解的酶,廣泛存在于機體內,它能特異催化還原型谷胱甘肽(GSH)與過氧化氫反應,清除體內有毒有害物質,起到保護細胞膜結構和功能完整的作用。超氧化物歧化酶(SOD)是機體內重要的氧化還原酶,是清除體內有毒氧自由基(O2-)的關鍵性酶,起到保護細胞免受損傷的作用。丙二醛(MDA)是多不飽和脂肪酸過氧化的終末代謝產物,其含量反映氧自由基介導的脂質過氧化程度。本試驗中,與空白對照組相比,試驗組通過飼喂凝結芽孢桿菌能明顯提高血清中谷胱甘肽過氧化物酶和總超氧化物歧化酶的活性,降低血清中丙二醛的含量,從而提高機體的抗氧化能力和免疫能力。
3.3 凝結芽孢桿菌對1~21日齡櫻桃谷肉鴨免疫器官指數的影響 胸腺、脾臟和法氏囊是動物重要的免疫器官,是血液T 細胞和B 細胞的來源,參與細胞免疫、體液免疫及對抗原刺激進行免疫反應等。免疫器官指數的提高在一定程度上反映機體免疫功能的增強。眾多研究表明,益生菌有提高機體免疫功能的作用[11-13]。本試驗在櫻桃谷肉鴨飼糧中添加凝結芽孢桿菌制劑,與空白對照組相比,試驗組胸腺指數、脾臟指數和法氏囊指數均有不同程度的提高,可能是凝結芽孢桿菌在消化道的識別抗原部位發揮免疫佐劑的功能,使得相關淋巴組織處于較高免疫準備狀態,從而加快免疫器官發育和免疫系統成熟[14]。與別的芽孢桿菌相似,凝結芽孢桿菌能夠分泌凝結素等抗菌物質,穿透細胞膜,對鏈球菌、金黃色葡萄球菌等致病菌有拮抗作用,從而改善機體客觀生活環境,提高機體的抗病力,減少動物疾病的發生[15]。
在1~21日齡櫻桃谷肉鴨飼料中添加凝結芽孢桿菌制劑,可以提高其生長性能、抗氧化能力和免疫功能,三個不同梯度添加量中以300 mg/kg 效果最佳。
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