靜脈血放置時間對血小板計數的影響

朱清紅，陳厚娣，邵玲（湖北醫藥學院附屬太和醫院檢驗科，湖北十堰 442000）

標本放置時間是影響血小板計數的重要因素之一［1］，由于臨床工作量大、每次成批運送等因素，血液標本采集后無法即時檢測，對檢測結果有一定影響，兒童較成年人代謝快，血小板計數受時間因素影響的程度也有所不同，為探討兒童血小板計數與時間因素的關系，作者對本院兒童門診健康體檢者236例，運用Sysmex－800i血液分析儀與鏡檢比值法進行血小板計數比較，探討檢測時間對血小板計數的影響，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源2011年9月至2012年3月本院兒童門診健康體檢者236例。

1.2 材料與儀器儀器選用上海希森美康醫用有限公司的Sysmex－800i血液分析儀，試劑為該公司配套試劑，選用日產Olympus Ch20雙目顯微鏡，計數盤為上海市求精生化試劑儀器公司提供的改良牛巴血細胞技術盤，乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）為江蘇吉春醫用器材有限公司生產。稀釋液：血小板稀釋液按《全國臨床檢驗操作規程》第3版的要求配制。

1.3 方法采集236例患兒靜脈血與EDTA－K2抗凝劑充分搖勻，血液分析儀常規做好每日室內質控，所有標本按常規操作檢測同時按《全國臨床檢驗操作規程》進行血小板手工計數，每份標本重復計數2次。

2 結果

Sysmex－800i血液分析儀立即（0min）測定值較10、30min測定值偏低，60min測定值較10、30min測定值偏高；鏡檢法立即（0min）測定值、60 min測定值較10、30 min測定值均偏低。10min與30min測定結果差異無統計學意義（P＞0.05），即時、60 min 與30 min 測定結果差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 鏡檢法與儀器法不同時間測得血小板計數（±s，×109／L）

表1 鏡檢法與儀器法不同時間測得血小板計數（±s，×109／L）

3 討論

3.1 血小板在小血管破裂處聚集，形成血小板栓，將破裂口堵住，同時釋放收縮血管的物質，如：腎上腺素、5－羥色胺等，可促進血凝，具有凝血功能；血小板對毛細血管的內皮細胞有營養和支持作用，降低毛細血管脆性，因此血小板計數顯著降低或血小板功能障礙都引起出血傾向，血小板計數的測定有利于出血性疾病的鑒別診斷，但血小板數量變化快且大［2］，因而準確的血小板計數對臨床診斷及進一步治療至關重要。

3.2 血小板可逆聚集體使即時檢測時出現假性降低新鮮靜脈血剛離開靜脈進入EDTA－K2抗凝管內后，全血因外環境發生變化，導致血小板形態改變，肌動蛋白纖維絲向中心方向延長時遇到阻力而產生向膜外方向的反作用推力，加之外膜形成微小管游離端向外伸展，血小板周圍形成絲狀偽足，數個血小板的偽足相互纏繞，形成血小板可逆聚集體［3］。EDTA－K2抗凝劑可抑制血小板的可逆聚集，使血小板無法進行進一步的不可逆聚集，因此，采血后立即（0min）運用Sysmex－800i血液分析儀與鏡檢檢測血小板計數值較30 min測定值偏低，為假性降低。

3.3 紅細胞破壞產生的碎片造成儀器測得血小板計數假性增高血液標本放置時間增長，紅細胞破壞數目不斷增多，紅細胞破壞后的碎片數量多于血小板破壞數量，血液分析儀檢測血小板時，無法辨別紅細胞碎片，因而誤將紅細胞碎片以電脈沖形式計入，使血小板計數假性增高。血細胞分析儀雖然使用便捷，但其工作原理是在網織紅細胞通道未打開的情況下以電阻法，通過識別細胞體積進行計數，細胞群交錯相織及紅細胞碎片等影響，導致儀器對血小板與紅細胞碎片的鑒別能力降低，導致儀器法60min測定值較高。

3.4 血小板胞膜薄且易破使血小板計數隨放置時間增加而降低由于血小板細胞膜十分脆弱，試管內放置30min后血小板計數與血液標本放置時間呈反比，高倍鏡下可將紅細胞碎片與血小板進行辨別，因而鏡檢法60min測定值較30min測定值下降。Hanseler認為在血小板數量異常時，儀器法變異系數（CV）高于鏡檢法，因此鏡檢法較為準確［4］。特別是對血液病患者應采用手工計數來復檢，以避免漏檢與誤檢，提高血小板計數的準確性［5－6］。

綜上所述，時間因素對血小板計數的影響很大，血標本采集后室溫放置4h 對血小板總數無明顯影響［7］。采血后10 min內血小板有可能因可逆凝集假性增高，但30 min后隨放置時間增長，血小板實際計數不斷降低；影響測量結果，因此血小板計數最佳測定時間應為采血后10～30min，儀器法在隨放置時間增長，誤差增大，因此應當進行人工鏡檢復查，以增強檢查的準確性。

［1］劉靜靜，劉巧玲.血標本放置時間對血小板計數的影響［J］.現代醫藥衛生，2007，23（15）：2330－2331.

［2］沈松坤，王厚照.導致血小板計數偏差原因的探討［J］.現代檢驗醫學雜志，2008，23（1）：127.

［3］劉曉玲，胡宏章.不同放置時間靜脈血的血小板計數分析［J］.現代臨床醫學，2011，37（4）：277－278.

［4］Hanseler E，Fehr J，Keller H.Estimation of the lower limits of manual and automated platelet counting［J］.Am J Clin Pathol，1996，105（6）：782－787.

［5］闞淑芬，丁利軍，張學英.靜脈血放置不同時間對血小板的影響［J］.現代診斷與治療，2009，20（5）：275－276.

［6］牛威.靜脈血樣本放置時間對血常規測定的影響［J］.按摩與康復醫學，2012，3（12）：14.

［7］王新花，高梅英.末梢血標本放置時間對血小板測定結果的影響［J］.臨床檢驗雜志，1997，15（5）：278.