尿亞硝酸鹽檢測與尿細菌培養結果相關性分析

曹志剛，艾艷紅（.湖北省襄陽市中心血站 440；.湖北省襄陽市中醫院 440）

泌尿系統感染為僅次于呼吸道感染的感染性疾病［1］，常見于革蘭陰性桿菌等，目前診斷的金標準仍是細菌培養，但培養周期長，培養陽性率較低，需要專業的人員和設備，不便于簡易、快速的篩查及初步診斷，現代尿常規自動化分析儀常作為尿路感染的過篩試驗，具有簡便、快速的特點。泌尿系統存在的革蘭陰性桿菌將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，測定尿液中是否存在亞硝酸鹽可以快速、間接地知道泌尿系統細菌感染的情況。作者旨在探索尿亞硝酸鹽（NIT）陽性及白細胞酯酶與尿細菌培養陽性的相關性，尿道各致病菌的細菌分布。

1 資料與方法

1.1 病例收集與處理選取2011年5月至2012年4月在本院做細菌尿培養，且同時也做尿液常規分析的患者，干化學儀室內質控在控，質控的標準菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、銅綠假單胞菌ATCC 27853，由衛生部臨床檢驗中心提供。記錄患者姓名，住院號，科室，尿液常規分析亞硝酸鹽、白細胞酯酶與尿液細菌培養結果，若為陽性記錄致病菌種屬；所有藥物監測的患者數據不統計在內，若同一患者重復多次進行尿培養，一個月內不重復記錄該患者的資料，只記錄該月第1次檢測的數據。

1.2 培養及檢測條件標本要求：（1）新鮮清潔中段晨尿；（2）女性患者，留尿前要求清洗外陰；（3）標本3h內送檢；尿培養方法為：定量接種環，挑取一環尿液標本接種于麥康凱及血瓊脂培養基，（35±2）℃、5%CO2培養24h，菌落計數，革蘭陰性菌大于105／mL，革蘭陽性菌104／mL視為陽性，做分純或細菌鑒定及藥敏。尿亞硝酸鹽定性試驗采用Clinit EK 500尿分析儀及其配套用的迪瑞尿10項試紙條和質控品，室內質控在控，按操作規范操作測定。

1.3 數據統計預收集2011年5月醫院每日同時做尿培養與尿液常規分析的患者檢測資料，同時統計每日尿培養陽性的細菌分布。發現一月中做重復檢測的患者占一定比例，查閱文獻，這部分可能對數據的代表性有干擾，同時有藥物監測的患者資料明顯不符，波動較大，預統計為后續統計設定標本篩選要求。

統計2011年5月至2012年4月在醫院同時進行了尿液常規分析與尿液細菌培養兩項檢測的全部數據，以及此期間尿培養陽性結果中的細菌分布；統計尿常規檢測每日亞硝酸鹽陽性率，尿培養的陽性率，尿常規白細胞酯酶。尿培養檢測數據的篩選條件：（1）標本類型明確為尿液，剔除未指明標本類型的標本或標本類型不明的標本；（2）排除藥物監測培養；（3）培養結果陽性；（4）若同一患者重復多次培養，只記錄第一次檢測陽性的數據。尿液常規分析與尿液細菌培養兩者均統計合格資料條件：（1）做細菌中段尿培養，且同時也做尿液常規分析的患者；（2）若同一患者重復多次進行尿培養，一個月內不重復記錄該患者的資料，只記錄該月第一次檢測的數據；（3）非藥物監測的患者數據；（4）維生素C陰性。

1.4 統計學方法 SPSS16.0對所有的實驗數據加以統計分析。尿亞硝酸鹽檢測與對應培養陽性的相關程度，特異度與靈敏度做四格表分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 抽樣NIT 陽性率以7d為單位，統計尿常規3645例，其中尿亞硝酸鹽陽性171例，陽性率4.69%。

2.2 尿培養陽性率統計尿培養數據2334例，培養出細菌計為陽性，陽性數963例，陽性率8月最高43.82%，4月最低25.99%，總陽性率36.98%。

2.3 尿道感染細菌分布對540例尿培養陽性案例分析，檢出細菌分布在25個菌群，以大腸埃希菌為主，占42.6%，腸球菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌次之，分別占18.3%、6.9%、5%，金黃色葡萄球菌、陰溝桿菌、鮑曼桿菌，分別占4.8%、3.3%、3.3%，其余25種占15.7%。

2.3.1 導致尿道感染細菌分布中，革蘭陽性球菌166例，其中腸球菌99例，占59.64%，葡萄球菌、鏈球菌各占28.92%、11.45%；革蘭陰性球菌一例；革蘭陰性桿菌373例，其中大腸埃希菌230例，占61.66%，肺炎克雷伯菌、陰溝桿菌、鮑曼桿菌次之。

2.3.2 按能否還原硝酸鹽分類統計，25個菌群中，（1）不能還原硝酸鹽：全部的革蘭陽性球菌（166例）、革蘭陰性球菌（1例）、極少部分革蘭陰性菌，主要為鮑曼不動桿菌科（19例），共占34.6%；（2）能還原硝酸鹽：絕大部分革蘭陰性桿菌，主要為大腸埃希菌等（316例）、肺炎克雷伯菌（37例）、陰溝桿菌（18例）等，共占58.5%；（3）部分還原硝酸鹽：即這部分細菌有一定比例能還原硝酸鹽，但也有一部分不能還原硝酸鹽，主要為不發酵革蘭陰性菌，如銅綠假單胞菌74%能還原硝酸鹽、熒光假單胞菌（19%）、黃桿菌（比例不詳）等，共占6.9%。

2.3.3 陽性相關性分析

2.3.3.1 統計同時做尿常規檢測與尿液細菌培養的患者743例，亞硝酸鹽與對應尿培養統計結果如表1。在743例資料中，尿亞硝酸鹽與尿培養均陽性109例，占14.7%，兩者均陰性485例，占65.3%；亞硝酸鹽檢測的靈敏度為87.2%，特異度78.5%，總體符合率79.9%，陽性預測值為45.0%，陰性預測值96.8%。尿硝酸鹽陰性而尿培養陽性133例，占17.9%，其中不能還原亞硝酸鹽的革蘭陽性球菌53例，占40%；尿亞硝酸鹽陽性而尿培養陰性16例，占2.1%。統計分析，Kappa＝0.5086，Sk＝0.2919，u＝Kappa／Sk ＝11.1780，u＞u0.01／2，P＜0.01，按照α＝0.05的檢驗水平差異具有統計學意義。

表1 尿亞硝酸鹽診斷評價四格表（n）

2.3.3.2 在尿亞硝酸鹽陽性，同時尿培養陽性者共計109例，分布在17個菌群。能還原亞硝酸鹽的革蘭陰性桿菌占89.9%（98例），其中大腸埃希菌占65例；不能還原硝酸鹽細菌占8.2%（10例），其中腸球菌4例，鮑曼桿菌、金黃色葡萄球菌、α－溶血性鏈球菌分別為3、2、1例；部分還原硝酸鹽占0.9%，嗜麥芽假單胞菌1例。在尿亞硝酸鹽陰性，但尿培養陽性的細菌分布，能還原亞硝酸鹽的革蘭陰性桿菌占55.6%（74例），其中大腸埃希菌占42例；不能還原硝酸鹽的細菌占39.9%（53例），革蘭陽性球菌占51例，鮑曼不動桿菌2例；部分還原硝酸鹽細菌占4.5%（6例），嗜麥芽假單胞菌、熒光假單胞菌、黃桿菌各占3、2、1例。見表2。

表2 NIT 陽性／陰性細菌分布比較［n（%）］

從表2可見在亞硝酸鹽陰性，而尿培養依然陽性的結果中，不能還原硝酸鹽的革蘭陽性球菌和極少部分革蘭陰性桿菌占39.9%，這部分細菌用尿亞硝酸檢測沒用實際應用價值，因為此部分細菌不能分解硝酸鹽，尿亞硝酸鹽檢測對其診斷沒有任何統計學價值，如果去掉資料中的所有不能還原硝酸鹽的細菌，得到一個新的四格表資料，見表3。去除不能還原硝酸鹽的細菌資料后，亞硝酸鹽檢測的靈敏度為86.1%，特異度85.8%，總體符合率88.2%，陽性預測值為55.0%，陰性預測值96.8%。

表3 修改后尿亞硝酸鹽診斷評價四格表（n）

2.4 白細胞酯酶的影響根據以上病例收集方法，共統計了醫院61例尿液常規檢測的白細胞酯酶與亞硝酸鹽進行分析，白細胞酯酶的靈敏度59.15%，只具有一定的提示作用。

3 討論

3.1 亞硝酸鹽與尿培養的陽性率及尿道感染的細菌分布尿液常規檢測亞硝酸鹽整體陽性率4.69%，特異性較強；尿培養陽性率36.98%。尿道感染細菌分布中，分布在26個菌群，其中革蘭陰性桿菌占66.4%，以大腸埃希菌為主，能還原亞硝酸鹽；革蘭陽性球菌（以腸球菌為主）［2］，包括部分革蘭陰性桿菌鮑曼不動桿菌等，不能還原亞硝酸鹽，占34.6%。近年來，尿道感染細菌分布開始向革蘭陽性球菌傾斜，特別是腸球菌在日益成為院內感染的重要致病菌，引起的最常見感染就是尿路感染，該菌對抗生素有較強的抵抗性，腸球菌對內酰胺類和氨基糖苷類均有較強的抗藥性，并且是第一個對萬古霉素抵抗的院內致病菌［3］。

3.2 尿亞硝酸鹽與尿培養陽性的相關性從本次結果分析可見，尿亞硝酸鹽陽性，尿培養陽性率87.2%，陽性結果中94%為硝酸鹽還原能力較強的革蘭陰性桿菌，僅6%為革蘭陽性球菌。因此，在尿道感染中，細菌分布以革蘭陰性桿菌為主占2／3，革蘭陽性球菌占1／3，前者硝酸鹽還原能力強，用亞硝酸鹽作為早期篩查特異性強，對于尿道感染中的革蘭陰性桿菌，臨床診斷價值較高［3－5］。

對于尿NIT 檢測陰性但尿培養卻為陽性，對檢測一致性造成影響。主要原因分析：（1）尿道感染中接近1／3的細菌感染為革蘭陽性球菌，其不具有硝酸鹽還原能力，這部分亞硝酸鹽不具有診斷價值。（2）部分患者體內缺乏硝酸鹽或者在膀胱內停留時間過短，造成部分漏檢。有研究在尿液常規分析前加入一滴無菌1%硝酸鈉溶液，37℃恒溫、4h后，再用試紙條測定亞硝酸鹽是否陽性，特異性、陽性預測值明顯提高［6］。

亞硝酸鹽陽性而尿培養陰性的結果比較少，對于NIT 檢測的靈敏度有一定影響，分析其原因：（1）尿培養陽性率較低，由于受標本采集及檢測技術的限制，有時需要重復檢測才能得到陽性，一次檢驗存在假陰性率；（2）尿培養陽性的標準為革蘭陰性菌大于105／mL，革蘭陽性菌104／mL視為陽性，對于臨床菌落較少的標本視為陰性，尿NIT 較靈敏可為陽性；（3）尿道感染中存在L－型細菌，普通尿培養為陰性，但尿亞硝酸鹽為陽性，存在臨床癥狀。

3.3 743例尿液亞硝酸鹽檢測與尿培養總體符合率79.9%，Kappa＝0.5086，u＝11.1780＞u0.01／2（2.58），P＜0.01，亞硝酸鹽檢測與尿培養具有較好的一致性；尿亞硝酸鹽陽性可以提示診斷尿道細菌感染，主要為革蘭陰性桿菌，指導臨床早期用藥，但陰性不能排除感染的存在［2］。

［1］袁舟亮，胡安群.尿路感染患者四項檢測指標的相關性分析［J］.臨床輸血與檢驗，2011，13（1）：46－48.

［2］馬小兵，顏明根，瞿佩飛，等.尿干化學分析與尿液沉渣檢查對尿路感染診斷價值的比較［J］.臨床泌尿外科雜志，2007，22（10）：760－762.

［3］鄭姬，府偉靈，張曉兵.尿路感染常見病原菌的分布及耐藥性分析［J］.中華醫院感染學雜志，2006，16（11）：1294－1296，1312.

［4］梁偉，胡春偉，牧啟田.尿亞硝酸鹽試驗對泌尿系統感染診斷價值分析［J］.中國衛生檢驗雜志，2008，18（5）：933－934.

［5］謝曼娥.尿亞硝酸鹽定性測定與尿細菌培養的相關性探討［J］.檢驗醫學與臨床，2009，6（11）：871－872.

［6］樊琳，劉慧敏，宮玉娟.試帶法尿亞硝酸鹽定性試驗與尿細菌培養相關性探討［J］.國際檢驗醫學雜志，2011，32（2）：201－202.