維藥阿那其根醇提物及原粉膠囊的急性毒性試驗※

金小越王智穎郭世民

維藥阿那其根醇提物及原粉膠囊的急性毒性試驗※

金小越1王智穎1郭世民2

目的測定阿那其根醇提物及原粉膠囊劑對小鼠的急性毒性，評價其安全性，為臨床安全用藥提供依據。方法采用最大給藥量測定法，將180只小鼠（雌、雄分開）隨機分成三組，每組60只，再按高、中、低三個劑量平行分為兩組，用小鼠灌胃給藥法測定阿那其根醇提物（1g/1ml）、膠囊劑（過200目篩原藥粉）的最大給藥量，連續觀察14d，研究其安全性。結果阿那其根醇提物、膠囊劑的毒性都很低。膠囊劑最大給藥量為48g/kg，相當成人60kg用量的80倍以上；醇提物最大給藥量為96g/kg，相當成人60kg用量的480倍以上。未測得灌胃給藥小鼠半數致死量LD50。結論阿那其根無明顯毒性，臨床常用量安全可行。

阿那其根；急性毒性試驗；最大給藥量

阿那其根為菊科植物羅馬除蟲菊的根。羅馬除蟲菊Anacyclus pyrethrum.DC.多年生草本，高15～45cm，多具長柔毛，根粗壯，圓柱形或長倒圓錐形，支根少。分布于北非或南部歐洲，我國新疆亦有分布。其根含墻草堿（Pellitorine）、除蟲菊酯、菊糖[1]。具有生干生熱，祛寒強筋，開通阻滯，祛風止痛，燥濕化痰，滋補神經等功效；主治濕寒性或黏液質性疾病。阿那其根在臨床應用多年，主要應用于白癜風、腫瘤、膝骨關節炎等疾病的治療。在維醫藥臨床治療中抗炎鎮痛作用明顯[2]。本文對阿那其根醇提物、原粉膠囊進行急性毒性試驗研究，旨在為阿那其根安全性做出評估，為其臨床用藥提供參考，也為開展藥效學等研究提供理論基礎和科學依據。

1 資料與方法

1.1 試驗動物昆明種小鼠，體質量（20±2）g，雌雄各半（購自新疆疾研所動物飼養中心）。小鼠分性別飼養于空調室內，室溫（22±2）℃，濕度（70 ±5）%，小鼠專用料飼喂，自由飲水和攝食，自然光照。試驗前小鼠飼養3d，觀察其健康狀況。選擇健康、營養狀況良好的小鼠進行試驗。

1.2 藥物阿那其根原粉膠囊（自制）：將購置的阿那其根藥材粉碎，并過200目篩，裝入膠囊中（0.27g/粒）。阿那其根的醇提液制備：取阿那其根藥材500g，用4倍量的95%乙醇50℃回流提取1.5h，共2次，提取液過濾濃縮，制成1g：1ml藥液。

1.3 儀器R-200D電子分析天平（德國，Sartorius）、w-201B數顯恒溫水浴鍋（江蘇金壇市醫療儀器廠）、鼠籠（帶飼喂器、飲水器和墊料）、小鼠飼料、酒精棉球、鑷子、剪刀等。

1.4 半數致死劑量（LD50）的測定預試驗：選取昆明種小鼠30只，雌雄各半，適應性喂養3d后，隨機分為三組，即對照組、阿那其根醇提組、原粉膠囊組。禁食不禁水16h后，對照組給予同體積蒸餾水，阿納其根醇提液組、原粉膠囊組分別以最大給藥濃度（0.40g?ml-1），最大給藥體積（0.04ml?g-1）口服一次性給藥。給藥后常規飼養，連續觀察7d，結果表明，小鼠全部存活，未出現任何中毒現象。口服給藥無法測出本品的半數致死劑量（LD50），故測定最大給藥量或最大耐受量[3]。

1.5 最大給藥量試驗選擇健康且體質量符合要求的昆明種小鼠180只，雌雄各半，適應性喂養3d后，隨機分為三組，即對照組、阿那其根醇提組、原粉膠囊組，每組60只小鼠。禁食不禁水12h后，對照組給予同體積蒸餾水，阿納其根醇提液組、原粉膠囊組分別以最大給藥濃度（0.40g?ml-1），最大給藥體積（0.04ml?g-1）灌胃一次性給藥。給藥容量40ml/kg?bw，24h內給藥3次，并將劑量分成高、中、低三個組，每個濃度梯度組平行兩組。間隔期間禁食不禁水。給藥組小鼠灌胃給予 0.4g/ml×3，24h內累計給藥48.00g/kg，連續觀察14d，詳細記錄對照組、醇提取物組、原粉膠囊組動物每天一般狀態及體質量變化、攝食量變化和死亡情況。

1.6 統計學分析采用SPSS 13.0統計軟件進行數據處理，所有數據均用（±s）表示，組間比較采用t檢驗。P＜0.05表示有統計學意義。

2 結果

2.1 劑量設計小鼠臨床等效量（按照成人每日用量1.08g/60kg）×70kg×0.0026/0.02kg=0.1638g/kg；以此臨床等效量作為小鼠的給藥低劑量，并以此劑量的8倍、16倍、32倍常用量分別代表低、中、高三個劑量，依次為1.31、2.62、5.24g/kg。阿那其根原粉膠囊、醇提物的總給藥量分別為 14.00g/kg、48.00g/kg。膠囊劑的平均最大給藥量相當于臨床用藥量的82倍；醇提物平均最大給藥量相當于臨床用藥量的240倍。

2.2 小鼠體質量的變化從表1可以看出，醇提物組小鼠體質量增量、相對增量都略低于對照組，原粉膠囊組小鼠體質量增量、相對增量都略高于對照組。

表1 阿那其根醇提物和膠囊劑對小鼠灌胃最大給藥量試驗結果(±s)

表1 阿那其根醇提物和膠囊劑對小鼠灌胃最大給藥量試驗結果(±s)

醇提物 21.23±1.12 29.71±2.32 33.02±3.13 11.79±2.01 0.56±2.12 ＞0.05相對增量(%) P膠囊劑 20.98±0.93 29.46±3.01 34.18±3.25 13.20±2.32 0.63±2.09 ＞0.05對照組 21.11±1.04 30.06±2.99 33.74±3.64 12.63±2.60 0.60±2.34 ＞0.05

2.3 小鼠臨床表現和剖檢變化大劑量給藥當天，給藥組（阿那其根原粉膠囊、醇提液）兩組小鼠精神狀態良好，皮毛未見明顯異常，進食飲水量無異常，體重正常增長。連續觀察14天，所有小鼠皮毛有光澤，采食、活動均正常，試驗期間無小鼠死亡。試驗結束時，給藥組和對照組小鼠解剖后肉眼觀察皮下、心、肝、脾、肺、腎和胃腸道等器官無明顯眼觀異常。表明阿那其根原粉、醇提物未引起實質性臟器的病理損傷。

3 結論與討論

許多民族藥物毒性較小，尤其是維藥，大部分是藥食同源，常無法測出LD50，多采用最大給藥量或最大耐受劑量測定試驗動物的耐受量。試驗結果表明，阿那其根醇提物及膠囊劑以最大給藥濃度、最大給藥體積每日3次灌胃給藥后，小鼠無死亡及異常情況出現。與Kuttan S等[4]報道的阿那其根醇提物的慢性毒性試驗結果相一致。本次試驗小鼠用量膠囊劑相當于成人60kg用量的82倍，醇提物小鼠用量相當于成人60kg用量的240倍，可提供臨床應用。阿那其根急性毒性試驗還應結合長期毒性試驗及多種檢查結果綜合分析評價其安全性，此方面的研究正在深入進行。

[1] 劉勇民.新疆維吾爾藥志(下冊)[M].烏魯木齊：新疆人民出版社,2009：434-435.

[2] 帕爾哈提爾?賽買提,玉素甫?買提努爾,熱甫開提?賽吾力丁,等.維藥阿那其根散劑外敷治療膝骨關節炎的臨床療效評價研究[J].中國民族醫藥雜志,2012(9)：1-3.

[3] 王東升,李錦宇,羅超應,等.白術提取液急性毒性試驗[J].西北農業學報,2011,20(5)：40-43.

[4] Kuttan S,Ronald D,Venkatesan S. Toxicological evaluation of ethanolic extrac of Anacyclus pyrethrum in albino wistar rats[J]. Asian Pacific Journal of Tropical Disease.Disea,2012,2(6)： 437-441.

R965

A

1673-5846(2013)09-0031-02

1新疆醫科大學第六附屬醫院，新疆烏魯木齊 830002

2云南省中醫中藥研究院，云南昆明 650223

新疆維吾爾自治區自然科學基金項目（2013211A056）

金小越（1961-），女，副教授，研究方向：藥物分析。