正交試驗法優(yōu)選復(fù)方阿莫西林包合物工藝條件

唐聞濤黎文藝謝新英陳明德

（1 廣東省珠海市香洲區(qū)灣仔社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心， 廣東 珠海 519030；2 廣東省珠海市香洲區(qū)人民醫(yī)院，廣東 珠海 519000）

正交試驗法優(yōu)選復(fù)方阿莫西林包合物工藝條件

唐聞濤1黎文藝2謝新英1陳明德1

（1 廣東省珠海市香洲區(qū)灣仔社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心， 廣東 珠海 519030；2 廣東省珠海市香洲區(qū)人民醫(yī)院，廣東 珠海 519000）

目的優(yōu)選復(fù)方阿莫西β-環(huán)糊精包合物的最佳制備工藝。方法以主藥與β-環(huán)糊精的摩爾投料比、包合溫度、攪拌時間為考察因素，包合率為指標(biāo)，采用正交試驗法優(yōu)選復(fù)方阿莫西林包合的最佳工藝。結(jié)果復(fù)方阿莫西林最佳提取工藝的摩爾投料比為1∶1，包合溫度為20°C，攪拌時間為120min，包合次數(shù)為3次。結(jié)論該包合物工藝條件簡便可靠，質(zhì)量可控，對進(jìn)一步工藝開發(fā)有較好的參考價值。

復(fù)方阿莫西林；β-環(huán)糊精；包合物；正交試驗

自從20世紀(jì)90年代世界胃腸病學(xué)會推薦應(yīng)用三聯(lián)14d療法根除幽門螺旋桿菌以來，出現(xiàn)其副作用高達(dá)30%且依以性差的特點[1]。近年來，我中心臨床醫(yī)師使用經(jīng)驗方復(fù)方阿莫西林（處方由阿莫西林、呋喃唑酮、雷尼替丁組成）治療慢性胃潰瘍患者，療效顯著且副作用輕微，臨床用量參照《新編藥物學(xué)》第15版，各組分最佳比例為：阿莫西林：呋喃唑酮：雷尼替丁=5∶1∶1[2,3]，但患者服藥依從性差。為了延長復(fù)方阿莫西林在胃內(nèi)的滯留時間，提高幽門螺旋桿菌的消除率，達(dá)到增強藥效，減少藥物耐藥性，提高患者服藥依從性，筆者采用研磨法優(yōu)將復(fù)方阿莫西林β-環(huán)糊精最佳包合工藝進(jìn)行初步探討。

環(huán)糊精（簡稱CD）系環(huán)糊精聚糖轉(zhuǎn)位酶作用于淀粉后經(jīng)水解環(huán)合而成的產(chǎn)物。為水溶性、非還原性的白色結(jié)晶粉沫，常見的有α、β、γ三種，分別由6、7、8個葡萄糖分子構(gòu)成。見圖1。

圖1 β-環(huán)糊精

β-CD呈筒狀結(jié)構(gòu)，其兩端與外部為親水性，而筒的內(nèi)部為疏水性，借范德華力將一些大小和形狀合適的藥物分子（如鹵素、揮發(fā)油等）包含于環(huán)狀結(jié)構(gòu)中，形成超微囊狀包合物外層的大分子（如β-CD、膽酸、淀粉、纖維素等）稱為“主分子”，被包合于主分子之內(nèi)的小分子物質(zhì)稱為“客分子”。其中以β-CD在水中溶解度最小，最易從水中析出結(jié)晶，故最為常用。β-環(huán)糊精包合的作用：①可增加藥物的溶解度，如薄荷油、桉葉油的β-CD包合物，其溶解度可增加30倍；②增加藥物的穩(wěn)定性，特別是一些易氧化、水解、揮發(fā)的藥物形成包合物后，藥物分子得到保護(hù)；③液體藥物粉末化，便于加工成其他劑型，如紅花油、牡荊油β-CD包合物均呈粉末狀；④減少刺激性，降低毒副作用，如5-氟尿嘧啶與β-CD包合后可基本惡心、嘔吐狀等反應(yīng)；⑤掩蓋不良?xì)馕叮绱笏庥桶衔锟裳谏w大蒜的嗅味；⑥可調(diào)節(jié)釋藥速度，提高生物利用度[4]。

1 儀器與試劑

800B臺式離心機(jī)（上海安亭儀器廠）；JB-2型恒溫磁力攪拌器（上海新涇儀器有限公司）；UV-2401型紫外分光光度計（日本島津）；XW-80型旋渦混合器（上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠）；1100型高效液相色譜儀（美國HP公司）；CKS倒置顯微鏡（日本OLXMPUS公司）；Rs-232型精密電子天平（上海恒平科學(xué)儀器公司）；阿莫西林、呋喃唑酮、雷尼替丁均為分析純β-環(huán)糊精（味精總廠產(chǎn)品）。

2 方法與結(jié)果

2.1 考察指標(biāo)

復(fù)方阿莫西林包合率%=包合物中阿莫西林/投藥量×100%。

2.2 線性關(guān)系考察

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相：磷酸鹽緩沖液（pH=5.0）-乙晴（97.5∶2.5）；檢測波長：254nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20μL；流速：1mL/min，精密稱取復(fù)方阿莫西林50.26mg，置于50mL容量瓶中，用流動相制成每1mL含0.1mg的溶液，搖勻；精密吸取上述對照品溶液1、2、3、4、5 mL，分別置于10mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻；分別進(jìn)樣20μL，以峰面積（Y）對濃度（C）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=5.582C+5.278 （r=0.9998），可見，復(fù)方阿莫西林在0.2001～0.5026mg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。

2.3 技術(shù)路線

取β-環(huán)糊精加適量蒸溜水，在磁力攪拌器上加熱至80°С，溶解后攪拌到室溫，分別加入阿莫西林、呋喃唑酮、雷尼替丁（比例為5∶1∶1），攪拌2h，制得的包合物溶液置冰箱中冷藏12h，再抽濾并洗滌，所得沉淀物于60°С干燥，即得復(fù)方阿莫西林β-環(huán)糊精包合物。

2.4 包合物工藝條件篩選

2.4.1 因素水平選擇

根據(jù)“2.1”項下試驗結(jié)果，選擇主藥與β-環(huán)糊精的投料比、包合溫度、攪拌時間為考察因素，選用L9（34）進(jìn)行正交試驗[5,6.7]，因素水平見表1。

表1 因素水平表

2.4.2 評價指標(biāo)

以復(fù)方阿莫西林包合率為指標(biāo)、按照“2.1”技術(shù)路線操作，求出包合物的百分率，百分率越大，包合就越好。

2.4.3 正交試驗結(jié)果見表2，方差結(jié)果見表3。

表2 正交實驗表及實驗結(jié)果

由表2、表3可知，各因素水平對實驗結(jié)果都有一定的影響，水平優(yōu)劣依次為A3＞A2＞A1，B3＞B2＞B1，C2＞C1＞C3。因素主次為A＞B＞C，包合物的最佳工藝條件下為A3B3C2。

2.4.4 加樣回收率測定

精密稱取復(fù)方阿莫西林供試品6份，分別加入精密稱取的對照品阿莫西林，再按“2.2”項下方法制備樣品液，分別精密量取20μL注入色譜儀，計算阿莫西林的回收率，結(jié)果見表4。

表3 方差分析

表4 阿莫西林回收率試驗結(jié)果（n=6）

2.5 包合物的驗證試驗

選用顯微鏡法。觀察到含藥的包合物和β-環(huán)糊精形狀不同，主要是。晶格排列發(fā)生變化所致。

4 討 論

由于阿莫西林水解率隨溫度升高而加速，因此，在包合過程中，我們采用的包合溫度較低、攪拌時間也較短，以防止阿莫西林水解[4]。

β-環(huán)糊精口服無毒，且可作為碳水化合物易被人體吸收。還特有無頂園錐體狀空腔結(jié)構(gòu)，易與藥物分子形成復(fù)合物，在醫(yī)藥上的應(yīng)用就充分體現(xiàn)出其出色的“包埋”作用，防止藥物揮發(fā)、水解，增加溶解度，提高生物利用度，提高藥效，降低藥物刺激性、毒性，掩蓋無良?xì)馕叮瞥深w粒劑、片劑、膠囊劑等[5-6]。

實驗中，包合物溶液置冰箱中冷藏12h，原因是β-環(huán)糊精在包合過程中沒有完全被利用，而β-環(huán)糊精的飽和水溶液在溫度降低時，β-環(huán)糊精會慢慢析出晶體，抽濾并洗滌目的是使未包合的β-環(huán)糊精部分溶解，從而提高包合物的純度。

從試驗得出，復(fù)方阿莫西林β-環(huán)糊精包合物的最佳包合條件為：復(fù)方阿莫西林與β-環(huán)糊精的摩爾比例為1∶1，包合溫度為25°С，攪拌時間為2h，本實驗采用研磨法制備復(fù)方阿莫西林β-環(huán)糊精包合物，普遍、通用，工藝簡單，重現(xiàn)性好，具有推廣應(yīng)用。

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R978.1

B

1671-8194（2013）16-0112-02

珠海市醫(yī)學(xué)科研基金立項課題（編號：2006009）