奧扎格雷注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的研究

伊 麗

（廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院，福建 廈門361003）

奧扎格雷注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的研究

伊 麗

（廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院，福建 廈門361003）

目的用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法檢測(cè)奧扎格雷注射液中的熱原，減少臨床熱原反應(yīng)的發(fā)生。方法按照《中國(guó)藥典》2010版（二部）附錄細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查指導(dǎo)原則，進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)，測(cè)定注奧扎格雷注射液細(xì)菌內(nèi)毒素限定值。結(jié)果本品稀釋16倍時(shí)對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，限值為2.5 EU/mL。結(jié)論細(xì)菌內(nèi)毒素法簡(jiǎn)便、快速、靈敏，能有效檢測(cè)奧扎格雷注射液中熱原。

奧扎格雷注射液；細(xì)菌內(nèi)毒素；熱原；檢測(cè)方法

發(fā)熱是臨床常見(jiàn)的輸液反應(yīng)，主要表現(xiàn)是患者發(fā)熱、寒戰(zhàn)伴有惡心、嘔吐、頭痛周身不適等癥狀，其原因多為輸入熱源物質(zhì)。注射用奧扎格雷溶液是臨床常用的抗血小板凝聚藥物，臨床用藥頻率較高，也是近期發(fā)生輸液反應(yīng)相對(duì)較多的品種。為了充分發(fā)揮靜脈配置中心集中配置的優(yōu)勢(shì)，最大限度地避免熱原反應(yīng)的發(fā)生，本文建立了奧扎格雷注射液細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)方法，測(cè)定藥品中的熱源，為臨床用藥安全提供保障。

1 試驗(yàn)材料

注射用奧扎格雷（規(guī)格：每瓶40 mg，批號(hào)：20111107，丹東醫(yī)創(chuàng)藥業(yè)有限公司）；0.9%氯化鈉注射液（規(guī)格：每袋100 mL，批號(hào)：1206180501，辰欣藥業(yè)有限公司）；WZR-D951A藥用振蕩器（蘇州東吳醫(yī)藥電子儀器廠）；DK-600型電熱恒溫水槽（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。

細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（規(guī)格：每支12 EU/mL，批號(hào)：110701）；細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（規(guī)格：每支10 mL，批號(hào)：110802）；鱟試劑（規(guī)格：每支0.1 mL，批號(hào)：120203，靈敏度：0.25EU/mL，）。以上試劑均購(gòu)自廈門鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠有限公司。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

取注射用奧扎格雷160mg溶于0.9%氯化鈉注射液100mL中，備用。

2.2 供試品理論限值（L）的確定

根據(jù)L=K/M，其中K=5 EU/（kg·h）（根據(jù)藥典規(guī)定注射劑得出）；M為2 mL/（kg·h）（根據(jù)臨床實(shí)際情況得出）。計(jì)算出 L=2.5 EU/mL。

2.3 稀釋倍數(shù)（MVD）的確定

根據(jù)MVD=cL/λ，得出稀釋倍數(shù)為16倍。

2.4 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)[1]

根據(jù)2010版《中國(guó)藥典》（二部）附錄細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法規(guī)定，進(jìn)行鱟試劑標(biāo)示靈敏度（λ）的復(fù)核，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 鱟試劑靈敏度復(fù)核結(jié)果

由表1可見(jiàn)，本批鱟試劑經(jīng)用細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品檢查，λc為0.30，在0.5λ～2λ之間，結(jié)果符合規(guī)定。

2.5 干擾試驗(yàn)[2]

取供試品溶液原液，稀釋16倍作為下表中供試品溶液，備用。溶液A、B、C、D制備方法見(jiàn)表2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 干擾試驗(yàn)溶液的制備

表3 干擾試驗(yàn)結(jié)果

由表2可見(jiàn)，Es、Et 均為0.25 EU/mL，均在0.5λ～2λ之內(nèi)，認(rèn)為供試品在該稀釋濃度下無(wú)干擾作用。

2.6 樣品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法

溶液A、B、C、D制備方法及結(jié)果見(jiàn)表4，結(jié)果表明所測(cè)樣品符合規(guī)定。

表4 樣品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查結(jié)果

3 討 論

引起熱原反應(yīng)的原因不僅與工作環(huán)境有關(guān)，還與注射器、輸液器及加藥過(guò)程的污染等有關(guān)，本文所使用的供試品溶液為經(jīng)過(guò)輸液終端最終過(guò)濾的，檢查其熱原反應(yīng)能在一定程度上代表臨床所出現(xiàn)輸液反應(yīng)情況。

研究結(jié)果表明，奧扎格雷注射液稀釋倍數(shù)為16倍時(shí)，濃度對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)沒(méi)有干擾，此時(shí)細(xì)菌內(nèi)毒素的限定值為0.25 EU/mL，該法簡(jiǎn)單快速、靈敏可靠。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[S].2010年版.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:690.

[2] 中國(guó)藥品生物制品檢定所.中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2005:287.

Study on Determination of Bacterial Endotoxin of Ozagrel Injection

YI Li

(First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361003, China)

ObjectiveTo detect the limulus in ozagrel injection with a bacterial endotoxin test.MethodThe interference test was performed according to the bacterial endotoxin method and its guiding principle assigned in "Chinese Pharmacopoeia 2010 version".ResultsThe ozagrel injection showed no interference after diluted 16 times with a limit of 2.5 EU/mL.ConclusionBacterinal Endotoxin method is simple, rapid, sensitive, and can effectively detect the pyrogen of ozagrel injection .

Ozagrel injection; Bacterial endotoxin; Pyrogen; Detection method

R927

B

1671-8194（2013）16-0042-02