免疫性血小板減少性紫癜合并幽門螺旋桿菌感染患兒免疫功能及研究

向金峰

（河南省南陽市中心醫(yī)院小兒血液科，河南 南陽473000）

免疫性血小板減少性紫癜合并幽門螺旋桿菌感染患兒免疫功能及研究

向金峰

（河南省南陽市中心醫(yī)院小兒血液科，河南 南陽473000）

目的分析免疫性血小板減少性紫癜合并幽門螺旋桿菌感染的患兒淋巴細胞免疫功能的變化。方法健康體檢組為對照組。免疫性血小板減少性紫癜組為觀察組及合并HP感染的ITP組為治療組。在常規(guī)激素治療基礎(chǔ)上給予三聯(lián)抗HP治療。流式細胞儀檢測患兒合并HP感染的CD4+，CD19+等抗體表達。結(jié)果ITP組及合并HP感染的ITP組CD4+下降，CD4+/CD8+下降，CD19+升高與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義，觀察組與治療組比較，HP感染的ITP組在CD4+/CD8+比值下降及CD19+增高較之ITP組更為明顯，兩組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論ITP患兒合并HP感染大多存在細胞及體液免疫功能異常。

免疫性血小板減少性紫癜；幽門螺旋桿菌；免疫功能

免疫性血小板減少性紫癜（ITP）是一種自身免疫性疾病，其發(fā)病機制尚不十分明了。已有研究證明，ITP與細胞免疫及體液免疫相關(guān)。截止目前，已有很多文章對合并HP感染的ITP的療效做了研究，但對于合并HP感染的ITP患兒的細胞免疫分析文章不多，本研究目的分析這類患兒的細胞免疫功能，為臨床ITP的發(fā)病機制和臨床治療提供可靠理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2010年12月至2011年12月我醫(yī)院兒科血液科病房確診為急性ITP的患者90例為病例組，男性51例，女性39例，年齡2歲～14歲，平均（4.0±0.5）歲。對照組90名，為健康體檢患兒，兩組相比年齡、性別無統(tǒng)計學(xué)差異。診斷標準參照張之南的《血液病診斷及療效標準》，除外其他血小板減少性疾病及自身免疫性疾病，未應(yīng)用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑。

1.2 方法

所有病例入院進行13C呼氣幽門螺旋桿菌，陽性者35例，HP陽性者合并ITP陽性者為治療組，健康體檢組為對照組。流式細胞儀檢測三組T淋巴細胞亞群及免疫熒光雙標記單克隆抗體檢測血小板抗體。對合并HP感染組給予在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予三聯(lián)抗HP治療，克拉霉素15～20mg/（kg·d），一日2次；阿莫西林40～50mg/（kg·d），一日2次；奧美拉唑0.6～0.8mg/（kg·d），一日1次，餐后。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計軟件SPSS16.0進行分析。兩組間采用配對t檢驗，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

ITP組與對照組幽門螺桿菌感染率比較：90例ITP組中35例并發(fā)HP感染，占38%；90例對照組中8例并發(fā)HP感染，占0.8%，兩組差異有顯著性，（P＜0.05）。

淋巴細胞檢測結(jié)果，HP合并ITP組CD19+增高，CD4+及CD4+/CD8+降低，與對照組相比，有統(tǒng)計學(xué)意義；CD8+與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義，HP合并ITP組與ITP組相比，CD19+增高及CD4+/CD8+降低，統(tǒng)計學(xué)有意義。血小板抗體檢測：治療組PltIgG、IgA陽性率92%，PltIgM陽性率67%，均高于對照組兩組差異有顯著性，（P＜0.05）。見表1。

表1 淋巴細胞亞群的測定結(jié)果(χ—±s，%)

2周后顯效及有效組觀察，CD19+有所下降，CD4+及CD4+/CD8+有所增高，但仍低于對照組，但無統(tǒng)計學(xué)意義。根治后患兒1年后隨訪發(fā)現(xiàn)，患兒合并HP組有5例復(fù)發(fā)，對照組無1例復(fù)發(fā)，ITP 復(fù)發(fā)率高于對照組。

3 討 論

原發(fā)性血小板減少性紫癜是由于血小板破壞過多伴有巨核細胞成熟障礙而引起的獲得性出血性疾病，病因迄今尚不明確。能夠?qū)е翴TP的病因有病毒、細菌感染以及減毒活病毒注射等。近年來有人提出HP感染可能與ITP發(fā)病有關(guān)，此后在多個臨床觀察中得到證實。

既往學(xué)者對ITP患者的細胞免疫進行了研究，結(jié)果雖不甚一致，但都認為淋巴細胞亞群及其功能的改變可能是ITP免疫發(fā)病機制的關(guān)鍵。但HP感染ITP患兒后患兒機體細胞免疫及與血小板抗體的關(guān)系臨床研究的不多。

本研究應(yīng)用免疫熒光雙標記單克隆抗體及流式細胞術(shù)對合并HP感染的ITP患者淋巴細胞亞群進行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)B淋巴細胞（CD19+）的百分率與對照組比較明顯增高，CD4+及CD4+/CD8+下降，差異均有顯著意義，與文獻報道一致[1]。說明了體液免疫參與了ITP的發(fā)生過程與鮑靜等[2］的報告研究一致。與ITP組相比，CD4+/CD8+低于ITP組，CD19+高于ITP組，二者比較均有統(tǒng)計學(xué)意義，說明合并HP感染的患兒比單純ITP患兒體液免疫及細胞免疫功能更加紊亂。

本研究ITP患者HP感染率僅為38%，低于張瑞等[3]的68.8%及Jarque等[4]的71%報道，考慮可能由于采用13C呼氣幽門螺旋桿菌，部分患兒吹氣欠佳導(dǎo)致假陰性的可能存在。

推測HP感染引起ITP發(fā)病的可能機制有以下情況：①HP的某些菌體成分與血小板抗原成分交叉，模擬導(dǎo)致機體產(chǎn)生抗血小板抗體；②HP菌株產(chǎn)生的細胞空泡毒素和細胞毒素相關(guān)基因介導(dǎo)的免疫反應(yīng)激活了免疫系統(tǒng)，從而破壞機體的免疫自穩(wěn)狀態(tài)。HP感染誘導(dǎo)血小板細胞某些表面抗原改變被機體免疫系統(tǒng)所識別，產(chǎn)生抗血小板抗體。③由于HP表面的Lewis抗原介導(dǎo)了HP與血小板的黏附，針對Lewis抗原產(chǎn)生的抗體與其結(jié)合后，激活補體系統(tǒng)而導(dǎo)致血小板的破壞增多。④Asahi等[5]研究發(fā)現(xiàn)，HP通過上調(diào)單核巨噬細胞表面活化型FcγR、下調(diào)抑制型FcγR，在HP致ITP中起著重要作用。HP最終通過上述機制，Th1/Th2比例失調(diào)，導(dǎo)致B細胞激活，產(chǎn)生大量抗體（包括抗血小板抗體），引起血小板生存時間縮短，同時抑制骨髓巨核細胞，使其成熟障礙，血小板減少。

治療后CD4+升高，CD19+下降提示治療后，免疫功能逐步恢復(fù)，Th1/Th2比例逐步趨于平衡。這與臨床疾病恢復(fù)相一致。

綜上所述，細胞免疫及體液免疫調(diào)節(jié)機制的紊亂在感染HP的ITP發(fā)病機制中起了非常重要的作用。盡快調(diào)整患兒機體免疫功能，為合并HP感染ITP患兒早日痊愈提供了較好的臨床思路。

[1] Yoshimura C,Nomura S,Nagahama M,et al Plasma-soluble Fas (APO-1,CD95) and soluble Fas ligand in immune thrombocytopenic purpura[J].Eur J Haematol,2000,64(4):219-224.

[2] 鮑靜,夏瑞祥,曾慶曙,等.外周血淋巴細胞亞群變化在特發(fā)性血小板減少性紫癜中的意義[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2007,42(2):211-214.

[3] 張瑞,徐靜,王椅,等.48例特發(fā)性血小板減少性紫癜患者胃幽門螺桿菌感染的檢測報告[J]中國醫(yī)師雜志,2003,5(7):957-958.

[4] Jarque I,Andreu R,Llopis I,et al.Absence of platelet response after eradication of helicobacter pylori infection in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura[J].Br J Haematol,2 001,115(4):1002-1003.

[5] Asahi A,Nishmioto T,Okazaki Y,et al.Helicobacterpylori eradication shiftsmonocyte Fcγreceptor balance toward inhibitory FcγRIIB in immune thrombocytopenic purpura patients[J].Clin Invest, 2008,118(8):2939-2949.

Immunal Function Change of Children with Idiopathic Thrombocytopenic Purpura of Helicobacter Pylori.

XIANG Jin-Feng

(Department of Pediatric Blood, Nanyang Central Hospital, Nanyang 473000, China)

ObjectiveTo examine immune function of lymphocyte sub-type cells of children with acute ITP of Helicobacter pylori(HP) infection.Methodscontrol group is health examination children.ITP group and ITP with HP fectionn are observe group. On hormone therapy treatment, resisting HP treatment was given to ITP with HP. To examine antibodys such as CD4, CD19to group ITP with HP, adopting double cloning antibody immunofluorescence and with stream cell machine.ResultsIn both groups of ITP and ITP with HP,there were a significant decrease in CD4+, CD4

+/CD8

+and a significant increase in CD19

+,with P＜0.01; the change of CD4+/CD8

+and CD19

+of ITP with HP were significantly more than those of ITP, with P＜0.01.ConclusionsITP with Hp infection has significantly disfunction on cellular immune function and humoral immune function.

ITP; Helicobacter pylori; Immune function

R554+.6

B

1671-8194（2013）15-0063-02