兩種常規人工顛倒混勻全血質控品方法探討

李 瓊 周 洪 肖時超

（重慶市渝北區人民醫院檢驗科，重慶 401120）

兩種常規人工顛倒混勻全血質控品方法探討

李 瓊 周 洪 肖時超

（重慶市渝北區人民醫院檢驗科，重慶 401120）

目的 探討兩種常規人工顛倒混勻全血質控品方法的優異。方法 用兩種常規顛倒混勻法對兩個批號（一個正常值質控品與一個異常值質控品）于2～8℃保存的抗凝全血質控品在三臺全血細胞分析器上每天測一次，連續測定30d，如某1d，某一臺有異常值（即±3S或±3S以外的值）經處理后重測，計算兩種常規顛倒混勻法批間變異系數（CV%，n=30）。結果 改良顛倒混勻法CV%值小于普通顛倒混勻法CV%值，其中血小板的變化較明顯，白細胞次之。結論 改良顛倒混勻法測質控品優于普通顛倒混勻法，此改良法值得臨床上推廣使用。

全血質控品；顛倒混勻

血常規分析是臨床三大常規項目（血常規、尿常規和大便常規）分析之一，它對發現許多全身性疾病的早期跡象，診斷是否貧血及貧血種類，是否有血液系統疾病，反應骨髓的造血功能及療效觀察等有重要意義。因此找一種操作簡便、經濟、保質保量的方法進行血液分析質控很重要。

全血質控品影響因素多，實驗室的環境，儀器的性能，質控品本身的質量，質控品開瓶后存放的時間，不同的混勻方法，同一方法不同的操作人等都是影響因素。

該文全血質控品測定前是常規顛倒混勻法，一種混勻方法（這里命名為普通顛倒混勻法）是從2～8℃冰箱中取出含質控品的試管隨意放置15～30min至室溫，帶蓋顛倒混勻至底部、管壁無沉淀物和氣泡附著，然后旋出蓋帽測定質控品。測完后蓋上蓋帽直立放在2-8℃冰箱中。另一種混勻方法（這里命名為改良混勻法），首次測質控品，從冰箱中取出一支含質控品的試管置室溫（15～30℃）直立放置15～30min復溫至室溫，將含質控品的試管置于兩掌心來回搓動8～10次，旋出蓋帽，與空氣交流2min，然后用一次性干凈塑料薄膜封閉試管口，顛倒混勻5～8次，至無沉淀物與氣泡附著在試管底、試管壁，然后測定質控品，測完后蓋好蓋帽直立放在2～8℃冰箱中，整個過程要求含質控品的試管直立放置。再次測同一支試管質控品，冰箱中取出質控品室溫（15～30℃）直立放置15～30min復溫至室溫，然后用一次性干凈塑料薄膜封閉管口，顛倒混勻5～8次，至無沉淀物附著在管底、管壁，然后測定質控品，測完后直立放在2～8℃冰箱中，以此類推，新開質控品同首次操作，再次測同一支質控品同再次。兩種方法測定結果報告如下。

表1 031302U質控品的兩種混勻方法的變異系數及差值

表2 031302Y的兩種混勻方法的變異系數及差值

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

Sysmex K4500血球儀，Medonic-sp血球儀，Sysmex xt-2000i血球儀。兩個批號的邁克質控品，批號：031302U（正常值）、031302Y（異常值）。

1.2 兩種混勻方法下主要參數測定

紅細胞（RBC）（×1012/L），白細胞（WBC）（×109/L），血小板（PLT）（×109/L），血紅蛋白（HGB）（g/L）。

1.3 方法

用兩種常規顛倒混勻法對兩個批號于2～8℃保存的抗凝全血質控品分別在三臺血球分析儀上每天測一次，連續測定30d，剔除異常值（即±3S或±3S以外的值）求得2種常規顛倒混勻法批間變異系數（CV%，n=30）。

2 結 果

2.1 在測定過程中有異常值（即±3S或±3S以外的值），說明某臺儀器或試劑有問題（Medonic-sp出現一次，經檢查，溶血劑質量問題，從新換一桶同一批號的溶血劑，再測質控品），舍去異常值，經過處理后再做質控品，測得值在±3S內方用。

2.2 連續測定30d，剔除異常值（即±3S或±3S以外的值）求得兩種常規顛倒混勻法批間變異系數（CV%，n=30）及差值（d=普通方法CV%值-改良方法CV%）。見表1、表2。

3 討 論

全血分析是臨床三大常規項目（血常規、尿常規和大便常規）分析之一，對多種疾病的診斷和療效觀察均有很大的價值，如紅細胞與血紅白升高可診斷脫水性血液濃縮、繼發性紅細胞生成素增多性疾病（嚴重心、肺疾病、異常血紅蛋白病、某些腫瘤或腎臟疾病等）、原發性骨髓增生疾病等，降低可診斷造血物質缺乏性貧血、骨髓造血功能障礙性貧血、感染及炎癥性貧血等；白細胞升高與降低可診斷反應性炎癥、異常增生性白血病的輔助診斷等；血小板升高與降低可診斷炎癥性升高、血小板增多癥、血小板減少癥。因此每天做好質控，保證環境穩定、儀器良好運行、試劑質量好，使檢測結果準確性、重復性好，滿足臨床需要，不給醫師診斷帶來麻煩。因此找一種經濟、簡便保質保量的方法很重要。

常規顛倒混勻法具有操作簡便、不需特殊檢驗設備、操作時間短、混勻充分，由于是人工顛倒混勻，不同的操作人員用力程度和方式都有很大的差別，操作的手法不穩定等，導致結果重復性較差，這是方法學本身的缺陷，但為了克服方法的缺陷，對此法操作進行了改良，表1、表2兩個批號結果顯示了改良顛倒混勻法批間差異均比普通顛倒混勻法小，血小板的變化比較明顯，白細胞次之。三臺儀器中Medonic-sp 和Sysmex K 4500變化比較明顯， Sysmex xt-2000i x次之。但兩種常規顛倒混勻法變異都小于衛生部規定[1]（CLIA’88規定：RBC6%、WBC15%、PLT25%、HB7%）的總變異。

普通顛倒混勻法變異大，其原因是，普通顛倒混勻法是帶試管蓋顛倒混勻，血液殘留物附著在試管蓋內壁與試管口上，形成凝塊，當再次用同一支質控品做質控測定時，凝塊就混在血液中，影響最后計數結果。另一個原因是：Medonic-sp和Sysmex K4500這兩臺三分群全血細胞分析儀檢測原理是電阻抗法，利用血細胞通過微孔時瞬間的電阻變化產生脈沖電流而計數，不同類型但體積相同的細胞產生的脈沖幅度相同，而分析儀計數時只識別顆粒產生脈沖幅度大小和相同幅度脈沖多少，而不能識別顆粒的性質。故僅靠體積不能完全區分。當其體積超過該儀器設定的閾值，就會造成誤判。這就影響了白細胞、紅細胞、血紅蛋白、尤其是血小板的計數。而Sysmexxt-2000i這臺五分類血球分析儀檢測原理是鞘流電阻法、半導體激光器的流式細胞技術和核酸染色技術聯合檢測法，彌補了電阻抗法原理這一缺陷。鞘流電阻法，血液標本被前鞘液包繞，通過小孔時阻止異常脈沖產生，提供波形良好的細胞信號，而三分類中電阻抗法，只管脈沖大小與多少。半導體激光器的流式細胞技術，前向散射光反應細胞體積的大小，側向熒光反應RNA/DNA含量，側向散射光反應細胞內部結構，從而使細胞計數的準確性與重復性提高，核酸染色技術，不僅得到白細胞五分類結果，而且根據核酸的含量得到未成熟細胞的定量參數（IG#、IG%）及細胞異常報警信息，使結果更可靠，復檢率更低。

改良顛倒混勻法變異小，原因是，改良法是去試管蓋，用一次性干凈薄膜封閉試管口顛倒混勻，測定后直立放在冰箱中，因此沒有血液殘留物附在試管蓋內壁與試管口上。避免了血凝塊對質控物測定的影響，此改良法值得臨床上推廣使用。

[1] 中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006.

R446.1

B

1671-8194（2013）31-0174-02