液基細胞學結合HPV檢測在宮頸癌篩查中的應用價值

張 穎 鄧建平 徐 夢

（湖北黃石市愛康醫院檢驗科，湖北 黃石 435000）

液基細胞學結合HPV檢測在宮頸癌篩查中的應用價值

張 穎 鄧建平 徐 夢

（湖北黃石市愛康醫院檢驗科，湖北 黃石 435000）

目的 評價液基細胞學（TCT）結合人乳頭狀瘤病毒 (HPV)檢測對官頸癌篩查的作用。方法 應用液基細胞學、HPV 檢測篩查方法與宮頸活檢對照，比較 2 種方法對宮頸鱗狀上皮內高度病變 (HSIL，CIN Ⅱ -Ⅲ )和鱗狀細胞癌 (SCC)篩查的準確性。結果 宮頸液基細胞學篩查宮頸病變的靈敏度為 86.3%，特異度為 93.6%。高危型 HPV-DNA 檢測宮頸病變的敏感性為 91.5%，特異性為 87.8%，宮頸液基細胞學與高危型 HPV-DNA 檢測共同使用的敏感性為 99.1%，特異性為 85.6%。結論 液基細胞學結合 HPV 檢測對宮頸癌的篩查敏感性高，可作為一種先進的宮頸癌篩查方法。

液基細胞學；HPV 檢測；宮頸癌；應用價值

子宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤?，F已公認，宮頸癌的發生和發展與高危型人乳頭瘤狀病毒（HR-HPV）感染密切相關。宮頸癌前病變的篩查是降低宮頸癌發病率的關鍵。將宮頸液基細胞學檢查（TCT）和人乳頭狀瘤病毒（HPV）檢測聯合起來應用于宮頸癌及癌前病變的篩查，并對在人群中檢出病變的婦女進行治療，為最有效的預防宮頸癌的工具之一。我院采用以上兩項檢查進行宮頸癌篩查，以了解TCT結合高危型HPV-DNA 檢測在宮頸病變篩查中的作用，并評估篩查效果。

1 材料與方法

1.1 標本來源

選擇2010年9月至2012年8月在我院門診行健康體檢自愿接受早期子宮頸病變篩查婦女2724例，均無子宮頸錐切和子宮切除史，年齡21～62歲，平均38.69歲，有兩年以上性生活史，從未進行TCT、HPV檢測及陰道鏡等檢查者。

1.2 研究方法

1.2.1 液基細胞薄層涂片

將細胞采集器（宮頸刷）插入子宮頸管內圍繞子宮頸順時針方向旋轉5周，然后將采集器直接放入盛ThinPrep細胞保存液小瓶中，保存液中的標本經ThinPrep2000系統程序化處理，制成直徑為2cm的薄層細胞涂片，95%酒精固定，巴氏染色。然后經TBS分級系統進行細胞學診斷分級：正常范圍（WNL），意義不明的不典型鱗狀細胞（ASCUS），鱗狀上皮內低度病變（LSII），鱗狀上皮內高度病變（HSIL）和鱗狀細胞癌（SCC）。TCT陽性是指ASCUS及以上病變。

1.2.2 高危型人乳頭狀瘤病毒(HR-HPV)檢測

使用專用HPV取樣器，插入受檢者子宮頸外口，順時針或逆時針轉動5圈，慢慢取出取樣器，放入專用HPV保存液小瓶中，采用第2代雜交捕獲試驗檢測8種高危型HPV檢測（HPV16、18、31、33、45、52、56、58）。高危型HPV-DNA檢測以高危型病毒量RLU/CO＞1.0為陽性。

1.2.3 陰道鏡下宮頸組織活檢

全部病例行陰道鏡檢查。于鏡下先觀察上皮及血管，然后涂3%醋酸3min后觀察上皮血管，在陰道鏡圖像異常區及碘試驗陰性區多點取活檢，如為正常轉化區，則在轉化區3、6、9、12點取活檢。宮頸活檢病理診斷≥CINⅠ為陽性。

其中TBS系統LSIL相當組織學中的CINⅠ；HSIL相當于CINⅡ、CINⅢ；SCC相當于宮頸癌。

1.3 統計學處理

SPSSl2.0統計軟件進行統計處理。采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。以組織病理學檢查結果為確診標準，計算并比較液基薄層細胞學檢查、高危型HPV-DNA檢測篩查及液基薄層細胞學結合高危型HPV-DNA篩查宮頸病變的靈敏度、特異度。靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）×100%。

2 結 果

2.1 陰道鏡下宮頸組織病理學檢查結果

2724例中陽性211例，其中CINⅠ147例，CINⅡ41例，CINⅢ18例，宮頸浸潤癌5例。

2.2 宮頸液基細胞學檢查結果及其與組織病理學檢查結果對照

2724例中發現異常涂片者343例，占12.6%，其中意義不明的不典型鱗狀細胞（ASCUS）165例（6.1%），低度鱗狀上皮內病變（LSIL）128例（4.7%），高度鱗狀上皮內病變（HSIL）45例（1.7%），鱗狀細胞癌（SCC）5例（0.2%）。與組織病理學檢查結果對照，見表1。

表1 液基細胞學檢查與組織病理學檢查結果

2.3 高危型HPV-DNA檢測結果及其與組織病理學檢查結果對照

2724例中高危型HPV感染陽性者349例，感染率為18.3%，經宮頸活檢病理診斷確診為宮頸病變的患者高危型HPV-DNA陽性率分別為CINⅠ113/147（76.9%），CINⅡ、CINⅢ 52/59（88.1%），5例鱗狀細胞癌高危型HPV-DNA均為陽性5/5（100%），隨著宮頸病變級別升高，高危型HPV感染率增加（P＜0.05）。與組織病理學檢查結果對照，見表2。

表2 高危型HPV檢測與組織病理學檢查結果

2.4 液基細胞學結合高危型HPV-DNA檢測結果及其與組織病理學檢查結果對照

2724例中液基細胞學或高危型HPV-DNA檢測陽性571例（21.0%），液基細胞學和高危型HPV-DNA檢測陰性2153例（79.0%）。與組織病理學檢查結果對照，見表3。

表3 液基細胞學結合高危型HPV篩查與組織病理學檢查結果

2.5 不同方法篩查宮頸病變的靈敏度、特異度

見表4。

表4 不同方法篩查宮頸病變的靈敏度和特異度指標比較(%)

3 討 論

目前臨床上常用的宮頸細胞學檢查方法主要有以下幾種:巴氏涂片法（即宮頸刮片）、液基薄層細胞學檢查法、人乳頭瘤病毒檢測、陰道鏡檢查法等。常規巴氏涂片假陰性率較高，或涂片質量差，或過多黏液、血液或炎性細胞，以及上皮細胞過度重疊使異常細胞被遮蓋。在臨床實驗中，液基測試增加了子宮頸細胞樣本的數量，可以明顯提高癌變細胞的檢測率，并相應減少需要重復做巴氏測試的次數，同時明顯提高了子宮頸細胞樣本的檢測質量，此方法對宮頸刮片的異常細胞診斷率提高13%，對低度鱗狀上皮以上病變的檢出率提高65%，明顯降低宮頸癌篩查的假陰性率[1]。HPV與SSC和HSIL的普遍相關關系已被證實，宮頸尖銳濕疣及CINⅠ以HPV6，11型感染為主，CINⅡ一III和宮頸癌以HPVl6，18型感染為主，本組實驗也證實HPV感染率與CIN嚴重程度呈正相關。有研究顯示，PCR—HPVl6，18一DNA檢測能有效篩查出ASCUS、LSIL[2]。故在宮頸癌篩查中，結合HPVl6，18型檢查對幫助發現宮頸癌和宮頸癌前病變有一定輔助作用。陰道鏡可直接觀察宮頸表面血管和形態以評估病變，可明顯減少細胞學的假陰性。

作為宮頸初次篩查手段TCT敏感性較低；HPV-DNA檢測其敏感性高，但特異度較低；陰道鏡可用于診斷宮頸癌和癌前病變，但不宜作篩查。無論細胞學檢查、HPV檢測或是陰道鏡下宮頸活檢，各具有優點和局限性，相互不能替代，因此有學者建議采用聯合的方法進行宮頸癌的篩查。2003年5月美國FDA推薦宮頸細胞學聯合HPV-DNA可作為30歲及以上婦女初次宮頸癌篩查的方法。在Meta分析中，HPVDNA檢測聯合細胞學后，對CINⅡ及以上病變的敏感性達到99.2%，特異度為87.3%[3]，這與本組實驗結果相近。

液基細胞檢查陽性者適合進行HPV-DNA試驗，提供了低級別異常時進行人乳頭瘤病毒試驗的篩查的依據，在人乳頭狀瘤病毒陽性的標本中發現宮頸原位癌和浸潤性癌比率由59.6%提高到76.0%。液基細胞學和HPV-DNA檢測結合能提高宮頸癌前病變及宮頸癌篩查的陽性。大量臨床隨機性研究證實，對細胞學檢測認定有宮頸上皮非典型增生的婦女推薦應用高危型HPV-DNA檢測，并認為如果有高度液基薄片癌前病變的婦女只進行1次高危型HPV-DNA檢測比應用1次陰道鏡檢查或2次液基薄片檢查更有效。

宮頸液基細胞學檢查和雜交捕獲二代HPV檢測均是目前較好的宮頸癌篩查方法，本組實驗證實HPV檢測CIN的敏感性比液基細胞學檢查高，但特異性較細胞學低，采用HPV與TCT聯合篩查宮頸癌和CIN的敏感度顯著高于單獨采用HPV檢測與TCT檢查，使高危人群的漏診率明顯降低。

因此，將TCT檢查與高危型HPV-DNA檢測聯合用于宮頸病變的篩查，能提高宮頸癌前病變及宮頸癌篩查的陽性率，是一種先進的宮頸癌篩查方法。

[1]Klinkhamer PJ,Meerding WJ,Rosier PF,et al.Liquid-based cervical cytology[J].Cancer,2003,99(5):263-271.

[2]羅淑貞,李清,劉軍,等.液基細胞學結合HPV檢測在宮頸癌篩查中的應用價值[J].西部醫學,2004,16(4):307-308.

[3]Arbyn M,Sasieni P,Meijer CJ,et al.Chapter9:clinical applications of HPV testing:a summary of metal-analyses[J].Vaccine,2006,24 (1):78-89.

R737.33

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：1671-8194（2013）09-0116-03