生化分析儀交叉污染的評價

李春妹

（江蘇省蘇州市相城區黃橋街道社區衛生服務中心檢驗科，江蘇 蘇州215132）

生化分析儀交叉污染的評價

李春妹

（江蘇省蘇州市相城區黃橋街道社區衛生服務中心檢驗科，江蘇 蘇州215132）

目的 探討全自動生化分析儀操作中交叉污染問題。方法 設定生化儀的分析順序，以三酰甘油（TG）、膽固醇（Cho）、葡萄糖（Glu）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）的檢測項目，觀察這些試劑的檢測結果與廠家提供結果進行比對。分析判斷交叉污染情況。結果 實驗中的任何項目之間無顯著影響，儀器狀態比較好時，操作過程無質量影響，可確保交叉污染較小，而當儀器狀況不好時，交叉污染較嚴重。結論 在日常工作中，既要注意項目間的設置，以減少交叉污染，更要重視儀器的使用、維護、保養，及時發現問題、及時解決，從而從根本上保證結果的準確。

全自動生化分析儀；精密度；交叉污染；試劑

生化分析儀多采用一根針吸取試劑，在吸取不同檢測項目的試劑之間僅有一個短暫的水沖洗的過程，若此過程無法達到徹底沖洗的目的，則可能會造成前后檢測項目之間的交叉污染[1-5]。故筆者對我院的全自動生化儀的交叉污染率進行了實驗評價。現將材料總結如下。

1 材料與方法

1.1 校準及質控品

以羅氏c.f.a.s（批號17006501）為校準血清對科華卓越400全自動生化分析儀進行定標，以羅氏公司的Pricnorm（ 批號10187470101）和Pricpath（批號10299415101）生化質控血清作為日常室內質控品。不同濃度實驗標本用去離子水復溶平衡后充分混勻，分裝于帶蓋試管內-20℃低溫保存作為實驗標本，每次測定時分別取出2個水平的質控品各1支置室溫溶化、混勻后與患者同步檢測。按試劑盒說明書設定儀器分析參數。

1.2 實驗步驟

1.2.1 交叉污染實驗

選擇某些項目的試劑列為實驗對象。其中，含磷酸鹽緩沖液試劑的項目，設定生化儀的分析順序，以三酰甘油（TG）、膽固醇（Cho）、葡萄糖（Glu）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）的檢測項目，觀察這些試劑的檢測結果與廠家提供結果進行比對。分析判斷交叉污染情況。

2 結 果

本文中通過對三酰甘油（TG）、膽固醇（Cho）、葡萄糖（Glu）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）、堿性磷酸酶（ALP）與廠家提供的參數比較情況；廠家提供結果（A組），本實驗結果設為（B組），實驗中的任何項目之間無顯著影響，儀器狀態比較好時，操作過程無質量影響，可確保交叉污染較小，而當儀器狀況不好時，交叉污染較嚴重。見表1。

表1 本組試驗檢測的TG、Cho、Glu、ALT、CK與廠家提供的參數比較情況

3 討 論

全自動生化分析儀中的交叉污染分為樣品交叉污染和試劑交叉污染兩類。樣品交叉污染主要來自樣品針的攜帶污染，在大多數全自動生化分析儀的設計中對此均通過樣品針的內外沖洗技術來解決。而試劑交叉污染則是近年來引起檢驗人員關注的話題，因為試劑交叉污染的避免必須依賴于檢驗人員的正確操作。

3.1 儀器自身交叉污染的消除

交叉污染在全自動生化分析儀上出現的環節較多，但主要集中在樣品加樣針、試劑加樣針、攪拌棒、比色杯等部件。由于為了保證加樣精度，一般生化分析儀的加樣針，都會在加樣的時候略過量吸取樣品或試劑，然后進行加樣。以至于加樣后加樣針的內壁會殘留一些樣品或試劑。儀器會自動排空、加壓內外沖洗。許多產品還提供樣品加樣針的專用清洗程序。攪拌棒也會出現交叉污染，當攪拌棒加入比色杯時，很容易把上一次攪拌的殘留物帶入比色杯，這樣會造成比色結果不準確。可以在每次攪拌后注意觀察攪拌棒是否完全清洗干凈，清洗的水是否充分清洗攪拌棒的最上沿。如果沒有可以調整攪拌棒的清洗高度。在每次試驗檢驗地帶網完成以后用酒精或次氯酸清洗攪拌棒，達到理想狀況。涂有特富龍的攪拌棒有助于改善清洗效果。為了防止比色杯出現交叉污染，可以在每批測試結束后清洗比色杯。在每天全自動生化儀關閉之前，也應該在杯子中儲滿水，等第二天開機時再清洗比色杯。可以調整比色杯清洗水量使其到達比色杯的三分之二的高度，也可以把比色杯拿出用95%的酒精清洗或進行超聲清洗。

3.2 試劑交叉污染的原因

由于任何自動清洗系統都有不同程度的殘留，因此以下情形都有可能出現試劑交叉污染：①試劑中含有下一測試所要測定的底物；②試劑中某種成分與下一反應所要測定的底物有作用；③當前反應物對后一反應有影響。往往這些情形出現時，檢驗人員并沒有去從試劑交叉污染的角度考慮。例如我科出現過一次膽固醇對總膽汁酸的交叉污染問題。由于總膽汁酸受外界影響挺大，所以總膽汁酸優先做。當膽固醇與總膽汁酸相隔很多項目時，測試結果有較大差異。在清洗比色杯和加樣針后，單獨重復做總膽汁酸結果很高。其后，單獨做總膽汁酸，發現總膽汁酸數值呈正態分布，值從低到高再從高到低。考慮可能存在交叉污染現象。又采取了清洗試劑加樣針后跟隨做樣本，隨著試劑加樣針清洗的次數由少到多，樣本的測定值也隨之下降到連續得到穩定值。在這中間又對試劑加樣針的內壁清洗壓力進行了相應的提高。在這次事件后通過查資料發現試劑加樣針R1在加膽固醇、甘油三酯試劑R1中含有膽酸鈉，造成TBA測定結果明顯增高。膽固醇、載脂蛋白A、HBDH后針內含有高濃度的磷酸鹽緩沖液，使磷測定結果不同程度偏高。肌酸激酶、CK-MB試劑R1含有鎂，對鎂測定有影響。

3.3 防止試劑交叉污染的軟件設計

在現代全自動生化分析儀中可利用機內軟件有效防止試劑交叉污染。①利用項目重新排序功能，避開有可能發生試劑交叉污染的項目。本方式在一般全自動生化分析儀中均提供。②對于可能發生試劑檢驗地帶網交叉污染項目加以定義，并以清洗程序相間。所用清洗劑可預設。本方式并非在所有全自動生化分析儀中提供，請仔細閱讀儀器使用說明書。

3.4 預防交叉污染的方法

①要求檢驗人員詳細掌握儀器和試劑盒的使用方法；②在最容易出現交叉污染的環節反復分析，一個一個去排除；③合理使用儀器，定時保養維護；④對檢驗項目進行科學、合理的排序；⑤對排序解決不了的間隔加入數次清洗劑測試；⑥減少使用污染比較嚴重的試劑盒；⑦在容易出現交叉污染的環節，如樣品加樣針可以用次氯酸定期清洗。試劑加樣針、攪拌棒、比色杯經常用酒精或次氯酸清洗。

總之。就交叉污染而言就是我們生化檢驗中的一項重要課題，是誤差誤診非常重要的一個環節。采取有效的辦法，才能確保我們所做檢驗項目的準確性。

[1]于 雷.生化自動 分析儀項間的 交 叉污染 及 其避 免方 法[J].臨 床 檢驗雜志,2003,21(3):168.

[2]陳曉婷,徐俊榮,馬建鋒.幾種試劑對鎂MTB法自動分析的影響[J].臨床檢驗雜志,2000,18(5):211-212.

[3]吳健.貴州醫 藥,全自動 生化分 析儀測定 順 序 對 檢 測 結 果 的 影 響[J].貴州醫藥,2004,28(2):124-125.

[4]叢 玉 隆.臨 床實 驗 分 析前 質 量 治 理 及 對 策 [J].中 華 醫 學 檢 驗 雜志,2004,27(4):482-487.

[5]葉應嫵,王毓之,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.中華人民共和國衛生部醫政司,2006:39-47.

R446.11

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：1671-8194（2013）09-0096-02