北五味子總多糖的提取工藝研究

盧彤宇

（吉林省人民醫院藥劑科，吉林 長春 130021）

北五味子總多糖的提取工藝研究

盧彤宇

（吉林省人民醫院藥劑科，吉林 長春 130021）

目的 篩選北五味子總多糖的提取工藝。方法 以水為提取溶劑，進行回流提取，采用正交實驗篩選了北五味子總多糖的最佳提取工藝。結果與結論 實驗結果表明北五味子總多糖的最佳提取工藝條件為：加 6 倍量水，回流提取 3 次，每次 1h。

北五味子；總多糖；提取工藝；正交實驗

北五味子為木蘭科植物五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill Fruit）的干燥成熟果實，是常用滋補中藥之一，具有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心的功效[1]。現代研究表明，北五味子含有木脂素、三萜、倍半萜、有機酸、揮發油和多糖等成分[2]。多糖在保肝、抗疲勞、免疫促進、抗衰老及抗氧化、抗腫瘤[2]等方面具有良好的生物活性。本文采用正交實驗優選北五味子總多糖的的最佳提取工藝，對北五味子多糖的進一步開發將大有裨益。

1 儀器與材料

1.1 儀器

DU800紫外可見分光光度計（美國Beckman Coulter公司）；BS124S電子天平（德國Sartorius公司）；79-2型磁力攪拌器（上海比郎儀器有限公司）；數顯恒溫水浴鍋（上海浦東物理光學儀器廠）。

1.2 試劑與材料

北五味子（購于長春同仁堂藥店）；95%乙醇；無水乙醇；無水葡萄糖；濃硫酸；苯酚均為分析純（北京化工廠）。

2 方法與結果

2.1 多糖的含量測定方法

2.1.1 標準溶液配制

葡萄糖標準溶液的配制：精密稱取105℃干燥至恒重的無水葡萄糖9.7mg，于100mL容量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度，即得葡萄糖標準溶液。5%的苯酚溶液的配制：量取蒸餾后的苯酚溶液5mL，于100mL棕色容量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度，即得。

2.1.2 標準曲線制備

精密量取葡萄糖標準溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL分別加入試管中，加蒸餾水補足至1.0mL，再分別加入5%苯酚溶液1.0mL，然后迅速滴加濃硫酸溶液2.5mL，振搖，放置使其充分反應，另以蒸餾水1.0mL，同法操作為空白，于紫外可見分光光度計上，在490nm處測定其吸光度。以A對葡萄糖濃度C做回歸，得方程：A=6.8688C+0.02231，r=0.9994。葡萄糖溶液濃度在0.0194～0.097mg/ mL范圍內，與吸光度呈線性關系。

2.1.3 供試品溶液的制備

精密量取提取溶液1mL加無水乙醇至含醇量80%，搖勻，5000r/ min離心30min，傾出上清液，沉淀用乙醇洗滌2次，揮去乙醇，殘渣用蒸餾水溶解并定容，搖勻，即得。

2.1.4 樣品含量測定

吸取樣品上清液1mL按照標準曲線的方法測定吸光度的值，在標準曲線上讀出對應的濃度值，即得。

2.2 北五味子提取多糖時藥材預處理

根據文獻報導，北五味子藥材中含有大量的脂溶性成分，如木質素、三萜、揮發油等，為避免脂溶性成分對多糖提取產生影響，我們考察了先用乙醇脫脂再用熱水回流提取和直接用熱水回流提取進行對比，具體操作如下：稱取北五味子藥材粗粉5g，2份，一份加入95ā乙醇30mL，回流提取1h，濾過，棄去濾液，藥渣揮去醇味，加入30mL水回流提取1h，濾過，收集濾液；另一份直接加入30mL水回流1h，濾過，收集濾液。按照總多糖的含量測定方法測定中多糖的含量，結果見表1。

表1 北五味子中總多糖提選取溶劑篩

試驗結果表明：直接采用水回流提取的總多糖大于先脫脂再用水回流提取的。因此采用直接用水回流提取。

2.3 正交實驗篩選北五味子總多糖提取工藝

經預試，影響北五味子總多糖提取的因素主要有A：提取溶劑；B：提取時間；C：提取次數三個因素，每個因素考察3個水平，因素水平見表2。

表2 正交實驗因素水平表

表3 正交實驗表

表4 方差分析表

根據以上因素水平，按照L9（3）4正交表進行試驗，稱取北五味子粗粉9份，每份10g，按照表2條件進行試驗，采用熱水回流提取，濾過，合并濾液，按照總多糖的含量測定方法測定總多糖的含量，實驗結果及方差分析見表3，表4。

由方差分析結果可知，A、B二個因素對北五味子總多糖的提取沒有顯著影響，而C因素有顯著影響，因此確定北五味子總多糖的提取工藝為A1B1C3，即：加6倍量水，回流提取3次，每次1h。

3 討 論

3.1 多糖的含量測定方法選擇，對于多糖含量測定一般采用比色法進行含量測定，本文中采用葡萄糖為對照品。用苯酚-硫酸為顯色劑，在490nm處用紫外可見分光光度計測定吸收度，計算含量，該方法是測定多糖的常用方法。

3.2 北五味子中含有大量脂溶性成分，為防止其對多糖提取產生干擾，考察了先脫脂再回流提取和直接回流提取兩種方法對其進行考察，結果發現先脫脂再進行回流提取并不能提高北五味子總多糖的提取率，因此選用直接回流提取的方法提取，并通過正交實驗篩選其總多糖的最佳提取工藝。北五味子總多糖的最佳提取工藝為：加6倍量水，回流提取3次，每次1h。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2005年版一部[M].北京:化學工業出版社,2005:44.

[2]李 曉 光 ,高 勤,翁 文 ,等.五 味 子 多 糖 的 研 究 概 況 [J].時 珍 國 醫 國藥,2006,17(6):931.

R282.710.3

：B

：1671-8194（2013）09-0090-02