小兒肺炎支原體感染的病原學(xué)診斷

張利軍

（黔南州人民醫(yī)院 貴州 黔南州 558000）

肺炎支原體是介于病毒和細菌之間的一種微生物，沒有細胞壁，含有DNA和RNA，是小兒呼吸道感染的最常見的病原體。肺炎支原體感染疾病多發(fā)生于冬春季節(jié)，該疾病在不同的兒童身體上有不同的體征表現(xiàn)，而且常常伴有肺外合并癥，近年來發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。本次研究主要是對2011年1月至12月來我院接受診斷治療的85例呼吸道感染的患兒使用不同的病原學(xué)方法來診斷患兒疾病，分析哪種診斷方法的效果最佳，最適宜臨床中的推廣使用。以下是本次研究的主要

內(nèi)容：

1 對象

本次研究的主要對象為從2011年1月－12月來我院接受診治的85例肺炎支原體感染的患兒，男53例，女32例，年齡為3歲到13歲。其中3～5歲15例；5～7歲33例；7～9歲20例；10歲及以上17例。所有患者的癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱、全身不適、頭痛和咳嗽等。符合呼吸道感染臨床癥狀。

2 方法

本次研究采用的病原學(xué)診斷方法主要有支原體培養(yǎng)、抗原檢測、血清學(xué)檢測和核酸技術(shù)檢測等方法。

首先，肺炎支原體培養(yǎng)：取患者鼻咽拭子或吸液、痰、胸膜積液、支氣管肺泡灌洗物、氣管吸液和肺組織等作為標本，接種在改良的Hayflick肉湯或瓊脂平板進行肺炎支原體的培養(yǎng)，然后等到4－20天后，將長出的菌落提取并顯微鏡下觀察診斷；其次，抗原檢測：包括直接免疫熒光、免疫印跡和雙單抗夾心酶免疫抗原捕獲法；再有，血清學(xué)檢測：目前血清抗體診斷仍為國際上通用的診斷標準，肺炎支原體急性感染血清學(xué)診斷包括IgG和IgM抗體；最后，基于核酸技術(shù)檢測肺炎支原體的檢測方法：如普通PCR、實時PCR等幾乎能檢測所有已知的人類致病支原體，具有很高的敏感性和特異性，而且檢測方法快速、便捷。

3 結(jié)果

本次不同病原學(xué)方法的診斷結(jié)果顯示，85名呼吸道感染患兒中，由于肺炎支原體感染的人數(shù)達到45例，占整體的52.9%，其中，5－9歲的兒童由該病感染的人數(shù)最多，占整體的77.8%。由于本次研究過程表面，使用PCR診斷技術(shù)是目前臨床中最為準確的方法，因此，通過PCR的檢測結(jié)果來作為診斷依據(jù)。

以下是不同年齡組呼吸道感染患兒肺炎支原體PCR檢測結(jié)果：見表1。

表1

4 討論

4.1 發(fā)病機制［1］：目前認為肺炎支原體感染由呼吸道上皮細胞吸附及細胞毒的作用引起，肺炎支原體病毒飛沫經(jīng)口腔吸入呼吸道后，在黏膜表面與呼吸道黏膜上皮細胞膜上神經(jīng)氨酸受體緊密結(jié)合，并附著在其上，避免了黏膜纖毛的清除作用及吞噬細胞的吞噬作用，同時可以吸取自身所需要的營養(yǎng)，釋放出過氧化氫等有害物質(zhì)，造成黏膜上皮及纖毛破壞。此外，兒童機體感染肺炎支原體后可產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，形成免疫復(fù)合物，導(dǎo)致肺及肺外多臟器的損傷。體液免疫活性物質(zhì)在發(fā)肺炎支原體感染病中起重要作用。

4.2 診斷方法：目前，小兒肺炎支原體感染診斷的可靠的方法是采用支原體的分離培養(yǎng)，但由于臨床上病原體的含量較少，而且該方法操作較繁瑣、培養(yǎng)要求高、時間長，在臨床中的常規(guī)檢查難以使用。因此，當前臨床中使用最為常見的肺炎支原體感染診斷方法為血清學(xué)檢查，該方法主要是對血清中的肺炎支原體特異性抗體進行滴度的檢測，尤其是通過對患兒在患病的急性期和恢復(fù)期的雙份血清抗體滴度來診斷是否受到肺炎支原體感染，臨床上常用的試驗方法有：顆粒凝集試驗、補體結(jié)合試驗、間接免疫熒光試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等，而其中酶聯(lián)免疫吸附試驗方法最為常用，而且目前很多醫(yī)藥市場或醫(yī)院中已經(jīng)出現(xiàn)多種便利的、針對不同抗原的試劑盒來提供檢測。在檢測的過程中，同時還需要檢測IgG和IgM［2］，如果檢測到持續(xù)高滴度肺炎支原體－IgM或恢復(fù)期抗體滴度較急性期四倍或以上變化時即可做出可靠的診斷。但是，該方法在使用過程中很難區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染，由于該方法在臨床治療中很難獲得雙份血清，而且在免疫反應(yīng)的早期或免疫受損的患兒可能呈假陰性，受到肺炎支原體感染后高滴度抗體可在患兒感染后保持數(shù)月。

隨著醫(yī)學(xué)分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展，肺炎支原體感染的診斷技術(shù)也在不斷進步。當今的PCR診斷技術(shù)由于其診斷快速，敏感性和特異性強，受到越來越多的醫(yī)院使用和患者的信賴，臨床研究顯示，該方法敏感性高達80%以上，特異性可達90%以上。現(xiàn)在研究表明PCR診斷技術(shù)方法更適用于肺炎支原體感染患兒的早期診斷：有學(xué)者通過實驗研究，比較了鼻咽吸出物PCR檢測與血清間接顆粒凝集試驗的診斷價值，試驗以抗體滴度高于1∶640或雙份血清抗體滴度升高四倍以上作為肺炎支原體感染的診斷標準，試驗結(jié)果顯示，聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）方法的敏感性可達78.6%，特異性為75.9%；相比較，血清學(xué)方法敏感性為79.2%，特異性為75.2%。因此，本次的研究結(jié)果主要以PCR診斷方法的結(jié)果作為主要參考依據(jù)，根據(jù)其在臨床上的優(yōu)點來做出最為準確的診斷。

綜上所述，從本次的研究結(jié)果顯示，當前小兒肺炎支原體感染是兒童呼吸道感染疾病中的主要發(fā)病感染源，而且發(fā)病率還在不斷增高，而且不典型病例增多，病情變得更為復(fù)雜。兒童反復(fù)感染肺炎支原體可刺激免疫細胞的增殖，最終引起氣道高反應(yīng)性和慢性炎癥，甚至發(fā)展為哮喘。因此，要重視小兒中肺炎支原體的感染。做到早診斷、早治療，降低誤診、誤治率，避免治療過程中并發(fā)癥的發(fā)生，保證患兒的早日康復(fù)［5］。

［1］ 周景興.90例小兒肺炎支原體感染臨床診治分析［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2010，31（18）：2899－2900

［2］ 陳志敏.兒童肺炎支原體感染診治研究進展［J］.臨床兒科雜志，2008，26（7）：562－564

［3］ Kim NH，Lee JA，Eun BW，et al.Comparison of polymerase chain reaction and the indirect particle agglutination antibody test for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children during two outbreaks［J］.Pediatr Infect Dis J，2007，26（10）：897－903

［4］ 史祥，史包威.小兒肺炎支原體感染68例臨床診治分析［J］.求醫(yī)問藥，2011，9（2）：50－51

［5］ 張紅軍，線敬澤，趙青，陳鴻芝.小兒肺炎支原體感染的臨床診治體會［J］.中國醫(yī)藥指南，2010，8（10）：99－100