CyclinD1在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

肖 明 趙學(xué)堂

（壽光市皮膚病醫(yī)院，山東 壽光 262700）

CyclinD1在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

肖 明 趙學(xué)堂

（壽光市皮膚病醫(yī)院，山東 壽光 262700）

目的 探討 cyclinD1 在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的異常表達(dá)及與生物學(xué)行為的關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組化 PV9000 法檢測(cè) 52 例皮膚鱗狀細(xì)胞癌中 p16 和 cyclinD1 的表達(dá)水平。結(jié)果 52 例皮膚鱗狀細(xì)胞癌中 cyclinD 的陽(yáng)性表達(dá)率為 67.3%。結(jié)論 cyclinD1 的異常表達(dá)在皮膚鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，可作為判斷惡性程度，評(píng)估預(yù)后的指標(biāo)。

鱗狀細(xì)胞癌；免疫組織化學(xué)；cyclinD1

皮膚鱗狀細(xì)胞癌是皮膚科常見(jiàn)惡性腫瘤。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多步驟的過(guò)程，是多種癌基因的激活和抑癌基因的失活或缺失、細(xì)胞凋亡基因表達(dá)的紊亂導(dǎo)致的。CyclinD1是作為細(xì)胞周期重要的正調(diào)控因子，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要作用[1]本研究采用免疫組化技術(shù)，本研究采用免疫組化PV9000法檢測(cè)皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織和正常皮膚組中CyclinD1表達(dá)情況，試圖探討其表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2006年～2011年壽光市皮膚病醫(yī)院病理科保存的活檢或手術(shù)石蠟標(biāo)本，經(jīng)2名病理醫(yī)師HE染色確定為皮膚鱗狀細(xì)胞癌。共46例，其中男20例，女26例；年齡41～70歲，平均60.3歲。按Broders 病理分級(jí)法將其分為：G1是13例、G2是24例、G3是15例。對(duì)照組是15例正常的皮膚組織，來(lái)自皮膚活檢術(shù)或者是外科手術(shù)中皮損皮膚的切除部分。

1.2 方法

1.21 使用的主要試劑有：鼠抗人單克隆CyclinD1抗體、PV9000免疫組化試劑盒、EAB顯色試劑盒、PBS緩沖液均購(gòu)于北京中杉金橋生物試劑公司。

1.2.2 免疫組織化學(xué)方法：嚴(yán)格按照PV9000試劑盒的步驟順序進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)時(shí)用已經(jīng)明確知道的CyclinD1陽(yáng)性的前列腺的組織切片作為實(shí)驗(yàn)時(shí)的陽(yáng)性對(duì)照，而用PBS作為實(shí)驗(yàn)的陰性對(duì)照。

1.2.3 結(jié)果判斷的標(biāo)準(zhǔn)：觀察細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)如果出現(xiàn)綜褐色或者是棕黃色的顆粒就可以判斷為陽(yáng)性。

1.2.4 判斷的標(biāo)準(zhǔn)主要有：隨機(jī)選擇顯微鏡下的5個(gè)獨(dú)立的高倍視野，觀察視野內(nèi)陽(yáng)性的細(xì)胞所占的比例進(jìn)行判斷，其中①無(wú)表達(dá)，即全部細(xì)胞都沒(méi)有著色，用（-）表示；②低表達(dá)，即染色的陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比N＜25%，用（+）表示；③中度表達(dá)，即染色的陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分?jǐn)?shù)N，25%＜N＜50%，用（+ +）；④高表達(dá)，即染色的陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分?jǐn)?shù)N＞50%，用（+++）表示。3對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)：采用SPSS17統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，P值＜0.05差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果CyclinD1在正常的細(xì)胞染色比較淺，陽(yáng)性表達(dá)為17%；CyclinD1在鱗癌組織細(xì)胞中染成棕黃色，陽(yáng)性表達(dá)為25%，陽(yáng)性細(xì)胞散在的分布在組織中。可見(jiàn)，CyclinD1在正常細(xì)胞中的表達(dá)遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于在鱗癌細(xì)胞中的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義。CyclinD1在鱗癌組織中的表達(dá)與年齡無(wú)關(guān)，與不同病理分級(jí)有關(guān)，隨著病理分級(jí)的逐漸升高，著色強(qiáng)度增加，陽(yáng)性表達(dá)率升高。見(jiàn)表1所示。

表1 CyclinD1在正常皮膚及皮膚鱗癌組織中的表達(dá)

3 討 論

cyclinD1 是一種細(xì)胞周期素D，它的作用是可以與CDK4相結(jié)合，活化CDK4。而被活化以后的CDK4能夠使Rb蛋白發(fā)生磷酸化，從而能夠進(jìn)一步促使轉(zhuǎn)錄基因E2F發(fā)生解離，讓細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期[2]。本研究顯示CyclinD1主要在皮膚鱗癌組織的細(xì)胞核中表達(dá)，其陽(yáng)性表達(dá)率較正常對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明CyclinD1在皮膚鱗癌組織中有促進(jìn)細(xì)胞增殖惡化作用，與皮膚鱗癌的發(fā)生相關(guān)。CyclinD1作為細(xì)胞周期中重要的調(diào)控因子，其基因多態(tài)性的不同對(duì)腫瘤的形成有不同的影響[3,4]。通過(guò)本次研究得出以下結(jié)果：cyclinD1在正常的組織細(xì)胞中是低表達(dá)，細(xì)胞著色比較淺；而在鱗癌組織中表達(dá)明顯增加，著色較深。這說(shuō)明：cyclinD1對(duì)于鱗癌的形成具有一定的促進(jìn)作用。在病理上cyclinD1表達(dá)的分級(jí)在G1、G2、G3間有顯著性差異（P＜0.05），低分化鱗癌（93.3%）明顯高于高分化鱗癌（46.2%）及中分化鱗癌（66.7%），研究與沈金翠等[5]研究結(jié)果一致。本研究提示cyclinD1異常表達(dá)可作為腫瘤分化程度和預(yù)后的評(píng)價(jià)指標(biāo)之一。

[1]楊軍,LeeSeungHun,黃曉波,等.特應(yīng)性皮炎炎動(dòng)物模型表皮分化蛋白表達(dá)的改變[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志,2006,20(12):730-733.

[2]Marx J . New tumor suppressor may rival p53[J]. Science,1994, 264(15):344-345.

[3]Lu F, Gladden AB, Diehl JA. An alternatively spliced CyclinD1isoform, CyclinD1b, is a nuclear oncogene [J].Cancer Res,2003,63 (21):7056-7061.

[4]Dubus P,Young P,Beylot Barry M,et al. Value of interphase FISHfor the diagnosis of t(11: 14) ( q13;q32) on skin lesions of mantle celllymphoma[J]. Am J Clin Pathol,2002,118(6):832-841.

[5]沈金翠,李靈.PTEN,Ki-67和CyclinD1在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志,2012,26(8):674-678.

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：1671-8194（2013）04-0263-02