子宮內膜癌中MMP-9、CD44v6的表達及意義

高 萍 李曉云 陳曉麗 王雪楠 楊愛軍 任英霞

子宮內膜癌中MMP-9、CD44v6的表達及意義

高 萍1李曉云2陳曉麗2王雪楠2楊愛軍2任英霞1

目的檢測基質金屬蛋白酶MMP-9和細胞粘附分子CD44拼構變異體6（CD44v6）在子宮內膜癌中的表達。方法免疫組學S-P法檢測73例EC組織、27例正常內膜中CD44v6、MMP-9表達情況。結果MMP-9在EC中的陽性表達顯著高于正常增生期子宮內膜（P＜0.01）；高、中分化的EC中MMP-9的陽性表達率低于低分化組（P＜0.05）；肌層浸潤組MMP-9陽性和強陽性的表達率高于無肌層浸潤組（P＜0.05），但與肌層浸潤深度無關（P＞0.05）。CD44v6在EC中的陽性表達顯著高于正常增生期子宮內膜（P＜0.01）；CD44v6與肌層浸潤深度有關（P＜0.05）。結論聯合檢測CD44v6、MMP-9可作為判斷EC惡性程度，預測轉移和評估預后的生物學指標。

子宮內膜癌；基質金屬蛋白酶-9；CD44拼構變異體6

子宮內膜癌（Endometrial carcinoma）是女性生殖道常見的三大惡性腫瘤之一近年來發病率有明顯上升趨勢，且發病趨于年輕化[1]。其發病機制尚未完全闡明，一旦發生浸潤轉移及復發，預后較差。本研究旨在探討MMP-9和CD44v6在EC的表達及其與EC生物學行為及預后的關系，從而為EC的早期診斷和治療開辟新途徑。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2005年1月～2012年12月在濟寧醫學院附屬醫院病理科診斷明確的EC根治術后患者73例作為觀察組。納入標準：術前未進行任何治療；無其它的相關疾病；臨床資料完整。患者年齡28～79歲，平均49.05歲。病理分級Ⅰ級26例，Ⅱ級23例，Ⅲ級24例。選取同期因子宮肌瘤行子宮切除的正常增生期子宮內膜組織27例作為對照組，兩組之間資料比較差別無顯著性（P＞0.05）。

1.2 試劑與方法鼠抗人MMP-9、CD44v6單克隆抗體，S-P光譜超敏試劑盒、DAB酶底物顯色劑等均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。操作按S-P試劑盒說明進行。

1.3 結果判定以細胞膜和/或細胞漿出現的黃色、棕黃色或棕褐色著色為陽性細胞。結果判定方法[2]：高倍鏡隨機選10個染色良好的視野（腫瘤壞死區、邊緣區及與良性組織交界區均不作為計數視野），陽性的腫瘤細胞所占百分比（A）：無陽性腫瘤細胞0分；1%～25%陽性腫瘤細胞1分；26%～49%陽性腫瘤細胞2分；≥50%陽性腫瘤細胞3分。染色強度（B）：無色0分；淺黃色1分；棕黃色2分；棕褐色3分。最終計分A×B：0分為陰性（-）；1～3分為陽性（+）；4～9分為強陽性（++）。

1.4統計學方法采用SPSS 16.0軟件系統。各組間用χ2檢驗，相關性應用Spearman等級相關法，雙尾檢驗。

2 結果

2.1 MMP-9和CD44v6在不同子宮內膜組織中的表達MMP-9和CD44v6在EC中的陽性表達率分別為83.6%和72.6%，高于對照組的25.9%和44.4%，差異有顯著性（P均＜0.01）。

2.2 MMP-9和CD44v6在不同子宮內膜癌中的表達MMP-9的表達與EC病理分級及肌層浸潤程度均明顯相關（P＜0.05）；與淋巴結轉移及組織類型不相關（P＞0.05）。CD44v6的表達與EC的肌層浸潤及浸潤深度均明顯相關（P＜0.01）；隨淋巴結轉移和病理分級增高有下降的趨勢，但其差別無統計學意義（P＞0.05）。CD44v6和MMP-9在3例腺鱗癌均為強陽性表達，均明顯高于其在70例腺癌的陽性和強陽性表達率，但無統計學差別（P＞0.05）。見表1。

表1 MMP-9、CD44v6在不同子宮內膜癌組織中的表達[n(%)]

3 討論

腫瘤細胞向遠處轉移，首先必須降解細胞外基質和基底膜。包括腫瘤細胞粘附、基底成分蛋白水解、遷移三個階段。在此過程中細胞粘附分子、降解酶類、瘤細胞的運動及其受體密切相關[3]。

CD44v6是CD44的一種拼構變異體，主要在上皮源性細胞和腫瘤細胞中表達，與腫瘤的發生、發展密切相關[3-4]。本研究發現CD44v6在子宮內膜癌的陽性率為72.6%，明顯高于對照組，說明EC中CD44v6的高表達與其發生有一定關系。CD44v6在肌層浸潤組的陽性表達率59.5%明顯低于無肌層浸潤組的90.4%（P＜0.05）。CD44v6在有肌層浸潤時表達降低，使得腫瘤細胞間粘附性下降，便于腫瘤細胞從原發灶脫落向遠處轉移。雖CD44v6的表達隨病理分級增高和淋巴結轉移有降低趨勢，卻無統計學意義，這與劉乃富等[5]研究結果一致。另外3例腺鱗癌中CD44v6均為陽性表達，陽性表達率高于腺癌，但統計學上卻無意義。筆者認為樣本量較少可能是造成這種差異并無統計學意義的原因，所以對CD44v6與不同組織學分型EC的關系有待擴大樣本量進一步研究。另外雖統計學顯示MMP-9表達與EC組織類型不相關，但作者認為這種結果可能與腺鱗癌樣本量（僅3例）較少有關，有待今后擴大樣本研究。

目前在對其它腫瘤的研究發現CD44v6 表達的蛋白參與了癌細胞與基底層粘連蛋白及Ⅳ型膠原酶（MMP-2、MMP-9）的粘附，為癌細胞降解細胞外基質創造條件，使癌細胞容易從細胞巢上脫落。本研究結果亦顯示：CD44v6與 MMP-9 在EC中均呈高表達狀態，且其陽性表達率均顯著增高的趨勢一致，說明CD44v6和MMP-9在EC發生、發展過程中可能有協同促進作用，詳盡的機制還有待進一步研究。

[1] Benshushan A. Endometrial adenocarcinoma in young patients：evaluation and fertility-preservingtreatment[J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2004, 117(2)：132.

[2] Khan KN, Kitajima M, Hiraki K, et al. Immunopathogenesis of pelvic endometriosis：role of hepatocyte growth factor, macrophages and ovarian steroids[J]. AmJReprod Immunol, 2008,60(5)：383-404.

[3] Montgomery E, Abraham SC, Fisher C, et al. CD44 loss in gastric stromal tumors as a prognostic marker[J]. Am J Surg Pathol, 2004,28(2)：168.

[4] 廖治,肖洪濤,瞿大成,等.CD44分子與子宮內膜癌關系的研究進展[J].西部醫學, 2009 21(6)：1027-1028.

[5] 劉乃福,薛鳳霞.COX-2、P16及CD44v6在人子宮內膜癌中的表達及臨床意義[J].山東醫藥,2010,50(20)：97-98.

R34

A

1673-5846(2013)06-0300-02

1濟寧市婦幼保健院，山東濟寧 272100

2濟寧醫學院附屬醫院，山東濟寧 272100