蒙藥珍蝥眩痛八味貼臨床前安全性實驗研究

劉 娜 郝 鋼 韓昊奇

（1.呼和浩特食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 0100202.內蒙古食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特010010）

蒙藥珍蝥眩痛八味貼是由珍珠粉、斑蝥、冰片、琥珀、皂角、刺樟腦、蓖麻子、梔子8味藥組成的貼劑,主治高血壓引起的眩暈目眩、頭痛等,臨床療效顯著。由于處方中含有毒性藥材,為此我們對珍蝥眩痛八味貼進行了藥物安全性試驗研究,試驗結果如下。

1 實驗方法

1.1 實驗動物：昆明種小鼠，生產許可證：SCFK(蒙)2002－0001，購自內蒙古大學實驗動物中心。實驗環境：屏障動物實驗室，動物使用許可證號：YXK(蒙)2004-0001。家兔,豚鼠 來源：北京市海淀區興隆實驗動物養殖廠合格證編號：SCXK(京)2011-0006。飼料來源：北京科澳協力飼料有限公司 證號：SCXK（京）2005-0007。來源：北京市海淀區興隆實驗動物養殖廠。

1.2 實驗儀器：電子天平 型號：梅特勒-托利多P L-2002。

1.3 陽性對照藥:2，4二硝基氯苯，生產廠家：上海試劑一廠，批號：77-11-01。

2 實驗方法

2.1 急性毒性試驗：預實驗：取12只小鼠，雌雄各半，體重 18～22g,隨機分成 4組，分別以 20g/k g、16g/k g、12g/k g、8g/k g的濃度給小鼠灌胃,確定其100%的死亡濃度和0%的死亡濃度。

正式試驗：取 50只小鼠，雌雄各半，體重 18～22g隨機分成5組。用100%的死亡濃度和0%的死亡濃度以及之間的五組濃度（劑間距為0.7）對小鼠進行灌胃給藥，灌胃體積為80m l/k g,不同濃度相同體積，觀察14天,并記錄小鼠死亡數,毒性反應,食欲、行為等情況。以Bliss法測定半數致死量 (L D50)，Spss13統計軟件計算L D50。死亡動物進行尸解觀察。見表1。

實驗結果表明：珍蝥眩痛八味貼給藥后出現較明顯的毒副作用，珍蝥眩痛貼小鼠口服給藥L D50為9.113g/k g(4.429～18.748，可信限 95%)。

表1 珍蝥眩痛八味貼小鼠口服給藥測定LD50

2.2 皮膚刺激性試驗

2.2.1 分組：選取家兔8只，隨機分為兩組，即皮膚完整組和皮膚破損組。實驗前24小時對家兔背部進行脫毛處理。進行破損皮膚刺激試驗時在用藥部位劃“井”字并以滲血為度。

2.2.2 給藥及觀察：將貼片貼于家兔背部一側除毛區，另一側用賦形劑做空白對照，給藥貼敷時間為8小時，貼敷完畢后清洗藥物。在去除藥物后1小時觀察記錄紅斑及水腫、涂敷部位是否有色素沉著、出血點、皮膚粗糙或皮膚菲薄情況及其發生時間及消退時間，并對紅斑及水腫進行評分。第一次給藥15天后，同法給藥，在去除藥物后1、24、48和 72小時肉眼觀察并記錄涂敷部位有無紅斑和水腫等情況，并對紅斑及水腫進行評分。

2.2.3 結果評價：計算每一觀察時間點各組積分均值，然后計算觀察期限內每天每只動物積分均值，按文獻方法2進行刺激強度評價。結果表明珍蝥眩痛八味貼對完整皮膚有輕度刺激性；對破損皮膚有中度刺激性。

2.3 過敏試驗

2.3.1 分組：豚鼠30只，隨機分為三組,受試物組，陰性對照組，陽性對照組。

2.3.2 給藥：在第0、7和14天用供試品貼片局部給藥以誘導，第28天再次將貼片貼于脫毛區8小時以局部激發。去除貼片后觀察72小時內皮膚過敏情況，并按皮膚過敏反應3評分標準進行評分。

2.3.3 觀察指標：在致敏后 1小時及激發后24、48和72小時觀察皮膚紅斑、水腫，同時密切觀察動物是否有哮喘、站立不穩或休克等嚴重的全身性過敏反應出現。按文獻方法3進行過敏反應發生率及評價。

2.3.4 實驗結果：見表2.

表2 過敏反應發生率及評價結果

實驗結果表明,本次全身過敏反應賦形劑對照組過敏反應發生率為0%，陽性對照組過敏反應發生率為100%，試驗成立。給藥組過敏反應發生率為8%，皮膚致敏性評價為低致敏性。

3 實驗結論

3.1 珍蝥眩痛八味貼給藥后出現較明顯的毒副作用，珍蝥眩痛八味貼小鼠口服給藥L D50為9.113g/k g(4.429～18.748，可信限 95%)。

3.2 珍蝥眩痛八味貼對完整皮膚有輕度刺激性；對破損皮膚有中度刺激性。

3.3 珍蝥眩痛八味貼過敏反應發生率為8%，皮膚致敏性評價為低致敏性。

[1]課題研究組,中藥、天然藥物急性毒性研究技術指導原則[S].中藥、天然藥物急性毒性試驗技術指導原則,2004.

[2]課題研究組.中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究的技術指導原則[S].中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究的技術指導原則,2004.

[3]課題研究組.中藥、天然藥物免疫毒性（過敏性、光過敏反應）研究的技術指導原則[S].中藥、天然藥物免疫毒性（過敏性、光過敏反應）研究的技術指導原則,2004.