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環(huán)糊精包合碘臨床消毒效果的研究

2013-04-29 12:17:00李桂明林樹乾趙增成等
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013年6期

李桂明 林樹乾 趙增成等

作者簡(jiǎn)介:李桂明(1980-),男,助理研究員,碩士,研究方向?yàn)樾芦F藥研發(fā)。

通訊作者:宋敏訓(xùn)(1963-),男,研究員,博士,主要研究方向?yàn)榍莶≡\斷與新獸藥研發(fā)。

摘要:自行研制的環(huán)糊精包合碘具有有效碘含量高、質(zhì)量穩(wěn)定和刺激性小等優(yōu)點(diǎn)。參考《消毒技術(shù)規(guī)范2002版》的方法,分別以木質(zhì)桌面、自然水體和雞舍為消毒對(duì)象,驗(yàn)證其臨床消毒效果。結(jié)果表明,環(huán)糊精包合碘1∶ 800倍(W/V)樣品稀釋液,對(duì)木質(zhì)桌面消毒作用10 min,對(duì)物體表面自然菌的平均殺滅對(duì)數(shù)值為243;1∶ 10 000倍(W/V)投入自然水體,10 min大腸桿菌殺滅率為100%,10~30 min自然菌殺滅率為9965%~100%;1∶ 500倍(W/V)樣品稀釋液,60 min對(duì)雞舍地面、墻壁自然菌殺滅率為9273%和9358%。

關(guān)鍵詞:環(huán)糊精包合碘;消毒;自然菌

中圖分類號(hào):S857.12+3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A 文章編號(hào):1001-4942(2013)06-0099-03

在畜禽養(yǎng)殖過程中,碘制劑以其消毒效果好、毒副作用低、刺激性小、無殘留[1,2]以及無生態(tài)毒性等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用。其中,季銨鹽碘和聚維酮碘目前已在臨床中廣泛使用[3]。但有機(jī)絡(luò)合碘制品有效碘釋放率較低、環(huán)境消毒成本高,制約了在獸醫(yī)臨床中的推廣應(yīng)用[4]。“環(huán)糊精包合碘”是碘單質(zhì)被β-環(huán)糊精包合形成的超分子結(jié)構(gòu),其有效碘(I)含量高、穩(wěn)定性好、水溶性強(qiáng)。本試驗(yàn)參考《消毒技術(shù)規(guī)范2002》進(jìn)行物體表面消毒、水體消毒和雞舍消毒試驗(yàn),驗(yàn)證其消毒效果,為開發(fā)新型消毒劑提供有效依據(jù),降低畜禽傳染病對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的危害,保障食品安全。1 材料與方法11 試劑與儀器

111 物體表面消毒 消毒劑:環(huán)糊精包合碘(有效碘169%)稀釋成1∶ 800倍,山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供。

中和劑:含05%硫代硫酸鈉+02%卵磷脂+3%吐溫-80的磷酸鹽緩沖液。

培養(yǎng)基:胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基。

稀釋液:02%吐溫-80磷酸鹽緩沖液(PBS)。

無菌棉拭子:一次性醫(yī)用棉簽滅菌后備用。

規(guī)格板:50 mm × 50 mm無菌不銹鋼規(guī)格板。

受試對(duì)象:山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心微生物準(zhǔn)備室木質(zhì)桌面。

112 水體消毒 消毒劑:環(huán)糊精包合碘(有效碘169%),稀釋成1∶ 10 000倍,山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供;以聚維酮碘為對(duì)照消毒劑。

中和劑:含05%硫代硫酸鈉+02%卵磷脂+3%吐溫-80的磷酸鹽緩沖液。

自然菌采用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,大腸桿菌采用麥康凱培養(yǎng)基。

受試對(duì)象:濟(jì)南郊區(qū)自然水樣。

113 雞舍消毒 消毒劑:環(huán)糊精包合碘(有效碘169%)稀釋成1∶ 500倍,山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供。

試驗(yàn)動(dòng)物與條件:200只50日齡育成雞,雞舍長(zhǎng)×寬×高=3 m × 57 m × 28 m。

培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

無菌棉拭子:一次性醫(yī)用棉簽滅菌后備用。

培養(yǎng)皿:統(tǒng)一采用內(nèi)徑90 mm培養(yǎng)皿。

12 試驗(yàn)方法

121 物體表面消毒 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版) 2129,將規(guī)格板放于木質(zhì)桌面,30個(gè)區(qū)塊作為陽性對(duì)照區(qū),樣本不擦拭消毒液進(jìn)行采樣;30個(gè)區(qū)塊為試驗(yàn)區(qū),將配好的消毒液對(duì)木質(zhì)桌面噴灑至濕潤(rùn),消毒作用10 min。用棉拭子涂抹法進(jìn)行采樣,統(tǒng)計(jì)自然菌落數(shù),計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值。另設(shè)陰性對(duì)照,即將同批次中和劑、稀釋液各取10 ml培養(yǎng)基,檢測(cè)中和劑和稀釋液中是否有自然菌。

殺滅對(duì)數(shù)值=消毒前菌數(shù)對(duì)數(shù)值-消毒后菌數(shù)對(duì)數(shù)值

122 水體消毒 取9份水樣,每份水樣1 L,其中4份分別加入01 g的環(huán)糊精包合碘,另外4份加入01 g聚維酮碘,1份不加消毒劑,攪拌均勻,記錄時(shí)間。根據(jù)加入消毒劑時(shí)間,第1份水樣加入環(huán)糊精包合碘10 min后加入中和劑,迅速取樣,進(jìn)行原液、1∶ 10、1∶ 100三個(gè)濃度進(jìn)行計(jì)數(shù);第2份20 min后加入中和劑,同樣方法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù),依次類推。聚維酮碘采取相同辦法。每個(gè)濃度重復(fù)2次,計(jì)算平均值。不加消毒劑及加入消毒劑后不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行自然菌和大腸桿菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

123 雞舍消毒 地面消毒先由外向內(nèi)噴霧1次,噴藥量為250 ml/m2,待室內(nèi)消毒完畢后,再由內(nèi)向外重復(fù)噴霧1次。墻壁消毒噴灑量為100 ml/m2。 于消毒前、消毒30 min、60 min進(jìn)行采樣。空氣5個(gè)點(diǎn)(墻角12 m處4個(gè)點(diǎn)加室中心1個(gè)點(diǎn))、地面3個(gè)點(diǎn)(東、中、西)、墻面4個(gè)點(diǎn)(12 m處4個(gè)墻角)。空氣采樣參考GB/T 17093-1997采用自然沉降法;墻面和地面采樣方法如下:將無菌棉拭子在含 10 ml 稀釋液(09%生理鹽水)試管中浸濕,于管壁上擠干,對(duì)采樣區(qū)(選定5 cm×5 cm范圍)涂抹采樣,橫豎往返各 8次。采樣后,以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管內(nèi),電動(dòng)混勻器振蕩20 s或在手掌振打200次,做適當(dāng)稀釋后備用。采樣后實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行自然菌計(jì)數(shù),計(jì)算單位體積(或面積)的自然菌數(shù)。

2 結(jié)果與分析

21 物體表面消毒效果

由表1可知,所試環(huán)糊精包合碘1∶ 800倍(W/V)樣品稀釋液,對(duì)木質(zhì)桌面噴灑至濕潤(rùn),消毒作用10 min,其物體表面自然菌的殺滅對(duì)數(shù)值

綜合分析數(shù)據(jù),殺滅對(duì)數(shù)值基本在平均值附近,考慮菌落計(jì)數(shù)的實(shí)際操作誤差,認(rèn)為本次試驗(yàn)可以證明環(huán)糊精包合碘對(duì)物體表面消毒有效。22 水體消毒效果

由表2可知, 10 min環(huán)糊精包合碘和聚維酮碘對(duì)自然菌殺滅率為9965%和9947%,20 min均為9982%,30 min殺滅率則為100%;環(huán)糊精包合碘和聚維酮碘均能在10 min內(nèi)殺滅水體大腸桿菌。環(huán)糊精包含碘在效用上與市面流行的產(chǎn)品——聚維酮碘消毒效果相當(dāng),但環(huán)糊精包合碘為水溶性、成本低,所以推定新型殺毒劑環(huán)糊精包合碘水體消毒效果良好。

23 雞舍消毒效果

由表3可知,30 min地面和墻面自然菌殺滅率為7971%和7775%,60 min殺滅率分別為9273%和9358%。可以看出,30 min時(shí)地面自然菌殺滅率較墻面高,可能是由于液體存留地面起到較長(zhǎng)時(shí)間的消毒效果;60 min時(shí)地面自然菌殺滅率反而較低,可能是由于隨著時(shí)間的推移,地面更易受菌落沉降的影響。同時(shí)發(fā)現(xiàn),該新型消毒劑對(duì)空氣也有一定的殺菌作用,30 min和60 min自然菌殺滅率分別為1767%和1164%,但是殺滅效果不理想。

3 結(jié)論與討論

桌面消毒試驗(yàn)用于鑒定消毒劑對(duì)一般物體表面自然菌的殺滅作用,以驗(yàn)證消毒劑的使用劑量。本試驗(yàn)所試環(huán)糊精包合碘1∶ 800倍(W/V)樣品稀釋液,對(duì)木質(zhì)桌面噴灑至濕潤(rùn),消毒作用10 min,對(duì)物體表面自然菌的平均殺滅對(duì)數(shù)值為243,>10,符合2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》的要求。熊鴻燕等(1999)[5]采用交聯(lián)淀粉碘(有效碘含量6393 mg/g)為消毒劑對(duì)自來水進(jìn)行消毒試驗(yàn), 結(jié)果認(rèn)為5 g/L(有效碘含量為每升水3197 mg)作用5~10 min可殺滅自然菌的9973% ~ 9994%。本試驗(yàn)有效碘含量為每升水169 mg,10 min殺滅率達(dá)到9965%,取得了較好的殺菌效果。在雞舍中使用環(huán)糊精包合碘對(duì)墻面和地面進(jìn)行消毒,60 min自然菌殺滅率達(dá)到92%以上。同時(shí)發(fā)現(xiàn),本消毒劑對(duì)空氣自然菌具有一定的殺滅作用,但殺滅作用有限;60 min空氣中細(xì)菌總數(shù)反而多于30 min,推測(cè)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)糞便中的細(xì)菌繼續(xù)擴(kuò)散至空氣中,在下一步試驗(yàn)中需要增加空氣噴霧消毒以達(dá)到消毒效果。參 考 文 獻(xiàn):

[1] Durani P,Leaper DPovidone-iodine: use in hand disinfection, skin preparation and antiseptic irrigation[J]Int Wound J, 2008,5(3): 376-87

[2] Mbithi J N, Springthorpe V S, Satta S A rChemical disinfection of hepatitis a virus on environmental surfaces[J]Appl Envir Microbiol, 1990,56: 3601-3604

[3] Elisabeth P, Miranda S, Michaela E, et al Effects of alcohols, povidone-iodine and hydrogen peroxide on biofilms of Staphylococcus epidermidis[J] J Antimicrob Chemother,2007,60: 417-420

[4] Maenthaisong R, Chaiyakunapruk N, Thamlikitkul V Cost- effectiveness analysis of chlorhexidine gluconate compared with povidone-iodine solution for catheter-site care in Siriraj Hospital, Thailand[J] J Med Assoc Thai, Nov, 2006, 89 Suppl 5: S94-101

[5] 熊鴻燕, 張 凌, 劉育京, 等交聯(lián)淀粉碘的制備及對(duì)水中細(xì)菌殺滅效果的研究[J]中國(guó)消毒學(xué)雜志,1999,16(1):1-6

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