Bax、ki—67在宮頸病變組織中的表達及意義

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Bax是一種促凋亡基因，可以通過激活Caspase信號轉導途徑、破壞ATP合成功能、改變細胞氧化還原反應等機制發揮促凋亡作用。增殖細胞核抗原Ki-67隨著宮頸病變程度的升高而呈上升趨勢，且與腫瘤的發生、發展及預后關系密切。

資料與方法

研究對象：樣本原發性宮頸癌、宮頸上皮內瘤變（CIN）和正常宮頸組織均來自鄭州市第一人民醫院病理科，所有病例均經過病理組織學證明。病例年齡36～71歲，平均49.6歲，按國際婦產科聯盟（FlCO）宮頸癌分期標準進行分期；宮頸鱗癌30例，宮頸上皮內瘤變組90例（其中CINⅠ 30例，CINⅡ 30例，CINⅢ 30例），正常宮頸組20例。所有患者術前均未進行化療和放療。所有標本均經過10%的福爾馬林中性溶液浸泡，常規脫水、透明、侵蠟，然后石蠟包埋。

方法：采用免疫組織化學S.P法.實驗步驟按試劑盒說明書進行。以檸檬酸緩沖液高溫高壓進行抗原修復。DAB顯色，用公司出售陽性切片作陽性對照，以PBS液代替一抗作為陰性對照。

結果判定：Bax及ki-67表達陽性均為細胞漿呈棕黃色或棕褐色顆粒.每例均隨機觀察5個高倍視野（X400）。用半定量積分法判斷結果，陽性細胞<5%為0分。6%～25%為1分，26%～50%為2分，5I%～75%為3分，>75%為4分。陽性強度黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩項積分相乘t0分為陰性（-），1～4分為弱陽性（+），5～8分為中度陽性（++），9～12分為強陽性（+++）。結 果

Bax、ki-67蛋白在宮頸癌新輔助化療前、后的表達：Bax蛋白的陽性表達主要存在于細胞漿內，隨著宮頸病變程度的升高其表達成下降趨勢，新輔助化療后較化療前明顯升高。宮頸癌組0.032±0.003，CIN組0.065±0.016，正常宮頸組0.172±0.023，3組比較（P值均<0.05），見表1。

Ki-67蛋白的陽性表達主要存在于細胞核，呈棕黃色，其在正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變、宮頸癌組織中均有表達，隨著宮頸病變程度的升高其呈上升趨勢。宮頸癌組65.32±0.003，CIN組17.35±0.26，正常宮頸組9.12±0.23，3組比較（P值均<0.05），見表1。

討 論

宮頸病變從CIN到原位癌再到浸潤癌是一個多階段、多步驟的連續過程，歷時5～10年，腫瘤的發生不僅與細胞的過度增殖有關，而且與腫瘤細胞異常凋亡有關。宮頸病變中不僅有癌細胞的過度增殖，而且存在細胞凋亡減少[1]，增值指數及治療前凋亡指數低的患者，癌的復發率較低，生存率較高。多因素分析表明增值指數和凋亡指數是兩個重要的預后因素。

Bax基因位于染色體19q13，屬水溶性蛋白，其蛋白主要位于細胞漿中，當凋亡發生時它從細胞漿轉移到線粒體與線粒體膜結合，再與位于線粒體的bcl-2相互作用而發揮誘導凋亡作用[2]，對細胞凋亡的調控起著重要作用。Bcl-2可以抑制多種組織的細胞凋亡，延長細胞生存而參與腫瘤的發生，是目前公認的抗凋亡基因。本研究表明，Bax蛋白表達在宮頸癌組織中的表達低于CIN組，CIN組低于正常宮頸組，與王曉琴等[3]報道一致。結果提示Bax在正常組織中的高表達可以促進細胞凋亡，不致引起細胞異常增殖從而引發腫瘤的形成。宮頸癌組織的表達下調，細胞增殖不能得到有效控制。細胞凋亡減少，致使腫瘤向惡性轉化。

Ki-67抗原（Ki-67 antigen），簡稱為Ki-67，能識別存在于G0晚期以外的細胞周期核抗原，由于其半衰期短，脫離細胞周期后迅速降解，已成為目前應用最廣泛的增殖細胞標記之一，Ki-67參與細胞周期的調控，理論上可作為診斷和預測腫瘤對治療的敏感度及其結局等方面的標志物，在腫瘤的分級、增生程度、預后的預測中均有一定的意義。本研究表明其表達隨宮頸癌臨床分期的升高而增高，從宮頸炎到上皮內瘤變再到宮頸癌，其表達水平呈逐步上升趨勢，所以ki-67是診斷宮頸病變的一個有效的參考指標。

同時，本研究發現Bax的表達與ki-67的表達存在負相關性，提示腫瘤的發生不單是因為細胞的異常增殖，同時也存在細胞的凋亡受阻，通過檢測組織中兩者的表達不但有利于良惡性病變的區分，并且對放化療及預后具有評估意義。

參考文獻

1 鄭秀惠，陳竹欽，李力，等.252锎中子放療對宮頸癌細胞凋亡及bcl-2、bax的影響[J].第三軍醫大學學報，2005，27（19）：1957-1959.

2 Hocenberg D，Nunez C，Millian C，et al.Bcl 2 is an inner mito-chondrial memberaneproten that blocks programmed cell death.Nature，1990，348，6299：334.

3 王曉琴，戴穹，楊志惠.bcl.2、Ki-67和bax蛋白在官頸上皮內瘤變和宮頸癌中的表達及臨床意義[J].中國醫療前沿，2008，3（2）：27-28.