乳腺浸潤性導管癌臨床病理因素與BRCA1和BRCA2表達的相關性分析

姚江等

摘 要 目的：探討乳腺上皮中BRCA1和BRCA2的表達與乳腺浸潤性導管癌的臨床病理特征的相關性。方法：應用免疫組化S-P法檢測BRCA1、BRCA2在33例乳腺浸潤性導管癌組和31例乳腺良性病變組的表達情況，并聯合ER、PR、CerBb-2的表達，分析它們與乳腺浸潤性導管癌患者的年齡、腫塊大小、分化程度、淋巴結轉移等特征之間的關系。結果：①BRCA1的陽性表達與乳腺浸潤性導管癌患者的年齡、分化程度、是否絕經均有顯著相關性（P<0.05），與淋巴結轉移和腫瘤大小無顯著相關性（P>0.05）。BRCA2的陽性表達與乳腺浸潤性導管癌患者的年齡、淋巴結轉移、腫塊大小、是否絕經均有顯著相關性（P<0.05），與分化程度無顯著相關性（P>0.05）。②BRCA1、BRCA2的表達與CerBb-2的表達均呈顯著的負相關（r=-0.355，-0.517，P<0.05）。結論：BRCA1和BRCA2的突變在乳腺浸潤性導管癌的發生發展密切相關，主要通過轉錄途徑作用于CerBb-2，BRCA1和BRCA聯合CerBb-2可作為評價乳腺癌生物學特性和預后的潛在指標。

關鍵詞 乳腺浸潤性導管癌 BRCA1 BRCA2 免疫組織化學

近年，我國乳腺癌發病情況呈上升趨勢，特別是在一些經濟發達地區和大城市，乳腺癌的發病率已居女性惡性腫瘤的第1位或第2位[1]。本實驗運用免疫組織化學染色法（IHC）S-P法檢測乳腺浸潤性導管癌組織及乳腺良性病變組織中BRCA1、BRCA2的表達，比較BRCA1、BRCA2在兩組之間的差異，并聯合ER、PR、CerBb-2分析它們與乳腺浸潤性導管癌患者的年齡、腫塊大小、分化程度、淋巴結轉移等特征之間的關系。

資料與方法

2005～2009年收治乳腺浸潤性導管癌患者33例，均為漢族女性，年齡37～77歲；所有乳腺癌病例無1級或2級親屬患乳腺癌，術前均未行放療、化療及內分泌治療。乳腺良性病變組織31例（包括纖維腺病、纖維囊性乳腺病、小葉增生病變等），均為漢族女性，年齡26～67歲。

主要試劑及儀器：BRCA1、BRCA2山羊抗人多克隆抗體均，S-P法免疫組化試劑盒，全自動脫水機、染色機、免疫組化儀。

實驗方法：所有標本術后經10%福爾馬林固定，石蠟包埋、制備4μm連續切片，供常規染色及免疫組化染色。BRCA1、BRCA2工作濃度1：200，采用免疫組化S-P法檢測兩組BRCA1、BRCA2的表達，嚴格按照試劑盒說明書進行。所有切片在光學顯微鏡下進行觀察、拍照，由專業病理醫師讀片。

結果判定：陽性染色細胞：染色呈均勻棕黃色顆粒，灶性及散在分布，背景清晰。BRCA1、BRCA2的陽性表達位于細胞核和細胞漿。陽性結果判定標準：BRCA1、BRCA2以細胞核和細胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性表達，陽性細胞數<10%“-”，10%～25%“+”，25%～75%“++”，>75%“+++”。

分析指標：回顧分析33例乳腺浸潤性導管癌患者和31例乳腺良性病變患者的基本臨床資料，包括年齡、腫瘤大小、分化程度、腋淋巴結轉移及腫瘤的臨床分級（參照2003年國際抗癌聯盟（UICC）和美國腫瘤聯合會（AJCC）分期標準）及ER、PR、CerBb-2的表達。分析BRCA1、BRCA2的表達與ER、PR和CerBb-2表達的相關性，以及與腫瘤臨床特征的相關性。

統計學處理：采用SPSS16.0軟件包完成統計學分析，各種構成的比較采用X2檢驗，P<0.05表示明顯具有統計學意義。結 果

BRCA1、BRCA2在乳腺浸潤性導管癌組和乳腺良性病變組的表達：乳腺浸潤性導管癌組和乳腺良性病變組經染色，BRCA1和BRCA2均有特異性的陽性表達；良性病變組織的表達部位主要在細胞核，乳腺浸潤性導管癌組織表達部位不僅限于細胞核，在部分細胞胞漿也有明顯表達。乳腺浸潤性導管癌組BRCA1陽性表達率64.5%，乳腺良性病變組陽性表達率63.6%，兩組間無顯著差異（X2=0.05，df=1，P>0.05）。

乳腺浸潤性導管癌組臨床病理特征與BRCA1、BRCA2表達量的關系，見表1。

乳腺浸潤性導管癌組臨床病理特征與BRCA1、BRCA2陽性表達率的關系，見表2、3。

乳腺浸潤性導管癌組ER、PR、CerBb-2與BRCA1、BRCA2的關系，見表4。

討 論

本研究顯示，BRCA1和BRCA2在乳腺浸潤性導管癌患者組與乳腺良性病變組兩組間的陽性表達率無差異[2，3]，說明BRCA1和BRCA2作為乳腺癌的預測指標是不準確的。BRCA1和BRCA2在表達量與在臨床特征的各指標間無顯著差異，但是乳腺浸潤性導管癌患者BRCA1的陽性表達率在50歲以上年齡的患者癌組織中有較低的表達，并且BRCA1的陽性表達率隨著腫瘤組織的分化程度的增加反而顯著的降低；絕經前后的患者也呈明顯的差異。

BRCA2的陽性表達率在大于50歲年齡的患者癌組織中有較低的表達；在淋巴結未轉移的瘤組織中也有顯著的高表達；隨腫塊體積的增加，BRCA2的陽性表達率顯著性的降低；絕經前也明顯高于絕經后的表達。僅與分化程度無明顯相關性。證明了這兩個基因調控的復雜性和系統性。