不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合對橘小實蠅的捕殺效果

劉建民　董美華　杜迎剛等

摘要：于陽桃園和番石榴園，田間測定了不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合對橘小實蠅的誘捕和誘殺效果。結果表明：在誘捕和誘殺試驗中，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對橘小實蠅的捕殺數量呈逐漸增加趨勢，以25 g/L蛋白、0.09 mol/L硼砂組合最高。通過誘捕和誘殺試驗確定啤酒廢酵母酶解蛋白的最佳田間使用濃度為20～25 g/L，硼砂的添加量為0.06～0.12 mol/L。

關鍵詞：啤酒廢酵母；硼砂；蛋白誘劑；增效作用；橘小實蠅

中圖分類號：Q965.9：Q969.456.8 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2013）08-0110-03

橘小實蠅（Bactrocera dorsalis Hendel），屬雙翅目（Diptera）實蠅科（Tetriphitidae），是柑橘、陽桃、芒果、番石榴等250余種果樹的毀滅性害蟲_[1～3]，蛋白誘殺是一項非常有效的防治措施。杜迎剛等用啤酒廢酵母酶解制備出了在pH 8.5條件下對橘小實蠅具有很好引誘活性的蛋白誘劑_[4，5]。本文對不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合后對橘小實蠅的田間誘捕和誘殺情況進行了研究，旨在為此蛋白的田間使用濃度范圍及增效物質的研究提供依據。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1主要試劑木瓜蛋白酶（BR）：98萬單位（北京雙旋微生物培養基制品廠）；硼砂（AR）：安徽蕭縣化學試劑廠；蛋白誘劑：參照杜迎剛（2007）_[4]方法自制；殺蟲介質：48%的Spinosad（多殺霉素）懸浮劑（美國陶氏益農公司）。

1.1.2儀器設備酸度計：PHS-3B（上海虹益儀器儀表有限公司）；電子天平：BS 124S（德國Sartorius）；移液器：德產Tripette；誘捕器：江蘇常州禾豐生化研究所生產的橘小實蠅專用誘捕器。

1.2試驗方法

1.2.1誘捕試驗于福州武警福建總隊食品生產基地及漳州熱作所分別選擇陽桃和番石榴園作為試驗點。取新制備的啤酒廢酵母酶解蛋白母液，稀釋成不同濃度后加入不同濃度的硼砂溶液制成蛋白誘劑組合（具體組合見表1），以不加硼砂的20 g/L_[1]啤酒廢酵母酶解液為對照。每種誘劑組合重復12次，兩地陽桃園、番石榴園各3次。每個誘捕器加一種供試溶液200 ml，掛于田間樹上高1.5 m陰涼處。隔天統計引誘的雌雄實蠅數量并補水至200 ml，連續觀察記錄2周。

1.2.2誘殺試驗棋盤式取樣，選擇周圍環境和長勢基本一致的株距20 m以上的番石榴28株，分7組。在樹體離地面1.5 m處于葉背面噴硼砂與酶解蛋白誘劑組合50 ml（內加Spinosad 80 mg/L_[1，6]；組合選擇是在1.2.1試驗的基礎上，具體見表2），以不加硼砂的20 g/L蛋白誘劑為對照。每組4株分別噴4個方位，噴灑樹體面積約1.5 m2，每株地面鋪白色布，早晚各觀察清理死蟲1次，記錄1周內引誘的雌雄橘小實蠅數量。

1.2.3數據分析方法數據處理用DPS v3.01統計分析軟件，采用單因子方差分析對試驗數據進行分析，方差檢驗用Duncans新復極差法進行。

2結果與分析

2.1誘捕試驗從表1可以看出，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對橘小實蠅的誘捕數量逐漸增加，以25 g/L蛋白/0.09 mol/L硼砂組合最高，對雌蟲、雄蟲和雌雄總數的誘捕數量分別為3854.0、3805.7、7659.7只，對雌蟲的誘捕數量，與20 g/L蛋白/0.03、0.06、0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.03、0.06、0.12mol/L硼砂組合之間差異不顯著，極顯著高于20 g/L蛋白不加硼砂對照和10、15 g/L蛋白硼砂各組合；對雄蟲和雌雄總數，與20 g/L蛋白/0.06、0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.03、0.06、0.09 mol/L硼砂組合之間差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.03 mol/L硼砂組合差異顯著，與10、15 g/L蛋白硼砂各組合及對照之間差異極顯著。

2.2誘殺試驗從表2可以看出，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對橘小實蠅的誘殺數量逐漸增加，以25 g/L蛋白/0.12 mol/L硼砂組合最高，對雌蟲、雄蟲和雌雄總數的誘殺數量分別為401.8000、387.4000、789.2000只，對雌蟲，與20 g/L蛋白/0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.06、0.09 mol/L硼砂組合差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.06 mol/L硼砂組合間差異顯著，與對照間差異極顯著；對雄蟲和雌雄總數，與20 g/L蛋白/0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.09、0.12 mol/L硼砂組合之間差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.09 mol/L硼砂組合之間差異顯著，與20 g/L蛋白0.06 mol/L硼砂組合及對照之間差異極顯著。

3結論與討論

杜迎剛等_[4，5]研究表明，啤酒廢酵母酶解蛋白在濃度為20 g/L時引誘活性最強，所以本研究以不加硼砂的20 g/L啤酒廢酵母酶解蛋白液為對照，比較不同濃度的酶解蛋白液加硼砂后對橘小實蠅的誘捕和誘殺效果。從表1可以看出，因為硼砂的加入使得15 g/L甚至更低濃度蛋白對橘小實蠅的誘捕效果與20 g/L的相當，這與單獨施用蛋白誘劑相比節省了蛋白資源，但15 g/L劑量組與25 g/L劑量組間存在極顯著差異，這說明要達到更好的田間誘捕效果，蛋白濃度最好高于15 g/L。試驗過程中，所有組合均是對雌性的引誘數量高于雄性，但無顯著差異，雌雄引誘數量的差異與田間橘小實蠅的生態狀態也有很大關系_[1，10]。在橘小實蠅誘捕試驗中，25 g/L蛋白劑量組第1周引誘效果稍差，這與劑量太高導致揮發性物質濃度較高不利于橘小實蠅感應有關，此結果與杜迎剛_[4，5]研究結果一致，第2周開始引誘數量增加；與此相反，10 g/L蛋白劑量組第1周引誘效果較好，第2周開始較差；15 、20 g/L劑量組在試驗周期內引誘效果較平穩。誘殺試驗中，各組合都是隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加誘殺效果增強，這與誘殺是在相對開放的環境中及福州雨季有關，這也是本試驗只觀察1周的原因。通過本研究，進一步精確了啤酒廢酵母酶解蛋白的最佳田間使用濃度范圍（20～25 g/L）和硼砂的添加量（0.06～0.12 mol/L），為該蛋白誘劑產品的開發及施用提供了理論依據。

啤酒廢酵母酶解蛋白誘劑富含氨基酸、多肽、糖類等_[7～9]，是夏季高溫下極易腐敗的物質，此外引誘的實蠅蟲體因分離不及時也會很快腐爛，這些勢必影響到蛋白誘劑的引誘效果。硼砂對啤酒廢酵母酶解蛋白的增效作用可能與硼砂對引起蛋白酶解物及蟲體腐敗變質的微生物的殺滅抑制作用有關，具體機理有待進一步研究。

參考文獻

[1]杜迎剛，陳家驊，季清娥. 一種新型蛋白誘劑對橘小實蠅引誘作用[J].福建林學院學報，2007，27（3）：259-262.

[2]杜迎剛，陳家驊，季清娥. 橘小實蠅個體食量研究[J].福建農林大學學報：自然科學版，2008，37（2）：122-126.

[3]杜迎剛，陳家驊，季清娥，等. 橘小實蠅對蛋白和糖的反應[J].福建農林大學學報：自然科學版，2007，36（4）：357-360.

[4]杜迎剛. 新型橘小實蠅引誘蛋白的研究[D].福建農林大學，2007.

[5]杜迎剛，李云玲，季清娥. 啤酒廢酵母酶解生產橘小實蠅引誘蛋白研究[J].安徽農業科學，2012，40（3）：1479-1480，1482.

[6]Grant T M， Steven L P， Paul G B， et al. Comparative evaluation of spinosad and phloxine B as toxicants in protein baits for suppression of three fruit fly （Diptera： Tephritidae） species[J]. J. Econ. Entomol.， 2005，98（4）：1170-1178.

[7]張麗霞，張麗萍，于文革，等.啤酒酵母多糖的分離純化與初步鑒定[J].安徽農業科學，2010，38（31）：17371-17372.

[8]王睦，金艷，張美碩，等.HPLC檢測啤酒廢酵母細胞中3種糖含量的方法研究[J].現代農業科技，2011，4：348，351.

[9]譚海剛，李靜.從啤酒廢酵母制取氨基酸工藝的研究[J].食品與藥品，2008，10（11）：47-49.

[10]Robacker D C. Specific hunger in Anastrepha ludens （Diptera： Tephritidae）： Effects on attractiveness of proteinaceous and fruit-derived lures[J]. Environ. Entomol.，1991，20：1680-1686.