正交實驗分析三聯退熱藥與黃芩苷對內毒素性發熱家兔退熱作用及最佳退熱組方

段北野,鐘 民,芮家亮,謝海棠,孫瑞元,王冰梅

(1.吉林省腫瘤防治研究所，長春 130012；2.安徽省藥物臨床評價中心，安徽 蕪湖 241001；3.長春中醫藥大學，長春 130117)

對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏三者是經典的退熱復方三聯組合，其比例及藥效已有大量資料支持，且已在臨床上廣泛應用[1-2]。黃芩有效成分為黃芩苷(baiealin)[3]，屬黃酮類，黃芩苷在整體動物實驗方面表現出顯著的解熱作用，且在一定劑量下其作用強度可高于以臨床劑量折算的阿司匹林[4]。目前尚無退熱復方三聯組合聯合黃芩苷應用的相關報道，本實驗應用正交實驗法探討該聯合制劑對發熱家兔的解熱作用及最佳退熱組方。

1 材料與方法

1.1 材料 實驗家兔，由南京青龍山動物養殖中心提供，動物合格證號:SCXK(蘇)2007-0008;內毒素,由廈門螯制劑廠生產，規格為10 u/支，生產批號070201；對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏、黃芩苷(吉林敖東延邊藥業股份有限公司提供)。溫度計由東阿阿膠阿華醫療器械有限公司提供，規格：1000，批準文號：魯藥管械(準)字99第220062號。

1.2 方法

1.2.1 實驗設計與分組 乙酰氨基酚50 mg、咖啡因3.25 mg/kg、馬來酸氯苯那敏0.2 mg/kg，將3藥作為一個單元用“A”表示,按3個劑量進行配比(即1.0、0.84、0.7單元)得出：A1：對乙酰氨基酚50 mg/kg，咖啡因3.25 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.2 mg/kg；A2:對乙酰氨基酚42 mg/kg，咖啡因2.73 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.168 mg/kg；A3:對乙酰氨基酚35 mg/kg，咖啡因2.275 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.14 mg/kg。

將“黃芩苷”作為另一單元，用“B”表示，初始設定人用劑量為36 mg/片，按3個劑量進行配比(即1.9、1.4、1.0單元)得出：B1：黃芩苷6.84 mg/kg，B2:黃芩苷5.04 mg/kg，B3：黃芩苷3.6 mg/kg。

以Al、A2、A3、A0(A0表示組方中沒有A單元)和B1、B2、B3、B0(B0表示組方中沒有B單元)為基礎相互交叉得出16個組方，結果見表1。

表1 各組方詳細情況

1.2.2 實驗模型 本實驗以家兔為致發熱模型對象，以內毒素為造模藥物，按20 u/kg行家兔耳緣靜脈注射，造家兔發熱模型[5]。

1.2.3 實驗步驟 160只家兔，體質量1.8～2.2 kg，雌、雄各半，隨機分16組,每組家兔10只。實驗開始前，用家兔固定架固定后靜置30 min,每隔10 min測量體溫1次，計算每只家兔3次體溫均數即為基礎體溫。從家兔耳緣靜脈按20 u/kg注射內毒素，然后迅速按各組方設置的用藥劑量進行灌胃給藥，給藥后測量并記錄每只家兔用藥后0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8 h肛溫。以溫度計插入家兔肛門6～8 cm處測量3 min為準。

按以上步驟共進行10次實驗，完成本次實驗所有內容，測量各組家兔在不同時間點的肛溫數據。

2 結果

2.1 各實驗組家兔用藥后體溫與基礎體溫差值的AUC變化[6]見表2。

表2 各實驗組家兔用藥后各個時間點體溫與基礎體溫的差值AUC變化(n=10)

2.2 實驗各組家兔用藥后最高點體溫與基礎體溫的差值均數的大小比較[7]見表3。

3 結論

本實驗中，A1B0、A2B0、A3B0 3組即單用對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏三聯組合的退熱藥效，結果呈現量效關系，說明三聯組合的劑量設計是合適的。同時顯示黃芩苷對三聯組合已有協同效應，說明黃芩苷的劑量設計也是有效的。

在實驗各組家兔用藥后各個時間點體溫與基礎體溫的差值變化AUC的比較中，A1B1組和A2B1組用藥后各個時間點體溫與基礎體溫的差值變化AUC明顯小于其他各組，而2組之間比較無統計學意義，但A2B1組的藥物組方的總量小于A1B1組藥物組方；在實驗各組家兔用藥后最高點體溫與基礎體溫的差值均數大小比較中,A1B1、A2Bl、A1B3 3個組溫差變化最小，與其他幾組比較有統計學意義。

表3 實驗各組家兔用藥后最高點體溫與基礎體溫的差值Emax(最大效應)比較(n=10) ℃

綜上所述，在本次以家兔體溫變化為檢測指標的實驗中，A2B1(A2:對乙酰氨基酚42 mg/kg，咖啡因2.73 mg/kg，馬來酸氯苯那敏0.168 mg/kg；B1:黃芩苷6.84 mg/kg)組為最佳組方。

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