UF-1000i全自動尿有形成分分析儀的方法學性能評價

（長江大學荊州臨床醫學院 荊州市中心醫院檢驗醫學部，湖北 荊州434020）

UF-1000i全自動尿有形成分分析儀，是對尿有形成分做熒光色素染色后，利用流式細胞學原理來識別和計數尿中紅細胞(RBC）、白細胞(WBC）、管型(CAST）、上皮細胞(EC）、細菌(BACT）、結晶(X，TAL）、精子(SPERM）及酵母菌(YLC）。它可以為臨床診治泌尿生殖系統疾病及全身相關疾病提供重要的信息[1]。在UF-1000i投入使用前，應對其分析系統進行性能驗證，如果達到制造商規定的性能要求方可使用[2]。根據ISO15189：2007醫學實驗室認可準則的要求，我室通過對RBC、WBC、CAST、EC和BACT等5個定量參數的批內精密度、日間精密度、正確度、攜帶污染率和線性范圍來驗證該儀器的性能。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex UF-1000i全自動尿有形成分分析儀，配套原裝試劑和質控物。

1.2 方法

1.2.1 批內精密度 收集患者新鮮尿液標本，RBC、WBC、CAST、EC和BACT各項參數選取低、高兩個濃度的標本在UF1000i尿有形成分分析儀上重復檢測11次，去掉第1次測試的結果，用余下的10次分別計算變異系數CV值。

1.2.2 日間精密度 使用兩個水平的尿液有形成分質控物在UF1000i尿有形成分分析儀上連續檢測20d，統計所有檢測結果的均值、標準差SD和CV值。

1.2.3 正確度評估 由廠商組織，以ISO15189認證實驗室(同濟醫院檢驗科）經過校準性能穩定的儀器為基準儀器，以我室使用的UF1000i尿有形成分分析儀為比對儀器，使用同批號兩個水平的尿液有形成分質控物分別在基準儀器和比對儀器上連續檢測5次，計算比對儀器與基準儀器檢測結果均值的偏差(%），以此偏差評估我室UF1000i尿有形成分分析儀的測量正確度。

1.2.4 攜帶污染率測試 該測試用以測試儀器檢測結果的攜帶污染率，從而評價儀器的自清洗效率。取1份RBC與BACT高值尿樣，連續檢測3次，結果為H1、H2、H3。然后立即取1份RBC與BACT低值尿樣連續檢測3次，結果為L1、L2、L3，按下列公式計算攜帶污染率，判斷是否滿足儀器攜帶污染率的要求(RBC：≤0.1%或≤5.0／μl，BACT：≤0.05%或≤5.0／μl）。

1.2.5 線性驗證 選取接近預期上限的高值尿液樣本，分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例用鞘液進行稀釋，每個稀釋度重復測定2次，計算均值。將實測值與理論值作比較(偏離應滿足RBC≤10%，WBC≤10%，EC≤30%，BACT≤20%），計算a（斜率）、b（截距）值，得出y＝ax＋b，驗證線性范圍。要求：a值在(1±0.05）范圍內，相關系數r≥0.975。

1.2.6 生物參考區間驗證 分別選取20位男女健康者，其檢測結果至少90%在擬定的參考區間內，說明實驗室使用的參考區間有效。

1.3 統計學分析

采用SPSS13.0軟件進行回歸、線性分析。

2 結 果

2.1 批內精密度

UF1000i尿有形成分分析儀批內精密度測試結果及統計分析見表1。

表1 批內精密度測試結果（n＝10）

2.2 日間精密度

UF1000i尿有形成分分析儀日間精密度測試結果及統計分析見表2。

表2 日間精密度測試結果（n＝20）

2.3 正確度評估

UF1000i尿有形成分分析儀正確度評估結果及統計分析見表3、4。

表3 低值比對結果及統計分析（n＝5）

表4 高值比對結果及統計分析（n＝5）

2.4 攜帶污染率測試

UF1000i尿有形成分分析儀攜帶污染率測試結果及統計分析見表5。

表5 攜帶污染率測試結果及統計分析

2.5 線性驗證

UF1000i尿有形成分分析儀線性驗證結果見表6～9，圖1～4。

表6 RBC線性驗證測試結果

圖1 RBC線性圖

表7 WBC線性驗證測試結果

圖2 WBC線性圖

表8 EC線性驗證測試結果

圖3 EC線性圖

表9 BACT線性驗證測試結果

圖4 BACT線性圖

2.6 生物參考區間驗證

UF1000i尿有形成分分析儀生物參考區間驗證結果見表10。

表10 生物參考區間驗證結果（n＝20）

3 討 論

UF-1000i全自動尿有形成分分析儀使用流式細胞計數法(FCM）技術來獲得尿細胞前向散射光及前向熒光的強度參數[3]。在對細胞中的特定物質進行熒光染色并調節到懸浮狀后，在鞘液的包圍和約束下，細胞排成單列高速由流動室噴嘴噴出，形成細胞液柱。當液柱通過檢測區在入射的激光束照射下產生前向散射光和側向散射光，它們分別反映細胞大小和顆粒信息，根據這些特性可以將細胞分類，從而定量顯示尿紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型和細菌等。這些指標正是診斷泌尿系疾病，特別是腎臟疾病的重要實驗指標之一[4]。

本實驗結果表明，儀器的批內精密度、日間精密度、正確度、攜帶污染率和線性范圍均符合廠商和質控品要求。在批內精密度方面，選取的11次重復測定結果去掉第1次，可以將攜帶污染率降到最低，同時也避免了隨機誤差的產生。在日間精密度方面，由于尿液的穩定性很差，故用質控品來代替連續行20d的檢測。從表1和表2可以看出，無論是低濃度樣本還是高濃度樣本，各項指標的CV值都比要求的低很多，說明儀器的重復性非常好。至于正確度方面，我室利用了外院校準性能穩定的儀器作為基準儀器進行比對的方法，其偏差均遠小于偏差要求。攜帶污染率是儀器性能評價中不可避免的評價指標，尤其是在檢測泌尿生殖系統疾病的標本時，攜帶污染率已成為影響測定結果的因素之一。表5中紅細胞和細菌的攜帶污染率均符合儀器說明書的要求。我室還對各項參數的線性范圍進行驗證。由于接近預期上限的高值尿液樣本很難獲得，故將尿液樣本中加入適量的抗凝血作為紅細胞和白細胞高值樣本，加入適量的移行上皮細胞和扁平上皮細胞作為上皮細胞高值樣本，加入適量的大腸埃希菌和葡萄球菌(泌尿系統感染的主要病原菌）作為細菌高值樣本[5]。從表6～表9和圖1～圖4看出，各項參數的相關系數r均在0.99～1之間，它們在各自的范圍內呈線性關系。本實驗室曾調查過荊州地區1860名健康人群[6]，并建立了自己的生物參考區間(見表10），然后根據NCCLS C28-A2文件推薦的方法進行驗證，此次驗證各項參數均在擬定的生物參考區間內。

綜上所述，我室UF-1000i全自動尿有形成分分析儀精密度好，正確度高，攜帶污染率低，線性范圍廣，各項性能均符合儀器要求范圍，可應用于臨床。

[1]李巖，王會平，李斌，等 .UF-1000i全自動尿液沉渣分析儀的紅細胞攜帶污染實驗及分析 [J].現代檢驗醫學雜志，2011，26（5）：131-133.

[2]中國合格評定國家認可委員會 .醫學實驗室質量和能力認可準則在體液學檢驗領域的指南 [S].CNAS-GL20，CNAS，2008.

[3]杭建峰，孫朝暉，石玉玲，等 .Sysmex UF-1000i自動尿沉渣分析儀的性能分析及臨床應用 [J].檢驗醫學，2011，26（2）：108-110.

[4]王延群，公衍文.UF-1000i尿液有形成分分析儀、干化學法和鏡檢法對尿液分析的比較 [J].檢驗醫學，2011，26（12）：858-860.

[5]黃震，遲秀文，束振華，等 .UF-1000i臨床檢測性能評價及復檢條件探討 [J].現代檢驗醫學雜志，2011，26（1）：76-78.

[6]張娟安，李承彬，王昌富，等 .UF-1000i尿液分析儀有形成分生物參考區間的調查 [J].現代檢驗醫學雜志，2011，26（1）：130-131.