槐果堿注射液的I期臨床耐受性研究

苗紅 葉龍彬 沈金芳 孫黎

（1.上海醫藥集團股份有限公司中央研究院 上海 201203；2.上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院 上海 200001）

槐果堿注射液為中藥注射劑，其活性成分槐果堿（sophocarpine）是從豆科槐屬植物苦參的干燥根及豆科槐屬植物苦豆子的種子中分離提取出的有效生物堿之一。本品在體內外試驗中，均顯示對柯薩奇B組病毒具有明顯的抑制作用，能對抗心律失常和調節免疫，改善心功能[1-2]。槐果堿注射液的擬臨床適應證為急性成人型病毒性心肌炎的治療。本研究為槐果堿注射液的I期臨床研究，旨在考察槐果堿注射液在健康志愿者中的安全性和耐受性，為制定II期臨床試驗給藥方案提供依據。

1 對象與方法

1.1 受試者選擇

1)入選標準：①年齡19～45歲，男女各半，身高體重指數為18～25；②無心、肝、腎、消化道、神經系統、精神異常及代謝異常等病史；③經全面體格檢查顯示心電圖、生命體征以及實驗室檢查均無異常；④自愿簽署知情同意書。

2)排除標準：①妊娠期、哺乳期婦女；②明確的過敏性病史，對槐果堿注射液中各成分過敏者；③有神經精神、心血管、肝臟、腎臟、血液學、代謝等系統的明確病史或其它顯著疾病；④實驗室檢查結果異常且有臨床意義者；⑤習慣性用藥，包括中草藥或入院前兩周內服用過可能影響試驗結果的藥物者；⑥試驗前2個月內失血或獻血超過200 ml者；⑦試驗前2個月內參加過其他臨床試驗者；⑧嗜煙、嗜酒和藥物濫用者；⑨乙肝HBV或者丙肝HCV陽性者。

3)終止試驗標準[3]：①在劑量遞增過程中出現了嚴重不良反應；②半數受試者(如3/6)出現輕度不良反應；③在達到最大劑量8 mg/kg時，雖未出現不良反應，亦應終止試驗。

1.2 研究方法

1.2.1 試驗藥物

槐果堿注射液，規格：200 mg/2 ml，批號：080402，由上海醫藥集團股份有限公司提供。

1.2.2 給藥方法

將相應劑量的藥物加于5%葡萄糖注射液500 ml內靜脈滴注，滴速40～45滴/min，4 h滴注完畢，qd。單次給藥劑量組共1 d，多次給藥劑量組連續7 d。

1.2.3 試驗設計

本研究采用開放性、劑量遞增試驗設計，試驗方案獲得上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院醫學倫理委員會的批準。

1）單次給藥耐受性試驗——

根據槐果堿注射液前期動物毒性試驗結果及美國FDA建議的臨床試驗起始劑量的計算方法，本研究起始劑量定為0.4 mg/kg。劑量遞增參照費氏遞增法（改良Fibonacci法），試驗設置9個劑量組（表1）。

表1 單次給藥試驗劑量遞增方案

2）多次給藥耐受性試驗——

多次給藥耐受性試驗在單次給藥耐受性試驗結束后進行，預做2個劑量組。第1組劑量為單次給藥耐受性試驗最大耐受量的基礎上下降1個劑量，如試驗中出現明顯的不良反應，則再下降1個劑量進行第2組試驗；如試驗中未見明顯的不良反應，則上升1個劑量進行第2組試驗。

1.3 觀察指標

1)單次給藥：給藥前和給藥后1、4、5、12、24 h進行心電圖和生命體征（血壓、心率、呼吸和體溫）檢查；給藥前和給藥后5、12、24 h進行實驗室檢查（包括血、尿常規和血液生化等）。

2)多次給藥：每次給藥前、給藥后24 h進行心電圖和生命體征（血壓、心率、呼吸和體溫）檢查；第1次給藥前、第4次給藥后及最后一次給藥后24 h進行實驗室檢查（包括血、尿常規和血液生化等）；給藥前及最后一次給藥后24 h，男性受試者進行精液常規檢查。

1.4 不良事件觀察

給藥后隨時觀察和記錄發生的不良事件。根據臨床前研究資料，本試驗中重點觀測：神經系統表現（如頭昏、驚厥）、心血管系統表現以及局部刺激，如試驗過程中出現過敏、休克、呼吸循環衰竭等，按相應的搶救方法進行治療。藥物與不良事件間相關性分析，根據肯定有關、很可能有關、可能有關、可能無關、肯定無關進行逐一判斷。

1.5 數據分析

采用SAS 8.2軟件對數據進行統計分析。各組計量指標用（均數±標準差）表示。各組組內前后比較用配對t檢驗，對各劑量組給藥前組間比較及前后差值組間比較采用方差分析。

2 結果

2.1 單次給藥耐受性試驗

共42名受試者完成了0.4、0.8、1.5、2.5、4、5、6、7、8 mg/kg共9個劑量組的單次給藥耐受性試驗。各組受試者的年齡、身高、體重、BMI等資料相近，各指標組間的差異均無統計學意義（P＞0.05）。給藥前各生命體征和實驗室檢查指標基本都在正常范圍內。試驗過程中發生3例不良事件：2.5 mg/kg劑量組有1例白細胞增多，程度為輕度，未采取措施，無合并用藥和合并治療，繼續試驗，判斷與試驗用藥的關系為很可能有關；7 mg/kg劑量組有2例尿酸升高，程度為輕度，未采取措施，無合并用藥和合并治療，繼續試驗，判斷與試驗用藥的關系為可能有關。其余受試者的生命體征（體溫、心率、血壓、呼吸）、心電圖、血尿常規、肝腎功能等各項檢查未見有臨床意義的改變。各組均未發生嚴重不良事件。

2.2 多次給藥耐受性試驗

有17名受試者參加了7和8 mg/kg兩個劑量組的多次給藥耐受性試驗，15人完成試驗（其中7 mg/kg組完成7例，8 mg/kg組完成8例），退出2例。受試者的一般資料及基礎數據各組間的差異均無統計學意義（P＞0.05）。給藥前各生命體征和實驗室檢查指標基本都在正常范圍內。試驗過程中發生2例不良事件：7 mg/kg劑量組有1例白細胞減少，程度為輕度，未采取措施，無合并用藥和合并治療，繼續試驗，與試驗用藥的關系為可能有關；8 mg/kg劑量組有1例精液檢查異常，程度為輕度，未采取措施，由于受試者的個人原因，沒能繼續隨訪至正常值。研究者判斷該不良事件和試驗藥物可能無關。其余受試者的生命體征（體溫、心率、血壓、呼吸）、心電圖、血尿常規、肝腎功能等各項檢查未見有臨床意義的改變。未出現嚴重不良事件。

3 討論

槐果堿注射液曾經作為院內制劑用于病毒性心肌炎的治療，據報道其臨床給藥劑量為5～6 mg/kg，總有效率為93.73% ，未見肝腎功能及血液系統有損傷，少數患者出現惡心和蕁麻疹[2]。在本次槐果堿注射液的人體耐受性研究過程中，觀察到與試驗藥物可能有關的不良事件主要為：白細胞增多（1例），血尿酸升高（2例），白細胞減少（1例），程度均為輕度，未采取措施，無合并用藥和合并治療，屬一過性。未發生試驗方案中重點觀測的不良反應，如神經系統表現（頭昏、驚厥）、心血管系統表現以及局部刺激等，也未觀察到文獻報道的不良反應。一方面這可能是藥品本身制備工藝的改進，使得藥物的純度明顯提高，減少了有關物質的不良反應[4-5]。另一方面還與試驗過程中嚴格控制靜脈滴注速度有關。事實上，臨床前通過Beagle犬的急性毒性試驗已經表明，降低滴速可以大幅提高槐果堿注射液的最大耐受劑量。本研究表明中國健康志愿者單次靜脈滴注0.4～8 mg/kg的槐果堿注射液，連續7 d靜脈滴注7～8 mg/kg槐果堿注射液是安全的，且人體可以耐受。因此，推薦II期臨床試驗的擬用劑量為4～8 mg/kg，須嚴格控制靜脈滴速。

參考文獻

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[2] 陳曙霞, 陳美芳, 錢富榮, 等. 槐果堿注射液治療病毒性心肌炎的臨床研究[J]. 臨床心血管病雜志, 2005, 21(10):608-611.

[3] 蔣萌, 熊寧寧, 劉芳, 等. 中藥靜脈滴注用藥的人體耐受性試驗設計[J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2008, 19(5): 401-403.

[4] 劉梅, 劉雪英, 程建峰. 苦參堿的藥理研究進展[J]. 中國中藥雜志, 2003, 28(9) : 801-804.

[5] 劉國卿, 袁惠南, 謝林, 等. 槐果堿等苦豆子生物堿對大鼠單胺代謝及多巴胺和5-羥色胺受體的作用[J]. 藥學學報, 1987, 22(9): 645-649.