枯草芽孢桿菌在對蝦生產(chǎn)中的應(yīng)用

許合金，馮 幼，劉 定，陳子騰，許進奉

（湛江東騰飼料有限公司，廣東 湛江 524025）

品種選育、遺傳力提高以及養(yǎng)殖方式的改進促進了對蝦產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模以及產(chǎn)量均得到了極大地提高，使對蝦產(chǎn)業(yè)迅速成為我國漁業(yè)經(jīng)濟的主要支柱產(chǎn)業(yè)。然而在集約化養(yǎng)殖過程中，由于高密度、水質(zhì)交換差以及環(huán)境因素不穩(wěn)定等原因?qū)е聦ξr生長緩慢且病害頻發(fā)。為提高生長速度、防治疾病，大量抗生素及其他違禁藥物被廣泛應(yīng)用，從而引起細菌抗藥性及藥物殘留等問題，嚴重制約了對蝦產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。為解決養(yǎng)殖病害和食品安全等諸多矛盾，尋找新的綠色環(huán)保抗生素替代品成為目前大家關(guān)注的焦點。

益生素由于可通過改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境，提高養(yǎng)殖動物的免疫力，抑制病原微生物，同時還可提高飼料利用率等特點而引起大家的重視。枯草芽孢桿菌因具有無毒副作用、無殘留污染、不產(chǎn)生耐藥性且可部分替代抗生素等優(yōu)點而被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)，在畜禽養(yǎng)殖方面多有報道。枯草芽孢桿菌目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面也被廣泛使用，其中在虹鱒、大馬哈魚、鯉魚和斑節(jié)對蝦等水產(chǎn)動物養(yǎng)殖方面都取得了一定效果。枯草芽孢桿菌添加到對蝦日糧中，可以提高飼料利用率，改善生產(chǎn)性能，調(diào)節(jié)機體的腸道機能、增強免疫機能等作用。

1 枯草芽孢桿菌特征

芽孢桿菌是人類發(fā)現(xiàn)最早的細菌之一。從生物學(xué)特性來講，枯草芽孢桿菌具有典型的芽孢桿菌特征，其細胞呈直桿狀，大小為（0.8～1.2）μm×（1.5～4.0）μm，革蘭氏染色呈陽性，著色均勻，可產(chǎn)莢膜、運動（周生鞭毛）；芽胞中生或近中生，≤細胞寬，呈橢圓至圓柱狀；菌落粗糙、不透明、擴張、污白色或微帶黃色，能液化明膠，胨化牛奶，還原硝酸鹽，水解淀粉，為典型好氧菌[1]。另外，枯草芽孢桿菌還能夠產(chǎn)生蛋白酶、α-淀粉酶、纖維素酶、β-葡聚糖酶、植酸酶、果膠酶和木聚糖酶等，且芽孢桿菌在顆粒料、粉料的加工過程中以及在通過酸性和堿性環(huán)境的過程中具有較高的穩(wěn)定性，在腸道中發(fā)揮作用而不過度增殖[2]。芽孢桿菌還能利用葡萄糖產(chǎn)酸，pH 2.2～7.0 有較高的存活率，能抵抗多種抗生素，是優(yōu)良的益生菌[3]。

2 枯草芽孢桿菌在對蝦生產(chǎn)中應(yīng)用

2.1 提高飼料利用率，改善生產(chǎn)性能

王玲等分別在日糧中添加枯草芽孢桿菌600和1200 mg·kg-1，研究其對凡納濱對蝦生長性能影響，結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌600和1200 mg·kg-1組對蝦增重率分別較對照組顯著提高9.08%（P＜0.05）和8.53%（P＜0.05），在整個試驗過程中，枯草芽孢桿菌組對蝦餌料系數(shù)也均顯著低于對照組（P＜0.05）[4]。張博等報道，在日糧中添加枯草芽孢桿菌0.01%和0.03%，凡納濱對蝦增重率分別較對照組提高了18.71%（P＜0.05）和9.36%（P＜0.05），同時特定生長率也分別較對照組提高了9.73%（P＜0.05）和5.31%（P＜0.05）[5]。朱學(xué)芝等試驗結(jié)果表明，微生態(tài)制劑添加到飼料中或直接添加到水中都能促進對蝦的生長，降低餌料系數(shù)（P＜0.05），添加到水中比添加到飼料中效果更顯著[6]。

沈文英等研究也證實，日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.01%和0.05%能夠顯著提高南美白對蝦增重率（P＜0.05）[7]。枯草芽孢桿菌的促生長作用，可能跟消化酶分泌、提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率有關(guān)。於葉兵分別在日糧中添加枯草芽孢桿菌1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 g·kg-1，觀察其對斑節(jié)對蝦消化酶活性影響，結(jié)果顯示，在試驗第5 周，芽孢桿菌1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 g·kg-1組對蝦肝蛋白酶活性分別較對照組提高12.49%（P＜0.05）、11.08%（P＜0.05）、16.72%、26.79%（P＜0.05）和16.62%（P＜0.05）[8]。丁賢等報道，在日糧中添加枯草芽孢桿菌可顯著提高凡納濱對蝦的蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶活性（P＜0.05）[9]。Lin等發(fā)現(xiàn)，在凡納濱對蝦日糧中添加枯草芽孢桿菌可提高對蝦對飼料的消化率[10]。於葉兵在斑節(jié)對蝦日糧中添加不同劑量的枯草芽孢桿菌，結(jié)果表明，添加枯草芽孢桿菌3.0 g·kg-1能夠顯著提高斑節(jié)對蝦對日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、氨基酸和磷的表觀消化率（P＜0.05）[8]。這與張博等研究結(jié)果一致[5]。

2.2 調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡

描述微生物群落多樣性的指數(shù)主要有Shannon指數(shù)、Simpson 指數(shù)和McIntosh 指數(shù)。李卓佳等分析比較了施用枯草芽孢桿菌和沒有施用任何有益菌的蝦池在養(yǎng)殖后期凡納濱對蝦腸道微生物菌落的結(jié)構(gòu)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌組對蝦腸道中可培養(yǎng)細菌數(shù)量較對照組少，但微生物群落Shannon 指數(shù)、Simpson 指數(shù)和McIntosh 指數(shù)及其微生物群落代謝功能均顯著高于對照組（P＜0.05）[11]。研究表明，枯草芽孢桿菌能抑制斑節(jié)對蝦哈維氏弧菌的生長，降低腸道弧菌數(shù)，顯著提高哈維氏弧菌侵染攻毒后的成活率（P＜0.05）[12-14]。胡毅等研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加枯草芽孢桿菌1 g·kg-1可降低凡納濱對蝦腸道細菌總數(shù)和弧菌總數(shù)，同時還使對蝦糞便中細菌總數(shù)和弧菌總數(shù)分別顯著下降16.69%和19.11%（P＜0.05）[15]。

2.3 增強免疫機能

栗雄高等研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加枯草芽孢桿菌0.2%，凡納濱對蝦血清中酚氧化酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶分別較對照組提高39.32%（P＜0.05）、44.54%（P＜0.05）和67.66%（P＜0.05），攻毒試驗表明，感染溶藻弧菌后，枯草芽孢桿菌組對蝦第1、3、4 天的累積死亡率均顯著低于對照組（P＜0.05），第4 天的免疫保護率達到27.1%（P＜0.05）[16]。陸家昌等研究顯示，在水體中使用了枯草芽孢桿菌可使對蝦堿性磷酸酶、過氧化物酶、酚氧化酶、超氧化物歧化酶、抗菌和溶菌活力分別較對照組提高367%、164%、45%、306%、257%和114%[17]。胡毅等在日糧中添加枯草芽孢桿菌1 g·kg-1，觀察其對凡納濱對蝦免疫指標影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌組對蝦血清酚氧化酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶和總抗氧化力分別較對照組提高116.92%（P＜0.05）、30.77%（P＜0.05）、3.21%（P＞0.05）和115.61%（P＜0.05）[15]。與沈文英等研究結(jié)果相一致[7]。朱學(xué)芝等報道，在凡納濱對蝦日糧中添加枯草芽孢桿菌可顯著提高對蝦血清的堿性磷酸酶活力，且降低了溶藻弧菌攻毒后的死亡率（P＜0.05）[18]。

2.4 改善養(yǎng)殖環(huán)境

水質(zhì)的惡化是影響對蝦存活率和產(chǎn)量的主要障礙。在養(yǎng)殖過程中尤其是養(yǎng)殖后期產(chǎn)生的殘餌、動植物的殘體及其代謝排泄物累積下來會產(chǎn)生許多有毒有害物質(zhì)，滋生大量病原菌，嚴重影響對蝦正常生長。枯草芽孢桿菌除了可添加在日糧中供對蝦采食以外，還可直接加入水體，改善蝦池的水環(huán)境。陸家昌等研究了在對蝦養(yǎng)殖過程中，不同濃度枯草芽孢桿菌對養(yǎng)殖水質(zhì)環(huán)境的影響，結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌能顯著降低水體中化學(xué)需氧量（COD）和氨氮（NH3-N）含量（P＜0.05），抑制亞硝酸氮（NO2-N）產(chǎn)生；當枯草芽孢桿菌投放濃度為1.25×104cfu·mL-1時，水體中COD、NH3-N和NO2-N 含量分別較對照組降低65.30%（P＜0.05）、59.70%（P＜0.05）和88.64%（P＜0.05）[17]。朱學(xué)芝等報道，使用枯草芽孢桿菌制劑后，蝦池水體中pH、氨氮和亞硝酸鹽含量與對照組相比有降低的趨勢（P＞0.05），其中pH和亞硝酸鹽含量在試驗后期有顯著性差異（P＜0.05）[6]。通過對施用枯草芽孢桿菌制劑后蝦池底泥細菌群落變化的研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌制劑改變了蝦池底泥細菌類群組成，增加了底泥好養(yǎng)細菌的數(shù)量，優(yōu)勢菌屬發(fā)生了變化，黃桿菌屬和粘纖維菌屬數(shù)量增加，而弧菌和發(fā)光細菌數(shù)量減少[19]。Thimmalapura等報道，向蝦池中投入枯草芽孢桿菌制劑能夠增加沉積物中好氧菌數(shù)量，抑制弧菌數(shù)量，加快了有機物的分解，凈化蝦池水環(huán)境，提高了對蝦產(chǎn)量[20]。

3 小 結(jié)

在對蝦日糧中添加枯草芽孢桿菌可通過凈化養(yǎng)殖水質(zhì)環(huán)境，調(diào)解腸道微生態(tài)區(qū)系平衡，提高對蝦對飼料的消化能力，保持對蝦機體的健康，提高機體免疫力，促進對蝦生長。雖然在對蝦生產(chǎn)中使用枯草芽孢桿菌在表觀指標方面表現(xiàn)出較大的應(yīng)用潛力，但目前有關(guān)枯草芽孢桿菌在對蝦日糧中的添加方法及適宜添加劑量等方面報道不一，對能發(fā)揮功效且符合經(jīng)濟效益的適宜添加劑量還有待于進一步研究。另外，枯草芽孢桿菌作為單一菌種，有其自身的局限性，應(yīng)注意與其他益生菌、中草藥、寡糖及酶制劑等配合使用，做到優(yōu)勢互補，對機體內(nèi)、外微環(huán)境進行整體調(diào)節(jié)。

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