血清蛋白電泳和免疫固定電泳在多發(fā)性骨髓瘤中的應(yīng)用分析

王育芳，王佳麗，馬順高（云南省大理州人民醫(yī)院檢驗科 671000）

多發(fā)性骨髓瘤（MM）又名漿細(xì)胞骨髓瘤，是以克隆性惡性 漿細(xì)胞（骨髓瘤細(xì)胞）在骨髓中異常增殖，并伴有單克隆免疫球蛋白（即M蛋白）增多為特征的疾病［1］。M蛋白的檢測及分型對MM的早期診斷、鑒別診斷、分類以及判斷預(yù)后就顯得尤為重要。本文對本院自2007年以來的49例多發(fā)性骨髓瘤患者的血清蛋白電泳和免疫固定電泳結(jié)果進行分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2007年1月至2012年6月本院共收集符合MM診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］的49例 MM患者，其中男26例，女23例，年齡30～82歲，中位年齡56歲，進行血清蛋白電泳和免疫固定電泳檢測。

1.2 方法 血清蛋白電泳、血清免疫固定電泳、尿本周蛋白電泳：使用法國Sebia HYDRASYS全自動電泳儀上進行電泳分離、染色、脫色和干燥等步驟，然后用光密度掃描儀掃描凝膠片，用Sebia EPSON公司配套軟件分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包，χ2檢驗進行統(tǒng)計分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 血清蛋白電泳結(jié)果 49例MM血清蛋白電泳31例檢出M帶，8例M蛋白分布在β區(qū)帶，23例M蛋白分布在γ區(qū)帶，其余18例出現(xiàn)極不明顯的或不出現(xiàn)M帶，診斷率為63.3%。見圖1。

圖1 MM血清蛋白電泳圖譜

2.2 49例MM血清免疫固定電泳分析結(jié)果 49例MM經(jīng)免疫固定后，有47例均可見與對應(yīng)抗血清形成單克隆條帶，各型均呈現(xiàn)明顯濃集的濃染帶，見圖2。其中有18例經(jīng)SPE電泳后出現(xiàn)不明顯條帶或不出現(xiàn)條帶的標(biāo)本經(jīng)血清免疫固定電泳分析，8例為重鏈型，2例為輕鏈型，1例IgA型，其余為未分泌型。進一步分析結(jié)果顯示，49例MM中，IgG型29例（59%），為最多。在IgG型中，κ型13例，λ型16例；IgA型8例次之，在IgA型中，κ型3例，λ型5例；IgM型較少，僅1例，為λ型，見表1。同時在49例MM中，有21例MM經(jīng)本周蛋白免疫固定電泳后呈現(xiàn)明顯濃集的濃染帶。尿本周蛋白檢出陽性率為42.8%。

表1 49例MM血清免疫固定電泳分析結(jié)果

2.3 血清蛋白、血清免疫固定以及尿本周蛋白電泳3種方法比較 對2007年以來的49例MM患者血清或尿液標(biāo)本分別用血清蛋白、血清免疫固定以及尿本周蛋白電泳3種方法進行檢測，結(jié)果顯示，3種方法檢測結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2＝33.85，P＜0.01）。見表2。

圖2 MM血清免疫固定電泳圖譜

表2 49例MM血清蛋白電泳、血清免疫固定以及尿本周蛋白電泳分析結(jié)果

3 討 論

MM是一種單克隆漿細(xì)胞異常增殖的惡性腫瘤，異常漿細(xì)胞浸潤骨髓和軟組織產(chǎn)生M蛋白［1］，并以單克隆免疫球蛋白增高為特征，由于惡性增生的漿細(xì)胞浸潤骨髓，導(dǎo)致溶骨性病變，劇烈骨痛，病理性骨折，又因瘤細(xì)胞侵犯多個臟器，臨床表現(xiàn)形式多樣化，臨床易發(fā)生誤診和漏診，誤診率高［2］。本文許多病例未有骨痛、病理性骨折，絕大多數(shù)病例臨床癥狀不典型。MM患者有明顯的年齡指征，多見于中老年人，青壯年少見或罕見，該病近年來有逐漸增加趨勢。以往MM患者只有做骨髓細(xì)胞學(xué)檢查才能診斷，但因骨髓常出現(xiàn)干抽，稀釋，灶性分布或骨髓纖維化而致漏診［3］。本文對2007年以來的49例MM患者血清或尿液標(biāo)本分別用血清蛋白、血清免疫固定以及尿本周蛋白3種電泳方法進行檢測，血清免疫固定電泳和血清蛋白電泳檢測出陽性率較高，檢出陽性率分別為95.91%和63.30%，表明血清蛋白電泳和免疫固定電泳是MM的診斷和鑒別診斷的重要檢查方法，為MM疾病的早期診斷提供及時、準(zhǔn)確的實驗室依據(jù)。

血清蛋白電泳是分離蛋白質(zhì)最簡單的方法之一，可以獲得有關(guān)血漿蛋白質(zhì)全貌的圖譜，并對血清中異常蛋白質(zhì)進行篩選［4］。本文采用sebia全自動電泳系統(tǒng)對49例MM患者進行血清蛋白電泳，在β或γ區(qū)發(fā)現(xiàn)一單克隆帶，經(jīng)掃描顯示基底窄、波峰高而尖的典型M蛋白特征。結(jié)果出現(xiàn)蛋白帶的陽性率為63.3%，血清蛋白電泳不是確診試驗，但是它具有結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好、分辨率高的優(yōu)點，可清晰地將各蛋白區(qū)帶顯示出來，觀察電泳特征性圖譜及測定值較全面，直觀地反映蛋白質(zhì)的分離程度和各種變化，可為多種疾病如MM、肝硬化和惡性腫瘤等疾病提供準(zhǔn)確、可靠的診斷依據(jù)及其治療都有一定的意義。

免疫固定電泳技術(shù)是目前最廣泛地用于鑒別M蛋白的方法之一，有文獻報道90%以上的MM患者血清及尿中可檢測到M蛋白，是MM的重要診斷指標(biāo)之一［5－6］。本文中血清蛋白電泳的檢出率63.3%，免疫固定電泳檢出率達95.91%，免疫固定電泳檢出率明顯高于血清蛋白電泳，而且通過免疫固定電泳還可以直接判斷M蛋白類型。不同的免疫球蛋白類型會出現(xiàn)不盡相同的臨床結(jié)果，如IgG型極易誘發(fā)感染；IgA型MM易聚集成多聚體而引起高黏滯血癥，易引起高鈣血癥和高膽固醇癥；IgM型 MM發(fā)病年齡相對較年輕，易見髓外浸潤，骨質(zhì)硬化等；輕鏈型MM由于瘤細(xì)胞合成的異常免疫球蛋白重鏈比例失衡，過多的輕鏈分泌，而輕鏈分泌又很小，可通過腎小球，沉積于腎小管上皮細(xì)胞，使之變性，造成腎功能損害，其中又以μ鏈引起的腎功能損害最為多見。有文獻報道IgA型和輕鏈型預(yù)后較差［6］，所以免疫固定電泳通過對 M蛋白的分型，對MM的預(yù)后治療具有一定意義，而且簡便切實可行，適用于臨床常規(guī)應(yīng)用。作者認(rèn)為近年來本病的發(fā)病率確有增加趨勢，發(fā)病率的增高應(yīng)與先進醫(yī)療技術(shù)在臨床的應(yīng)用有很大關(guān)系，也是檢出病例增多的重要因素。

在臨床實踐中，凡遇中老年患者血清總蛋白和球蛋白明顯增高，清蛋白降低，清蛋白／球蛋白比率嚴(yán)重倒置，尿蛋白陽性或慢性腎炎，腎衰竭，貧血患者，均應(yīng)考慮MM的可能，應(yīng)建議臨床做骨髓檢查、血清蛋白電泳、免疫固定電泳等相關(guān)檢查以求確診。

［1］ Ronald Hoffman，Edward Benz，Sanford Shattil，et al.Hematology－basic principles and practice［M］.4th ed.New York：Churchill Livingstone，2005：501－1505.

［2］ 張伯龍，徐君東.血液病誤診誤治與防范［M］.北京：科學(xué)技術(shù)文獻出版社，2002：111－121.

［3］ 詹其林，許小平.多發(fā)性骨髓瘤102例臨床分析［J］.中華新醫(yī)學(xué)，2002，3（7）：591－592.

［4］ 王彩云，楊敬芳，田亞平.SEBIA電泳儀及其配套試劑測定血清蛋白電泳的方法學(xué)評價［J］.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2003，18（2）：6－7.

［5］ 劉金英，翟玉華，孫衛(wèi)紅.免疫固定電泳技術(shù)在 M蛋白免疫分型中的應(yīng)用［J］.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，21（5）：57.

［6］ 劉汐盈，孫淑艷，宋媛媛.血清免疫固定電泳、蛋白電泳、免疫球蛋白及輕鏈定量對多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷價值探討［J］.中國實驗診斷學(xué)，2010，14（5）：680－681.