李建華(甘肅省白銀市中心血站檢驗科 730900)
隨著血細胞分析儀的發展,許多實驗室會同時使用多個系統的血細胞分析儀,因而會使用非配套校準物、質控物來校準血細胞分析儀,給實驗結果帶來過高的系統誤差,降低了檢驗結果的可信度。經嚴格標定的新鮮全血用于多系列血細胞分析儀的校準,是一種經濟、可靠的校準方法,提高了同一實驗室不同儀器之間檢驗結果的可比性。
1.1 儀器與試劑 BC-5500、BC-5300、BF-5180和BF-6800血細胞分析儀及原裝試劑。BC-5500血細胞分析儀的配套校準物。BD公司真空采血管。
1.2 方法
1.2.1 校準前的準備 每臺血細胞分析儀先用清洗劑清洗,以保證管路暢通和清潔,然后做空白計數測定。取健康獻血人乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血(1.5mg/mL)1份,分別在4臺血細胞分析儀上各測定20次,比較其測定結果的可比性,計算各參數的變異系數。
1.2.2 新鮮全血的標定 以BC-5500作為參考機,用配套校準物嚴格校準后,取一健康人新鮮全血,在BC-5500上連續測定20次,去掉各參數中最高和最低的結果,取18次結果的平均值作為靶值,以標定其他 臺血細胞分析儀。此標定新鮮全血應在常溫4h內使用。
1.2.3 校準后3臺血細胞分析儀各項指標與參考儀器的比較取10份健康獻血者EDTA-K2抗凝血(1.5mg/mL)充分混合后,分別在4臺血液分析儀上測定3次,取其均值。以BC-5500測定的結果為靶值,經新鮮全血校準的3臺血細胞分析儀測定的白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細胞比容(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)及血小板(PLT)分別與之比較,計算各項指標有無差異。
1.2.4 校準后3臺儀器的總體變異系數測定 取EDTA-K2抗凝血1份,分別在經新鮮全血校正后的3臺儀器上連續測定10次,共30次,計算該血在3臺儀器上的總變異系數。
2.1 校準前各儀器空白計數、攜帶污染率及變異系數 校準前4臺血細胞分析儀空白計數均合格:WBC<0.2×109/L,RBC<0.2×1012/L,Hb<2g/L,HCT<1%,MCV<1fL,PLT<5×109/L。各儀器攜帶污染率正常:WBC<2%,RBC<3%,Hb<2g/L,HCT<3%,MCV<2%,PLT<4%。各儀器每項參數的變異系數均在允許范圍內(表1)。

表1 校準前4臺血細胞分析儀各項參數的變異系數(CV%)
表2 校準后3臺血細胞分析儀與BC-5500結果比較(±s)

表2 校準后3臺血細胞分析儀與BC-5500結果比較(±s)
項目7.20±2.0 7.00±2.2 7.10±2.1 7.30±1.9 RBC(×1012/L) 4.39±0.55 4.41±0.46 4.37±0.58 4.37±0.52 Hb(g/L) 136.50±2.4 134.80±3.1 135.40±2.1 136.10±2.8 HCT(%) 38.80±3.4 38.60±3.5 38.90±3.2 39.10±3.1 MCV(fL) 89.50±2.6 88.70±2.4 89.20±2.5 88.90±2.4 PLT(×109/L) 197.00±16.0 193.00±15.0 192.00±18.0 195.00±13.0 BC-5500 BC-5300 BF-5180 BF-6800 WBC(×109/L)
2.2 校準后各儀器的測定結果 經新鮮血細胞校準的3臺儀器與BC-5500測定的 WBC、RBC、Hb、HCT、MCV和PLT值見表2。結果說明,經新鮮全血校準的3臺血細胞分析儀測定的結果與BC-5500的測定結果差異無統計學意義(P>0.05)。
血細胞分析儀操作簡便,結果準確可靠,已經成為各級醫院臨床檢驗的主要檢測手段。隨著醫院工作量的逐漸增大,很多醫院已擁有多臺不同型號的血細胞分析儀,但由于各廠家生產的血細胞分析儀采用的原理和試劑性質不同,造成結果潛在差異[1]。因此,要保證血細胞分析儀檢測結果之間的一致性,除了有完善的質量控制體系,還必須建立合理的比對程序,即用可溯源的血細胞檢測系統定期對本實驗室的血細胞分析儀進行比對。由于儀器配套校準物質成本高、有效期短等多種原因,難以得到普遍推廣[2]。用“定值”的健康人新鮮全血進行儀器比對為之提供了一條可行的途徑。
表1的數據表明,本次實驗所用的4臺血細胞分析儀測定新鮮全血結果的重復性良好,具備了進行儀器校準的前提條件。在比較各儀器測定結果的可比性時,表2的數據表明,用了新鮮全血校準后,各儀器的可比性良好,測定新鮮全血6個參數的結果非常接近。實驗室未用任何方式校準儀器會影響實驗結果的準確性,而使用非配套的校準品、質控品校準儀器同樣給儀器帶來過高的系統誤差[3]。評價校準品的好壞應以新鮮全血為依據,校準品的特性越接近新鮮全血越好。EDTA-K2抗凝的新鮮全血與患者的血標本一致,完全可以替代校準品在多系列多個儀器之間進行儀器校準[4]。同一實驗室,甚至不同實驗室也可以每天以新鮮全血對血細胞分析儀進行室內質控,來保證分析結果的準確度和精確度。
[1] 滕本敬二.血液分析儀的溯源的國際參考方法[J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(1):53-56.
[2] 彭明婷.建立血細胞分析溯源體系的有關問題[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(4):381.
[3] 彭明婷,谷小林,王文麗,等.不同方法校準血液分析儀結果比較[J].中華檢驗醫學雜志,2000,23(1):35-37.
[4] 谷小林,彭明婷.二級標準血液分析儀的質量控制與應用[J].臨床檢驗雜志,2001,19(4):237-240.