李小紅
(重慶市血液中心輸血研究所 400015)
B(A)是中國人中一種較罕見的ABO亞型,其血清學和遺 傳學有獨特特征。正確鑒定B(A)亞型,對新生兒溶血病(he-molytic disease of the newborn,HDN)防治和安全輸血有著極其重要的作用。筆者報告1例在HDN產前檢查中發現的B(A)亞型,借此介紹其血清學特點和鑒定流程。
患者,女,37歲,流產2次,存活子女2人,現為孕5周6d,送檢原因為HDN產前檢查發現ABO正反不符,申請ABO血型鑒定。筆者按參考文獻[1]進行血型鑒定,根據血清學結果判定為B(A)亞型。單克隆抗-A、抗-B,ABO試劑紅細胞,抗-H,抗-A1,A2細胞均由上海血液生物有限公司提供,效期內使用,人源抗-A、抗-B為實驗室自制。主要儀器為細胞洗滌離心機KA-2200。主要亞型鑒定結果為抗-A(單抗)凝集強度2+,抗-B(單抗)4+,A1細胞3+s,B細胞陰性(-),O細胞-,自身細胞-,抗-A(人源),抗-B(人源)4+,抗-H 4+(-);抗-H與同期采樣的O細胞凝集為4+,與B細胞凝集為2+。其余ABO亞型鑒定實驗結果為:與抗-A反應為陰性;與A2細胞反應為2+s;確認與A1細胞反應為不規則抗-A所致(患者血清與兩個A細胞反應均為3+s,與兩個O細胞均不反應)。
B(A)是中國人一種較罕見ABO亞型,上海人頻率為1/40 000~50 000[2]。本例B(A)主要血清學特點為:(1)與抗-A反應減弱,與抗-A1不反應;(2)血清中含不規則抗-A(與A1和A2細胞均反應);(3)與抗-H反應增強。
人源抗-A、抗-B常用于ABO亞型鑒定。本次人源抗-A與患者紅細胞不反應,經檢測效價無下降,疑是親和力下降所致。一般的A亞型B(如A×B)與抗H反應弱于O細胞。而該患者紅細胞與抗H反應達4+,提示可能不是正常A亞型B。A亞型B(如A×B)血清中不規則抗體抗-A不與A2細胞反應,而該患者血清與A2細胞呈2+s反應。綜上,作者判定患者血型為B(A),血清中存在不規則抗-A。患者丈夫如為O型或B型,則可能生育AB型、B型或O型孩子,預期不發生新生兒敗血病(HDN);而如患者丈夫為A型或AB型,則可能生育AB型或A型孩子,可能發生HDN。
可用于B(A)確認的其他試驗,(1)吸收放散試驗,B(A)紅細胞上B抗原與正常AB型相比,具“吸收弱放散強”的特點[1]。比較患者和正常AB型紅細胞吸收抗-B后血清和放散液中抗A效價,可證實此特點。(2)分子生物學檢測,B(A)分子遺傳基礎為正常B基因在4個關鍵氨基酸位置(176、235、266、268)發生點突變,生成具雙功能A-和B-轉移酶活性的酶[2]。通過序列特異性性引物聚合酶鏈反應(PCR-SSP)或測序,可證實B基因是否存在相應點突變[3-6],測序更準確。(3)家系遺傳分析,正常AB型與O型婚配,子女可能為A型或B型,不可能為AB型或O型,而B(A)與O型婚配,子女可能為AB型或O型,不可能為A型或者B型。
B(A)作為一種特殊ABO亞型,與安全輸血關系密切[7]。如獻血者為B(A),則該血液不宜供應臨床。如患者為B(A),則需輸注B型或O型洗滌紅細胞。宿蘭等[4]和劉建嶺等[8]研究顯示國內部分廠家抗A血清不能檢出B(A)的A抗原,使B(A)表現為正反相符的B型。如受檢者為患者,誤定為B型,輸入B型紅細胞,預期無嚴重不良反應;但如紅細胞懸液中含較多血漿,或者輸入B型血漿,則可能導致溶血性輸血反應;而如受檢者為獻血者,誤定為B型,血液供應給B型患者,則可能引起嚴重輸血反應。因此應加強血型檢測試劑質量控制,選用對ABO亞型檢出能力較強的試劑,有條件的實驗室最好同時采用兩個廠家試劑進行ABO血型鑒定,減少ABO亞型漏檢,保障輸血安全[9-10]。
志謝:本病例來自作者2011年8~10月在上海血液中心血型參比室的培訓學習,感謝向東、金沙、劉曦、蔡曉紅等全體老師在培訓及本文撰寫中給予的幫助!
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