黑木耳新品種Au053的選育與應(yīng)用*

巫仁高 王愛仙 劉福陽 鄧文明 胡 蕾

（福建省南平市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，福建 建陽 354200）

黑木耳新品種Au053的選育與應(yīng)用*

巫仁高 王愛仙 劉福陽 鄧文明 胡 蕾

（福建省南平市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，福建 建陽 354200）

采集分離野生黑木耳菌株98個，經(jīng)過馴化與篩選，選育出優(yōu)良菌株Au053。經(jīng)與南方地區(qū)主栽品種新科1號、新科5號、Au139兩年五個點的區(qū)試比較，以Au053表現(xiàn)最好，比新科1號增產(chǎn)9.7％，比新科5號增產(chǎn)10.0％，比Au139增產(chǎn)10.3％；遇高溫高濕氣候，2個對照菌株普遍發(fā)生嚴(yán)重的流耳、爛袋現(xiàn)象，而Au053不發(fā)生流耳、爛袋，穩(wěn)定性較好。

黑木耳；新品種；Au053；馴化；選育

黑木耳是我國傳統(tǒng)的食用菌栽培菌類之一，目前其袋料栽培所使用的菌株在南方普遍存在菌絲活力差、抗雜能力弱的問題。生產(chǎn)制袋環(huán)節(jié)容易嚴(yán)重感染雜菌，出耳階段遇高溫高濕極易發(fā)生“流耳”，出現(xiàn)爛耳爛袋現(xiàn)象，給生產(chǎn)者造成嚴(yán)重?fù)p失[1～3]。本所通過對黑木耳新品種的選育研究，獲得菌絲活力強(qiáng)、抗雜能力強(qiáng)、產(chǎn)量高、出耳管理相對粗放、適宜南方氣候栽培的黑木耳新品種Au053，供生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。

1 菌株選育

1.1 野生黑木耳的采集 2005年5月，南平地區(qū)連續(xù)降雨半個月，雨后伴隨高溫天氣，白天最高氣溫達(dá)到30 ℃，是典型的高溫高濕氣候。根據(jù)黑木耳的一般生長習(xí)性，此時人工栽培和野生黑木耳普遍發(fā)生流耳的情況下，在野外有可能采集到為抵抗不良環(huán)境而產(chǎn)生的有效變異菌株，在逆環(huán)境中表現(xiàn)出抗逆性強(qiáng)、生長活力強(qiáng)、生長良好的野生黑木耳子實體。經(jīng)多次搜尋，先后3次分別在建陽市小湖鎮(zhèn)生態(tài)林區(qū)及庵山林區(qū)采集到在不同腐木上生長良好的野生黑木耳子實體。2005年10月，又分別在上述區(qū)域采集到生長良好的野生黑木耳子實體。

1.2 野生黑木耳子實體的組織分離、馴化 將采集的野生黑木耳子實體及時妥善帶回實驗室，分別用75％酒精浸泡3 min后，用無菌水漂洗數(shù)次，在接種箱內(nèi)無菌條件下切取耳片邊緣0.5 cm大小的組織塊接入預(yù)先制備好的PDA試管培養(yǎng)基斜面上，編號，貼好標(biāo)簽，置于25 ℃恒溫箱中培養(yǎng)，共獲得98個野生黑木耳組織分離菌絲體[3]。經(jīng)多次PDA培養(yǎng)基菌絲生長對比試驗、拮抗試驗，淘汰菌絲細(xì)弱、長勢差的菌絲體，最終獲得菌絲長勢較好、菌絲體互不親和的菌株10個。

1.3 出耳篩選試驗 2005—2006年，對篩選出的10個野生黑木耳馴化菌株進(jìn)行秋栽和春栽兩次出耳試驗，觀察記錄各菌株菌絲在栽培料中的生長、出耳、流耳情況和產(chǎn)量表現(xiàn)，淘汰菌絲細(xì)弱、栽培不出耳和出耳極少的菌株，篩選出4個菌絲長勢較好、出耳較正常、產(chǎn)量較高、抗流耳的菌株，分別為Au053、Au053′、Au0531、Au083。2006—2007年，對初選出的4個黑木耳野生菌株進(jìn)行栽培出耳對比試驗，淘汰出耳不穩(wěn)定、產(chǎn)量低的菌株Au053′、Au0531，篩選出菌株Au053和Au083。

2 新選育菌株與主栽菌株對比試驗

2.1 拮抗性 將篩選出的新菌株Au053、Au083與主栽菌株新科1號、新科5號、Au139進(jìn)行拮抗試驗。結(jié)果表明2個新菌株與主栽菌株間有明顯拮抗線，互不親和，證明為不同菌株。

2.2 菌絲活力 由表1可看出，在相同溫度下，Au053菌絲萌發(fā)、定植較快，Au083、Au139次之，新科1號、新科5號較慢。定植后菌絲長勢，Au053、Au139粗壯濃密，新科1號、新科5號較粗壯、較濃密，Au083纖細(xì)稀疏，顏色較白。Au053菌絲走速最慢，新科1號菌絲走速最快，Au083居中。

2.3 生物學(xué)效率 Au053、新科1號、新科5號、Au139、Au083的生物學(xué)效率分別為69.67％、59.59％、 60.78％、 46.81％、 49.52％（表1）。Au053比新科1號、新科5號、Au139、Au083分別增產(chǎn)10.08％、8.89％、 22.86％、20.15％，差異達(dá)極顯著水平。

2.4 流耳與爛袋 將5個菌株各100袋于2009 年2月1日統(tǒng)一下地進(jìn)行流耳與爛袋觀察試驗，每筒有一處以上出現(xiàn)流耳或者爛口即屬流耳或爛袋。根據(jù)3月1日、3月20日、4月10日及4 月30日的試驗觀察記錄（表2），新科1號、新科5號、Au139發(fā)生流耳和爛袋的比例明顯高于Au053、Au083，尤其是在第二潮耳管理期間（4 月10日觀察），新科1號、新科5號、Au139發(fā)生流耳的比例分別達(dá)78％、80％、55％，爛袋的比例分別為62％、60％、48％，而Au053、Au083則為0。

2.5 抗雜菌能力 于2009年4月6日至16日進(jìn)行各菌株抗雜能力試驗。結(jié)果表明，Au053菌絲與雜菌菌絲接觸處形成明顯的拮抗線，其抗綠色木霉、鏈孢霉能力最強(qiáng)；Au083菌絲與雜菌菌絲接觸部位也形成較為明顯的拮抗線，但有少量菌絲被雜菌菌絲侵食，抗雜能力次之；新科1號、新科5號、Au139菌絲與雜菌菌絲接觸處，無拮抗線形成，菌絲被雜菌包圍、侵食，抗雜能力較弱。

通過以上試驗可知，Au053菌絲萌發(fā)、定植較快，菌絲長勢粗壯濃密、潔白，抗雜菌能力強(qiáng)，生物學(xué)效率高，遇高溫高濕氣候不發(fā)生流耳、爛袋，在南方氣候條件下表現(xiàn)出高產(chǎn)、抗流耳、不爛袋的顯著優(yōu)勢，初定為南方袋栽黑木耳優(yōu)良品種。

3 分子生物學(xué)研究及分類鑒定

3.1 Au053與主栽菌株DNA指紋及營養(yǎng)分解酶活的變化規(guī)律 通過福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心對Au053與主栽菌株DNA指紋的測定，Au053在遺傳上明顯與新科1號、新科5號和Au139菌株不同。通過對4個菌株營養(yǎng)分解酶CMC酶、木聚糖酶、淀粉酶、漆酶的活性及其變化趨勢的測定，發(fā)現(xiàn)Au053營養(yǎng)分解酶有其獨(dú)特的變化規(guī)律，尤以漆酶為明顯，其菌絲菌齡在20天時漆酶幾乎沒有活性，至菌齡40天后漆酶活性急劇上升；而其他菌株菌絲在20天時漆酶活性降到接近于0，以后不再出現(xiàn)活性。

3.2 Au053分類鑒定 經(jīng)中國科學(xué)院微生物研究所檢測鑒定，Au053隸屬木耳目、木耳科、木耳屬，其漢語名和拉丁學(xué)名為黑木耳Auricularia auricula-judae(Bull.) Quél。

表1 新選育菌株與主栽菌株菌絲萌發(fā)、定植時間、長勢、產(chǎn)量及生物學(xué)效率比較

表2 新選育菌株與主栽菌株流耳、爛袋情況比較

4 Au053多年多點試種表現(xiàn)

為檢測新品種Au053的豐產(chǎn)性、穩(wěn)定性及抗病性，以評價其利用價值，2008－2011年在福建省多地進(jìn)行新品種聯(lián)合區(qū)域試驗。

4.1 產(chǎn)量表現(xiàn) 2008－2009年在福建省南平農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所試驗基地、武夷山食用菌辦公室、浦城縣食用菌廠、建陽市食用菌辦公室和建寧縣食用菌技術(shù)推廣站進(jìn)行新品種聯(lián)合區(qū)域試驗。供試的4個品種兩年5個試驗點的平均產(chǎn)量見表3。其中Au053的兩年平均干耳產(chǎn)量為116 g/袋，高于3個對照菌株，較新科1號增產(chǎn)9.7％，較新科5號增產(chǎn)10.0％，較Au139增產(chǎn)10.3％。

對表3干耳產(chǎn)量進(jìn)行多重比較LSD法分析，結(jié)果表明：年份間、地點間，以及地點×年份、品種×年份、地點×品種、地點×品種×年份的互作方差沒有差異，而品種間差異達(dá)極顯著水平。4.2 穩(wěn)定性分析 利用多重比較LSD法分析，得出產(chǎn)量的穩(wěn)定性及綜合評價，結(jié)果以新品種Au053豐產(chǎn)性和穩(wěn)定性都較好。

表3 2008—2009年福建省黑木耳新品種區(qū)試試驗平均產(chǎn)量（干重，單位：g/袋）

4.3 抗病性鑒定 建陽市農(nóng)業(yè)局植保站2009—2011年對Au053進(jìn)行田間生產(chǎn)抗病性調(diào)查鑒定，雜菌感染率平均為9.6％，木霉病和細(xì)菌性斑點病發(fā)病率均為0，流耳發(fā)病率為0.16％；2009—2010年，南平市農(nóng)業(yè)局植保站的田間抗病性調(diào)查鑒定結(jié)果為，Au053雜菌感染率平均為12.2％，木霉病及細(xì)菌性斑點病發(fā)病率為0，流耳發(fā)病率為0.4％。表明Au053抗病性較強(qiáng)，特別是抗流耳能力明顯優(yōu)于其他主栽品種。

5 品種特征特性

黑木耳Au053屬中溫偏高型菌株，子實體單生為耳狀，或群生為花瓣狀，膠質(zhì)，中凹，半透明，被面呈青褐色，多皺縮，有絨狀短毛，腹面黑色、平滑，鮮耳紅褐色或者褐色，有脈狀皺紋，耳片柔軟，耳面疏生短絨毛。子實體直徑6～11 cm，厚0.8～1.0 mm，干后強(qiáng)烈收縮，松泡率（干濕比）9～12倍，口感膠柔滑潤。2011年10月，南平市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗所對Au053子實體成分的檢測結(jié)果為：灰分7.0％，粗蛋白12.7％，粗脂肪2.6％，總糖（以轉(zhuǎn)化糖計）47.5％，粗纖維4.6％，鐵258 mg/100g，鈣234 mg/100g等。

Au053菌絲的萌發(fā)溫度為18 ℃，生長溫度為14～40 ℃，最適生長溫度23～25 ℃，菌絲致死溫度為42 ℃，出耳最適溫度18～22 ℃。培養(yǎng)料含水量為56％～68％時菌絲均能生長，最適含水量為61％～65％。菌絲生長適宜的pH為5.0～7.5，最適6.0～6.5。原基發(fā)生需光照刺激，光照刺激后原基處會分泌少量紅色或者褐色色素，屬正常生理反應(yīng)，不影響出耳和產(chǎn)量。出耳期間遇連續(xù)降雨、高溫高濕氣候不會發(fā)生流耳現(xiàn)象，表現(xiàn)出較強(qiáng)抗流耳病害特性，適合在南方氣候條件下生產(chǎn)應(yīng)用。

[1] 楊新美. 中國食用菌栽培學(xué)[M]. 北京: 農(nóng)業(yè)出版社, 1988: 355-377.

[2] 鄭美騰. 福建食用菌 [M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2000: 157-160.

[3] 呂作舟. 食用菌栽培學(xué)[M]. 北京: 高等教育出版社, 2006: 96.

*Au053認(rèn)定名稱更改為“南耳1號”。