CRP水平及基因多態(tài)性和急性心肌梗死發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系＊

楊海濤，何國(guó)平△，戚傳平，許聯(lián)紅，錢億超

（江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院：1.心血管內(nèi)科；2.中心實(shí)驗(yàn)室，江蘇常州213002）

血清C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）不僅是急性炎癥反應(yīng)蛋白，而且與很多疾病的發(fā)病有著密切關(guān)系［1］。近年來(lái)，有報(bào)道表明，遺傳因素影響血清CRP水平，本文就血清CRP水平與急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和CRP基因C＋1444T多態(tài)性的相關(guān)性進(jìn)行探討，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2009～2010年江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院心內(nèi)科住院患者328例，分為AMI組和對(duì)照組。AMI組：AMI患者227例，男167例，女60例，年齡31～99歲，平均（63.76±11.65）歲，均符合2002年美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)（AHA／ACC）關(guān)于AMI的診斷標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)照組：經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影檢查證實(shí)冠狀動(dòng)脈無(wú)狹窄者161例，男80例，女81例，年齡29～84歲，平均（57.68±10.01）歲。所有入選者均為中國(guó)蘇南地區(qū)漢族人群，均排除嚴(yán)重肝、腎功能不全、腫瘤、風(fēng)濕類疾病和急性或嚴(yán)重慢性感染者。該研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并征得所有入選對(duì)象知情同意。

1.2 方法

1.2.1 CRP基因C＋1444T多態(tài)性檢測(cè) 檢測(cè)方法參照本中心既往研究［1］。

1.2.2 血清CRP水平檢測(cè) 采集研究對(duì)象空腹靜脈血5 mL，室溫下靜置0.5～1h，離心后留取上層血清，-70℃冰箱保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清中CRP的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布計(jì)量資料用±s表示，采用t檢驗(yàn)；偏態(tài)分布資料用中位數(shù)／四分位數(shù)間距（M／IQR）表示，采用 Wilcoxon秩和檢驗(yàn)；基因型頻率與Hardy-Weinberg平衡的符合程度和分類變量比較采用χ2檢驗(yàn)；CRP基因C＋1444T多態(tài)性和血清CRP水平與AMI發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性均采用Logistic回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 臨床一般特征比較 與對(duì)照組相比，AMI組年齡較大，男性、吸煙者、高血壓者和糖尿病者所占比例較高，血清總膽固醇（TC）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平較高（表1）。

2.2 CRP基因C＋1444T基因型鑒定 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物為460 bp的特異性片段。酶切后，理論上應(yīng)顯示3種基因型：CC純合型（311bp和149bp）、CT雜合型（460bp、311bp和149bp）和TT純合型（460bp），但本研究人群未發(fā)現(xiàn)TT純合型（圖1）。

表1 兩組患者臨床一般特征比較

圖1 CRP基因C＋1444T多態(tài)性PCR產(chǎn)物酶切電泳圖

2.3 CRP基因C＋1444T多態(tài)性分布及其與AMI發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性 本研究人群經(jīng)χ2檢驗(yàn)符合Hardy-Weinberg遺傳平衡規(guī)律（P＞0.05），具有群體代表性。CRP基因C＋1444T的CC、CT和TT基因型頻率在AMI組中分別為82.38%、17.62%和0%，在對(duì)照組中分別為86.96%、13.04%和0%；C和T等位基因頻率在AMI組中分別為91.19%和8.81%，在對(duì)照組中分別為93.48%和6.52%；兩組間基因型和等位基因頻率分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多因素Logistic回歸分析顯示，CRP基因C＋1444T多態(tài)性與AMI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)顯著相關(guān)性（表2）。

表2 CRP基因C＋1444T多態(tài)性分布及其與AMI發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系［n（%）］

2.4 血清CRP水平（M／IQR）及其與AMI發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性 AMI組的血清CRP水平顯著高于對(duì)照組（5.974／6.256μg／mL vs.3.271／1.292μg／mL），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。且以年齡、性別、吸煙史、高血壓史、糖尿病史、TC、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）和LDL-C為自變量的Logistic回歸分析顯示，CRP水平升高與AMI的發(fā)病密切相關(guān)（OR 1.955，95%CI1.169～3.270，P＜0.01）。

2.5 CRP基因C＋1444T多態(tài)性與血清CRP水平（M／IQR）的關(guān)系 AMI組和對(duì)照組的CRP基因C＋1444T位點(diǎn)CC和CT基因型之間血清CRP水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)Logistic回歸分析顯示，兩組的血清CRP水平與CRP基因C＋1444T多態(tài)性均無(wú)顯著相關(guān)性（表3）。

表3 CRP基因C＋1444T位點(diǎn)CC和CT基因型之間血清CRP水平比較（M／IQR，μg／mL）

3 討 論

炎癥被認(rèn)為有助于增加心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，而CRP是天然免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，在炎癥或組織損傷發(fā)生后急劇升高，可達(dá)到平時(shí)的100～1 000倍，它在機(jī)體的天然免疫過(guò)程中發(fā)揮重要的保護(hù)作用，被視為炎癥標(biāo)志物。

近年來(lái)，CRP基因多態(tài)性與冠心病的關(guān)系越來(lái)越多地受到研究人員的重視。Miller等［2］以美國(guó)人為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)CRP基因C＋1444T多態(tài)性與心肌梗死或缺血性事件無(wú)相關(guān)性。Wang等［3］的結(jié)論與上述一致。本研究人群未檢出TT純合子，這與PUBMED SNP數(shù)據(jù)庫(kù)公布的北京、日本和非洲健康人群數(shù)據(jù)以及國(guó)內(nèi)報(bào)道［4-5］結(jié)果相符合；且未發(fā)現(xiàn)CRP基因C＋1444T多態(tài)性與AMI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有顯著相關(guān)性，與國(guó)外研究結(jié)論一致。

有研究表明，在急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）尤其是新發(fā)病的患者中，血清CRP水平顯著增高［6］。本研究進(jìn)一步驗(yàn)證了上述結(jié)論，即AMI患者血清CRP水平顯著高于無(wú)冠狀動(dòng)脈狹窄的非冠狀動(dòng)脈性心臟?。–AD）者，多因素分析顯示CRP水平升高與AMI的發(fā)病密切相關(guān)。

那么，CRP基因C＋1444T多態(tài)性與血清CRP水平是否存在相關(guān)性呢？有研究表明，遺傳因素對(duì)血清CRP水平所起的作用可達(dá)35%～40%［7］。＋1444C＞T與-286C＞T＞A存在強(qiáng)的連鎖不平衡［2］，而-286C＞T＞A位于啟動(dòng)序列，為功能性多態(tài)性位點(diǎn)，通過(guò)轉(zhuǎn)錄機(jī)制可影響血清CRP水平，因此推測(cè)，血清CRP水平也可能受＋1444C＞T基因多態(tài)性的影響，從而參與AMI的發(fā)展。但是，目前國(guó)內(nèi)外相關(guān)報(bào)道結(jié)論不盡一致。國(guó)外的研究中，Shakhnovich等［8］通過(guò)對(duì)俄羅斯232例AMI患者與159例健康人的研究證實(shí)CRP基因C＋1444T多態(tài)性TT純合子比C等位基因攜帶的血清CRP水平高。而對(duì)2個(gè)前瞻性隊(duì)列研究的美國(guó)女性（護(hù)士健康研究）和男性（衛(wèi)生保健人員健康隨訪研究）［9］以及歐洲6個(gè)城市的1 003例AMI患者［10］的研究結(jié)論未發(fā)現(xiàn)CRP基因C＋1444T多態(tài)性和血清CRP水平有相關(guān)性。國(guó)內(nèi)朱名安等［11］對(duì)250例健康體檢者研究發(fā)現(xiàn)，C＋1444T位點(diǎn)TT、CT、CC 3種基因型攜帶者血清CRP水平存在明顯差異，以TT型攜帶者血清CRP水平最高。而Yan等［12］在中國(guó)漢族人群128例冠心病患者和119例健康人中均未檢測(cè)出C＋1444T位點(diǎn)TT型，且發(fā)現(xiàn)CC攜帶者的血清水平較高。本研究發(fā)現(xiàn)，AMI組與對(duì)照組的CRP基因C＋1444T位點(diǎn)CC和CT基因型之間血清CRP水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明該研究人群AMI患者和無(wú)冠脈狹窄的非CAD者血清CRP水平均不受CRP基因C＋1444T多態(tài)性的影響。鑒于目前相關(guān)研究結(jié)論的不同，本中心將繼續(xù)擴(kuò)大樣本量，結(jié)合多地區(qū)人群做進(jìn)一步研究。

［1］何國(guó)平，戚猛，高磊，等.CRP基因C＋1444T多態(tài)性與中國(guó)蘇皖地區(qū)漢族人群ACS的易感性無(wú)關(guān)［J］.南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，31（4）：522-525.

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