大豆皂甙對實驗性糖尿病大鼠腎臟自由基防御機能的影響

葉保國，聞春艷，王 薇，朱慶三，宋雪松＊

（1.吉林大學第一醫院 麻醉科，吉林 長春 130021；2.吉林大學中日聯誼醫院 病理科，吉林 長春 130033；3.吉林大學第一醫院 脊柱外科，吉林 長春 130021）

我國有悠久的大豆栽培歷史，大豆產品是我國人民日常生活不可缺少的食品。大豆不僅富含優質蛋白質和油脂，且還含有大量具有生理活性的物質，包括大豆皂甙、大豆磷脂、低聚糖類等［1］；其中對大豆皂甙的研究，近年來有資料表明大豆皂甙能降低血糖、保護心血管系統、抗癌癥以及抗衰老作用［2］，但大豆皂甙對糖尿病大鼠作用的研究在國內外尚未見相關報道，本實驗旨在觀察大豆皂甙對糖尿病大鼠腎臟自由基防御機能的作用，為大豆皂甙廣泛應用于臨床以及預防保健提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物和主要試劑 190－210 g健康雄性Wistar大鼠45只，由吉林省藥品檢驗所提供（合格證號960101032）；大豆皂甙（SS）由吉林省中醫中藥研究所提供；實驗用大豆皂甙用生理鹽水稀釋；鏈脲佐菌素（STZ）購于Sigma公司、SOD、CAT、LPO、GSH－Px試劑盒購于南京建成生物有限公司。

1.2 糖尿病模型制備 在實驗分組前，首先制備糖尿病模型，隨機取實驗動物35只，腹腔注射STZ（用新配制的枸櫞酸緩沖液溶解）50 mg／Kg；48小時后采尾血測空腹血糖，濃度大于16.7 mmol／L為模型復制成功［3］，該模型成功30只。

1.3 實驗分組及給藥 取未造模的10只動物做正常對照組，造模成功的30只動物隨機分為糖尿病對照組（15只）、大豆皂甙給藥組（15只），大豆皂甙給藥組每日灌胃大豆皂甙10 mg／Kg，正常對照組及糖尿病對照組均每日給與等劑量生理鹽水，連續給藥3個月。在實驗過程中糖尿病對照組動物死亡4只、大豆皂甙給藥組動物死亡1只。

1.4 實驗后的處理 各組均取10只動物取材，實驗結束次日清晨處死，稱量體重。取腎組織手動勻漿，2 000 g離心，留上清待測；采用 NBT［4］法檢測腎組織中超氧化物歧化酶（SOD）含量、滴定法［5］測定CAT含量、TBA［6］法檢測腎組織中脂質過氧化物（LPO）含量、DTNB法［7］測定 GSH－Px的含量；測試儀器為南京儀器設備廠722型分光光度計。

1.5 統計學分析 大鼠體重及腎組織的各指標（SOD、CAT、LPO、GSH－Px）均以±s表示，應用SPSS19.0統計軟件進行統計學處理，多個樣本均數間比較采用方差分析。

2 結果

2.1 大鼠的體重 對照組：大鼠精神狀態好、皮毛光滑、體重明顯增加、反應靈敏；糖尿病組：大鼠明顯消瘦，精神萎靡，毛皮無光澤，反應遲鈍。大豆皂甙給藥組：大鼠體重、精神狀態、毛皮光澤和反應度較對照組差，但明顯好于糖尿病組。

2.2 大鼠腎臟超氧化物歧化酶（SOD）含量的檢測與對照組比較，糖尿病對照組顯著降低（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微降低無顯著差異（P＞0.01），見表1。

2.3 大鼠腎臟過氧化氫酶（CAT）含量的檢測 與對照組比較，糖尿病對照組顯著降低（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微降低無顯著差異（P＞0.01），見表1。

2.4 大鼠腎臟脂質過氧化物（LPO）含量的檢測與對照組比較，糖尿病對照組顯著升高（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微升高無顯著差異（P＞0.01），見表1。

2.5 大鼠腎臟谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）含量的檢測 與對照組比較，糖尿病對照組顯著升高（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微升高無顯著差異（P＞0.01），見表1。

表1 大豆皂甙作用下Wistar大鼠SOD、CAT、LPO和GSH－Px含量的變化（n＝10，±s）Group SOD（U／ml）CAT（U／ml）LPO（nmol·g－1）GSH－Px（U／ml）Control 13.48±0.72 1.44±0.31 284.32±4.17 20.63±1.43 Diabetic model 7.45±0.28＊ 0.83±0.11＊ 487.13±6.49＊ 41.36±2.04＊SS treatment 13.06±0.91△ 1.36±0.25△ 310.13±6.37△ 21.03±1.26△＊P＜0.01，△P＞0.01 compared with control group；

3 討論

大豆皂甙有降血脂、抗氧化、抑制腫瘤、抗血栓、抗病毒、免疫調節、減肥、調節糖代謝等多種生物活性［8－10］。自由基廣泛存在于生物體內，正常條件下對機體起保護作用，消滅體內有害無用的物質，機體內也存在一整套抗氧化系統，消除多余的自由基，自由基可以由體內代謝產生或由外界進入人體內，如果血液中一些“垃圾”和毒素不能及時消除，便會形成自由基，如果環境中的一些有毒物質通過呼吸、皮膚接觸而進入人體，也會沉淀成自由基。自由基能破壞機體細胞膜，甚至到切斷DNA鏈，從而加速細胞的衰老，降低機體的免疫功能，甚至起到誘發腫瘤等極壞的作用［11］。目前已經查明能對抗自由基的物質有維生素C、輔酶Q、谷胱甘肽、過氧化氫酶、超氧化物岐化酶（SOD）等。SOD被認為是消除自由基、抗腫瘤、抗衰老、提高機體免疫力、限制炎癥等方面最有價值的物質，它是1968年由 Mocord和Fmidovich發現的。超氧化物歧化酶是直接的抗氧化酶，抑制體內脂肪和蛋白質過氧化反應速度提高機體免疫力；過氧化氫酶是過氧化物酶體的標志酶，LPO反應了機體脂質受活性氧／自由基攻擊受損的程度［12］。

腎臟有完整的抗氧化酶保護系統，主要有SOD、CAT和GSH－Px等，他們對防御自由基損傷有重要作用。本研究結果表明，大豆皂甙能夠提高糖尿病大鼠腎臟SOD和CAT含量，降低LPO和GSH－Px含量，提示大豆皂甙對糖尿病大鼠腎臟自由基防御機能具有一定的保護作用，其具體的調節機制、保護機理是否具有相關性還有待于進一步的研究。

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