外周血中內皮祖細胞與椎動脈支架植入后再狹窄相關性的研究

劉志強

缺血性腦卒中是常見的腦血管疾病之一，約占80%。腦血管狹窄是誘發該疾病最重要的病因，而椎動脈的狹窄在腦血管狹窄中比例很高。據報道［1］，約20%的后循環腦卒中是由其狹窄引起。由于椎動脈的解剖形態學已經發生藥物不能扭轉的顯著變化，加上很多部位的椎動脈狹窄外科手術技術難度大，風險高，所以椎動脈支架植入術就成了不錯的選擇。但術后再狹窄的發生率并不低，可達10% ～43%。然而，再狹窄的發生機制目前尚不十分清楚，有研究指出［2］，動脈內膜損傷后修復過程中各環節失衡是其主要原因。而內皮祖細胞已被證實能參與缺血組織新生血管的形成，減輕血管修復時內膜的增厚［3］。但其與椎動脈支架植入后再狹窄間是否存在相關性，尚缺乏相關研究。本研究對此進行了初步探索，現總結報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年1月至2012年6月在本院行椎動脈支架植入術并復查腦血管造影的椎動脈狹窄患者作為研究對象，再狹窄患者需滿足如下條件:①既往在本院行椎體動脈支架植入術。②復查全腦血管造影提示支架植入部位血管狹窄＞50%;采用NASCET測量標準評價狹窄程度:狹窄率%=(狹窄遠端動脈直徑一最狹窄處直徑)/狹窄遠端動脈直徑×100%［4］。共納入68例患者，男39例，女28例，平均年齡(62.53±8.19)歲;另將年齡性別與之匹配的59例行椎動脈支架植入術患者作為對照組，男34例，女25例，平均年齡(61.68±8.49)歲。兩組患者在年齡、性別及支架植入時間方面不存在統計學差異，具有可比性。

1.2 方法及觀察指標 于上午8時左右取兩組患者的外周靜脈血約6 ml，采用密度梯度離心法獲取外周血總的單個核細胞，再接種到包被有入纖維連接蛋白的24孔培養板，7 d后通過激光共聚焦最微鏡測定貼壁細胞攝取DiI-acLDL及結合FITC-UEA-I的能力，雙染色陽性的細胞為正在分化的內皮祖細胞。同時用MTT比色法鑒定內皮祖細胞的增長能力，用劃痕試驗鑒定其遷移能力。

1.3 統計學方法 應用SPSS 17.0統計軟件包進行統計分析，計量資料以均數±標準差±s)表示，兩組間計量資料使用t檢驗，當P＜0.05即表示差異有統計學意義。外周血中內皮祖細胞與椎體動脈再狹窄的相關性采用直線相關分析。

2 結果

2.1 兩組患者外周血內皮祖細胞數量及活性的變化情況本研究結果表明，椎動脈支架植入術后再狹窄組外周血中內皮祖細胞的數量為(4.99±1.53)，明顯低于對照組的(17.21±3.90)，差異有統計學意義(P＜0.05);再狹窄患者外周血中內皮細胞的增值倍數為(1.09±0.58)，明顯低于對照組患者的(2.21±0.46)，且差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 再狹窄患者外周血中內皮祖細胞數量與狹窄程度的相關性 再狹窄患者外周血中內皮祖細胞的數量與狹窄程度成明顯的負相關(γ=-0.87，P＜0.05)，數量越多，狹窄程度越低。

3 討論

缺血性腦血管疾病常常病情重、進展快，且致殘致死率高，預后差，而從病理生理角度上來看，椎動脈的狹窄在促進疾病進展上扮演著重要作用。自從Storey等人于1996年首次嘗試應用支架植入術治療椎動脈狹窄后，椎動脈支架植入術開始廣泛應用于椎動脈狹窄的治療。盡管目前該類手術的成功率高、并發癥也逐漸減少，但是術后血管再發狹窄的比例也居高不下。一項基于363例行支架植入患者的回顧性研究指出，動脈管徑＜4.5 mm術后發生再狹窄的比例為36%，＞4.5 mm的動脈術后再狹窄率為12%［5］。而對于引起再狹窄的病理生理機制，目前尚無同一的認識。

目前普遍認為，支架植入術后血管發生再狹窄的主要機制在于手術過程中損傷血管后，導致血栓形成、內皮細胞愈合不良及內膜過度增生［2］。而血管內皮細胞的損傷是支架植入術后發生再次狹窄的初始因素，愈合不良是潛在因素。然而，血管內膜損傷后的修復過程極其重要，有研究認為，內皮祖細胞對血管受損部位的修復和再生起著不可忽視的作用。而我們的研究指出，再狹窄組患者外周血中內皮祖細胞的數量明顯低于對照組，且與狹窄的程度呈負相關，同時其增長和遷移能力較對照組也顯著下降，差異均有統計學意義。因此，作者推測，患者外周血中內皮祖細胞的數量及活性與支架植入術后再狹窄的發生密切相關。這可能是因為，內皮祖細胞的活性下降后，導致抵達受損部位的內皮祖細胞數量不足，無法滿足血管內皮修復對其的正常需求，加上活性的不足，使得修復過程中內皮增生不夠或者過度增生，引發血管發生再次狹窄。這和雷成力等人對冠狀動脈支架植入術后再次狹窄的研究結果相一致［6］。

綜述所述，外周血中內皮祖細胞在椎動脈支架植入術后再次狹窄發生過程中扮演重要作用，存在明顯的相關性。

［1］ Chukanova EI，Arakelian RK.Efficacy of vestibo in the treatment of vertebrobasilar insufficiency.Zh Nevrol Psikhiatr Im S S Korsakova，2012，112(4):53-56．

［2］ 趙慧玭，李慎茂，張廣平.椎動脈起始部支架植入術后再狹窄的病因及防治.介入放射學雜志，2010，19(12):1000-1003．

［3］ Jujo K，Ii M，Losordo DW.Endothelial progenitor cells in neovascularization of infarcted myocardium.J Mol Cell Cardiol，2008，45(4):530-544．

［4］ 賈志豪.冠脈支架內再狹窄發生機制及防治研究進展.現代生物醫學進展，2008，8:1346-1349．

［5］ Lederman RJ，Mendelsohn FO，Santos R，et al.Primary renal artery stenting:characteristics and outcomes after 363 procedures.Am Heart J，2001，142:314-323．

［6］ 雷力成，霍勇，李建平，等.冠狀動脈支架再狹窄患者循環內皮祖細胞數量及活性的研究.中華醫學雜志，2007，87(48):3394-3398．