論藥品檢驗中薄膜過濾法的應用

徐 丹

論藥品檢驗中薄膜過濾法的應用

徐 丹

在《中國藥典》中薄膜過濾法是對細菌微生物量測試的方法。近年來，薄膜過濾法已成為應用日益廣泛的藥物測試方法，其具有操作簡單、快速、數據準確的特點。通過無菌檢查法可以快速對細菌、微生物進行收集，并檢測其數量，通過這些方法可刪除藥品抗菌作用的成分；可作為制藥微生物回收和醫藥制劑中微生物驗證的一種實驗驗證方法。此方法也可適用于生物制品和藥品包裝材料的無菌測試。

薄膜過濾法；藥品檢驗；應用

近年來，薄膜過濾法作為藥物檢測技術的一種方法已受到越來越多的觀注和應用，此方法不僅在液體樣品、固體制劑檢測中適用，而且對于一些特殊用途潤滑脂的測試也可達到很好的效果[1]。薄膜過濾法也被應用于進口藥品細菌數量的測定，經過薄膜過濾器后的菌液沖洗直接貼于瓊脂培養基的表面，然后進行培養并且對菌落進行計數。

1 制藥的無菌檢查

1.1 抗菌藥物無菌試驗的應用抗菌藥物對某些微生物的生長和繁殖具有抑制作用，所以應用常規方法檢查只能得到假陰性結果，但這并不意味著藥物中微生物和病原微生物不存在，因此采取薄膜過濾法除去可溶性藥物中的抗微生物的物質，而細菌和其它微生物則被滯留在過濾器上，然后對其中所包含的微生物進行培養使其生長和繁殖，從而能夠定性或定量檢測微生物。

1.2 非抗菌藥物的無菌檢查對于一些非抗菌作用的藥品制劑進行測試時采用直接接種法，檢查結果并不令人滿意，如果在培養基中混入需氧和厭氧細菌培養基的試管中就會出現混濁現象，結果會難以觀察和測定，這就需要進行接種和涂片染色觀察，不但延長了培養時間而且還增加了污染的可能性。通過使用薄膜過濾法，兩種培養基的試管都不會出現渾濁，不僅縮短了檢驗周期，而且結果更加容易判斷。實驗結果表明，直接接種的方法使結果容易出現假陰性，薄膜過濾法不僅可以消除培養基的渾濁沉淀現象，而且也可消除培養過程中造成的堿性環境，為污染細菌的生長提供了有利條件，并縮短了訓練時間，提高了陽性檢出率，消除失誤產生的機率[2]。因此建議在推薦的新藥品種不易給出判斷結果時，應使用薄膜過濾法進行測試。

2 微生物的元菌檢查

2.1 微生物限度抗生素眼藥水張新妹等[3]運用開放式的過濾器將貼膜法與過濾法進行結合應用于消除藥物的抗菌活性中。結果顯示，菌落的回收率＞80%，45組抗生素眼藥水的微生物限度達到了法規的要求。貼膜法被證明是可行的菌落計數法，薄膜過濾法可以用來進行控制菌的檢查，《中國藥典》對抗生素眼藥水的微生物限度篩查確定了相應的檢測方法。

2.2 油膏微生物限度檢查蘇德模等[4]在眼膏、軟膏微生物限度檢查法的研究中做了8個品種15個批次樣本的調查實驗，首先將測試的產品混合肉豆蔻酸異丙酯的稀釋劑與0.9%的無菌氯化鈉溶液混合，將提取液用薄膜過濾法進行過濾，以檢查是否存在微生物，結果表明該方法重復性良好，并據此提出了一種新的微生物限度檢查的方法。

2.3 專有的微生物限度檢查可以采用薄膜過濾法和離心法或超聲波清洗等方法來消除中藥中某些具有抑制作用的細菌，這些方法具有操作簡便、結果準確、可靠性高和可重復性較好。

2.4 化學藥物的微生物限度測試常規方法無法檢測污染細菌的藥物如復方磺胺甲惡唑片、單硝酸異山梨酯、阿糖腺苷、硝呋太爾等采用這種方法進行測試，結果可有效去除藥品中的殺菌成分，從而使污染的微生物得到增長，提高了檢出率，可以更好對細菌、真菌和細菌的數量進行控制和檢查。

3 微生物薄膜過濾法在藥物驗證實驗的應用

有研究等將薄膜過濾中和法應用于中和抗菌藥物抗菌作用的檢測。此法依賴于微生物在多孔膜上的物理性保留，如膜的孔徑尺寸、抗菌膜的吸附作用以及在膜上的微生物回收培養的條件。抗菌藥物在過濾器上的殘留可以對微生物的生長起到抑制作用[5]。還有學者運用薄膜過濾法對抗菌藥物進行活菌的檢出率、回收率、增殖值的實驗。結果顯示，薄膜過濾法的效果明顯高于《中國藥典》中收載的平板菌落計數法和衛生部于1986年頒布的《藥品衛生檢驗方法》中所收載的洗脫法、貼膜法的平均回收率＞70%，平板菌落計數方法和洗脫法僅約為3%和＜10%，貼膜法的生長率不超過1/5。證明貼膜法可用于含有抗菌成分的藥品微生物限度的測試。

4 結論

綜上所述，薄膜過濾法是用于消除藥物中抗菌作用的一種常用手段。薄膜過濾法以盡量減少外界的影響同時減少運營商的主觀因素的影響，增加了樣本的取樣量，因此，該方法更加客觀、公正、科學，全面的應對樣品的污染狀況。只能用于實驗樣品是水溶性的過濾時，在不影響樣品中微生物生存的狀態時，可以使用這種檢驗方法。而且，該法的應用范圍非常廣泛，幾乎可以運用于各種劑型的藥物測試。歐洲、美國、英國、日本藥典中都對此做了詳細的記載。近年來，在我國的藥檢工作中也對藥物測試進行了大量的工作，同時也進行了大量的試驗研究，有了更深刻的理解和更廣泛地使用，這對于我國藥檢技術的提高、藥物質量控制和藥物監督和執法等，都具有重要意義。

[1] 陳新顏,郭麗真,姚秋萍.薄膜過濾法用于硝酸瞇康唑栓的控制菌檢查[J].海峽藥學,2004,16(4)：75.

[2] 劉方明.聚維酮碘泡騰片控制菌檢查方法的探討[J].中華醫藥雜志,2005,5(4)：312.

[3] 張新妹,胡昌勤,李艷,等.一般用途的抗生素滴眼劑的微生物限度檢查方法[J].天津醫學,2003,15(3)：10.

[4] 蘇德模,張新妹,特玉香,等.眼膏軟膏微生物限度檢查法的研究[J].藥物分析雜志,2003(4)：335-338.

[5] 柳忠義,蘇宏瑞,陳偉民.雙唑泰陰道泡騰片微生物限度檢查方法學驗證[J].中國藥業,2007,16(7)：14.

R927.11

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