全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類功能評(píng)價(jià)

楊靜梅，林一民（重慶市腫瘤研究所臨床檢驗(yàn)科 400030）

白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的常規(guī)項(xiàng)目之一。近年來，隨著血液學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的迅速發(fā)展，臨床檢驗(yàn)廣泛應(yīng)用白細(xì)胞五分類血細(xì)胞 分析儀，使檢驗(yàn)技術(shù)越來越自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化，及時(shí)準(zhǔn)確地為臨床診斷、治療、監(jiān)測和預(yù)后評(píng)估提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。XT－2000i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀是日本Sysmex公司在XE－2100的技術(shù)基礎(chǔ)上改進(jìn)后的新型血細(xì)胞分析儀，作者對(duì)其提供的結(jié)果與顯微鏡檢查結(jié)果進(jìn)行比較，以期掌握二者之間差異的特征?，F(xiàn)將血細(xì)胞分析儀有異常提示的113例標(biāo)本進(jìn)行顯微鏡分類比較，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集2012年1～3月本院住院腫瘤患者的乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）抗凝全血標(biāo)本250例，共篩選出白細(xì)胞總數(shù)及分類異常的陽性標(biāo)本113例。

1.2 儀器與試劑 奧林巴斯顯微鏡，Sysmex XT－2000i五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，Sysmex公司配套質(zhì)控品、原裝校準(zhǔn)品、試劑、瑞氏－姬姆薩復(fù)合染色液。

1.3 方法

1.3.1 儀器法 儀器每日質(zhì)控在控，用原裝質(zhì)控品進(jìn)行調(diào)校，標(biāo)本為用EDTA－K2抗凝真空管采取血樣1.5～2mL，輕輕顛倒混勻20次，嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)范進(jìn)行血細(xì)胞分析檢測。

1.3.2 手工法 將儀器檢測的白細(xì)胞總數(shù)及分類異常的陽性標(biāo)本113例、抽取的白細(xì)胞總數(shù)正常標(biāo)本59例標(biāo)本分別推制厚薄適宜血片，用瑞氏－姬姆薩復(fù)合染液進(jìn)行染色，嚴(yán)格按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［1］，由經(jīng)驗(yàn)豐富的老師帶領(lǐng)在油鏡下計(jì)數(shù)白細(xì)胞，每張血片數(shù)細(xì)胞100個(gè)，按其形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。所有標(biāo)本由采血、上機(jī)到涂片染色均在2h內(nèi)完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析及配對(duì)t檢驗(yàn)，以人工顯微鏡檢查為標(biāo)準(zhǔn)，與儀器法進(jìn)行比較。

2 結(jié) 果

2.1 白細(xì)胞正常組鏡檢法與儀器法白細(xì)胞分類結(jié)果比較 白細(xì)胞正常范圍內(nèi)，白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞百分率鏡檢法明顯高于儀器法（P＜0.01），單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞百分率鏡檢法明顯低于儀器法（P＜0.01），嗜堿性粒細(xì)胞百分率鏡檢法也明顯低于儀器法（P＜0.01）；淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞百分率兩種方法顯示出較好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)（r）分別為0.99、0.89、0.99、0.94，而嗜堿性粒細(xì)胞百分率兩種方法相關(guān)性較差，r為0.42，結(jié)果見表1。

表1 WBC為（3.5～9.5）×109／L時(shí)兩種方法 WBC分類結(jié)果比較（±s，%）

表1 WBC為（3.5～9.5）×109／L時(shí)兩種方法 WBC分類結(jié)果比較（±s，%）

細(xì)胞種類 血細(xì)胞分析儀 手工鏡檢r P淋巴細(xì)胞23.74±8.74 25.36±8.52 0.99 0.000單核細(xì)胞 9.43±3.87 6.55±3.73 0.89 0.000中性粒細(xì)胞 64.13±10.10 66.16±9.97 0.99 0.000嗜酸性粒細(xì)胞 2.54±3.07 1.67±2.46 0.94 0.000嗜堿性粒細(xì)胞0.26±0.29 0.25±0.39 0.42 0.001

2.2 白細(xì)胞減低組鏡檢法與儀器法白細(xì)胞分類結(jié)果比較WBC＜3.5×109／L時(shí)，白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞百分率鏡檢法明顯高于儀器法（P＜0.01），單核細(xì)胞與嗜酸性粒細(xì)胞百分率則是鏡檢法明顯低于儀器法（P＜0.01），而嗜堿性粒細(xì)胞百分率兩種方法無差異（P＞0.05）；淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞與嗜酸性粒細(xì)胞百分率兩種方法顯示出較好的相關(guān)性，r分別為0.99、0.93、0.97、0.91，而嗜堿性粒細(xì)胞百分率兩種方法相關(guān)性較差，r為0.11，結(jié)果見表2。

表2 WBC＜3.5×109／L時(shí)兩種方法 WBC分類結(jié)果比較（±s，%）

表2 WBC＜3.5×109／L時(shí)兩種方法 WBC分類結(jié)果比較（±s，%）

細(xì)胞種類 血細(xì)胞分析儀 手工鏡檢r P淋巴細(xì)胞39.90±16.31 41.92±17.14 0.99 0.000單核細(xì)胞 10.10±8.34 5.85±5.71 0.93 0.000中性粒細(xì)胞 46.47±19.29 49.74±19.60 0.97 0.000嗜酸性粒細(xì)胞 3.14±3.84 1.34±2.91 0.91 0.000嗜堿性粒細(xì)胞0.38±0.45 0.53±0.84 0.11 0.398

2.3 WBC增高組的鏡檢法與儀器法 WBC分類結(jié)果比較WBC＞9.5×109／L時(shí)，白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)中淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞百分率鏡檢法明顯高于儀器法（P＜0.01），單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞與嗜堿性粒細(xì)胞百分率則是鏡檢法明顯低于儀器法（P＜0.01）；各細(xì)胞百分率兩種方法均顯示出較好的相關(guān)性，r分別為0.99、0.94、0.99、0.98、0.81，結(jié)果見表3。

表3 WBC＞9.5×109／L時(shí)兩種方法 WBC分類結(jié)果比較（±s，%）

表3 WBC＞9.5×109／L時(shí)兩種方法 WBC分類結(jié)果比較（±s，%）

細(xì)胞種類 血細(xì)胞分析儀 手工鏡檢r P淋巴細(xì)胞13.47±9.22 14.88±9.30 0.99 0.000單核細(xì)胞 5.65±3.28 3.54±2.96 0.94 0.000中性粒細(xì)胞 79.63±10.43 80.76±10.35 0.99 0.000嗜酸性粒細(xì)胞 1.15±2.84 0.75±2.63 0.98 0.000嗜堿性粒細(xì)胞0.09±0.13 0.06±0.30 0.81 0.000

2.4 WBC正常、增高或減低各組儀器法與鏡檢法WBC分類結(jié)果比較 除WBC正常組單核細(xì)胞外，其余各細(xì)胞二者的相關(guān)性隨著WBC數(shù)量的增高而增高，結(jié)果見表4。

表4 兩種方法相關(guān)性比較

3 討 論

WBC正常、增高或減低各組，淋巴細(xì)胞鏡檢法均明顯高于儀器法（P＜0.01），可能是儀器不能夠識(shí)別異型淋巴細(xì)胞的緣故，從而導(dǎo)致鏡檢法淋巴細(xì)胞百分率增高，與文獻(xiàn)［2］報(bào)道一致；而嗜酸性粒細(xì)胞鏡檢法明顯低于儀器法（P＜0.01），說明儀器在檢測低比例細(xì)胞時(shí)檢出率較高。各組嗜酸性粒細(xì)胞百分率儀器法與鏡檢法相關(guān)性良好，這正是五分類血細(xì)胞分析儀的優(yōu)勢，它彌補(bǔ)了三分類血細(xì)胞分析儀不能分類嗜酸性粒細(xì)胞的不足，為嗜酸性粒細(xì)胞明顯增高的病例提供了準(zhǔn)確信息，有利于臨床正確診斷原發(fā)性嗜酸性粒細(xì)胞增多癥［3］。由表4結(jié)果分析，除WBC正常組單核細(xì)胞外，各種細(xì)胞兩種方法的相關(guān)性隨著白細(xì)胞數(shù)量的增多而增高，說明一定的白細(xì)胞數(shù)量是儀器法能夠正確分類的前提。WBC正常、增高或減低各組中，單核細(xì)胞百分率儀器法明顯高于鏡檢法（P＜0.01），其原因是儀器不能準(zhǔn)確區(qū)別大淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞，更不能識(shí)別異型淋巴細(xì)胞，常將其歸為單核細(xì)胞。

從本組的結(jié)果可見XT－2000i血細(xì)胞分析儀能準(zhǔn)確分類計(jì)數(shù)非白血病腫瘤患者的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，它使檢驗(yàn)人員從繁重的、低效率的工作中解放出來，是臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行體外診斷非常有用的血細(xì)胞分析儀［4］；但儀器對(duì)嗜堿性粒細(xì)胞分類結(jié)果的可信度相對(duì)較低，對(duì)有異常細(xì)胞存在的標(biāo)本有可能不分類。總之，在日常的血細(xì)胞分析中，不能過分依賴血細(xì)胞分析儀，因多種因素會(huì)出現(xiàn)假性白細(xì)胞計(jì)數(shù)，這類儀器在鑒別血細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)方面還不夠完善，儀器法僅可作為血細(xì)胞分析的一種過篩手段［5］。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)儀器自行規(guī)定復(fù)查的規(guī)則，這是國內(nèi)［6］在使用各種型號(hào)和不同檔次的血液細(xì)胞分析儀的必然趨勢。因此，高度重視和理解血細(xì)胞儀散點(diǎn)圖的報(bào)警信息，同時(shí)對(duì)血涂片進(jìn)行染色觀察鏡檢；有異常結(jié)果也要及時(shí)與臨床醫(yī)師聯(lián)系，防止疾病的漏檢、漏診，給臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

［1］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3南京：東南大學(xué)出版社，2006：121－135.

［2］李筱梅，楊玉寶，李承文，等.白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法學(xué)比較［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，9（2）：100.

［3］徐金花，林賽玲，張麗娟，等.血細(xì)胞分析儀與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法測定嗜酸性粒細(xì)胞的比較［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，11（6）：1805－1806.

［4］宋月雁.XT－2000i全自動(dòng)血液分析儀臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2006，7（13）：2196－2198.

［5］許順姬.SysmexSE－9000血液分析儀白細(xì)胞異常信息的相關(guān)分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2007，34（21）：4155.

［6］孫芾，王厚芳，于俊峰，等.血細(xì)胞顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的制定及臨床應(yīng)用［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（2）：155－157.