蛹蟲草不同菌株的栽培試驗

俞燕芳 毛平生 鄧真華 尹志亮 張春云

( 江西省蠶桑茶葉研究所 330203)

蛹蟲草，又稱北冬蟲夏草、北蟲草，是一種珍貴的中藥材。蛹蟲草子實體除了富含氨基酸、維生素及鈣、錳、鋅、硒等微量元素外，還含有蟲草素、蟲草多糖、蟲草酸、SOD 等多種生物活性物質，具有增強免疫力、滋肺補腎、止血化痰、抑制腫瘤生長等藥用價值［1～2］。近年來，關于蛹蟲草人工栽培技術方面的報道很多，蛹蟲草人工培育成功率高，生長周期短，基本滿足大規模生產要求，已投入市場銷售。

目前市面上的蛹蟲草品種多樣，產品良莠不齊。選擇適合本地區生產的優良菌株是蛹蟲草栽培實現高產、優質的關鍵。由于分布地域不同，而且蛹蟲草菌株種性不穩定，極易出現性狀分離，不同的蛹蟲草品種生物學特性和栽培學特性有所不同［3～5］。筆者通過對3 個蛹蟲草菌株進行菌落培養、液體菌種培養和子實體栽培，比較不同菌株菌絲生長狀況、子實體產量和質量等方面的差異，篩選出1 個優良菌株，為蛹蟲草的人工栽培提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株市售的蛹蟲草菌株B1(購自北京)、J1(購自江蘇)和H1(購自河南)。

1.1.2 培養基

①PDA 培養基:馬鈴薯20%，瓊脂粉0. 5%，KH2PO40.3%，MgSO4·7H2O 0.1%，葡萄糖2.5%，蛋白胨0.3%。

②液體培養基:馬鈴薯20%，KH2PO40. 3%，MgSO4·7H2O 0.1%，葡萄糖2.5%，蛋白胨0.3%。

③栽培培養基:大米 30g + 蠶蛹粉 5g+營養液4 0 mL(KH2PO40. 3% ，MgSO4·7 H2O 0.05%，葡萄糖2.5%，蛋白胨0.3%)。

1.2 方法

1.2.1 菌落培養

挑取直徑5mm 左右的蛹蟲草菌塊接種至9cmPDA 平板中央，置于23℃恒溫培養18d。調查菌絲生長速度(菌落半徑/培養時間)、菌絲色澤、邊緣整齊度和菌落角變率(角變面積/菌落總面積)。

1.2.2 液體菌種培養

挑取直徑5mm 左右的蛹蟲草菌塊接種到裝有40mL 液體培養基的三角瓶中，18℃遮光靜置培養2d，然后在搖床上23℃、120r/min 振蕩培養7d，比較各菌株的菌球數(個/10mL)和菌絲形態;菌株成熟后過濾取菌絲，8 000r/min 離心10min，60℃烘干至恒重，稱重。

1.2.3 子實體培養

在無菌條件下取10mL 活化的菌株懸液，接入栽培培養基中培養。初始階段遮光培養，室溫控制在17 ～20℃。待表面布滿蟲草菌絲后，將溫度提高到22 ～25℃，培養至菌絲吃透培養基后，施以1 000lx、12h/d 的光照，同時進行晝夜溫差刺激，將白天溫度設為20℃，晚上設至10℃，菌絲體由白色逐漸轉為桔黃色。待培養基表面有突起，并形成小米粒狀原基時，適當通風，補充新鮮空氣，保持室溫在21 ～23℃，空氣相對濕度提高至80% ～90%，培養50d 后采收子實體，50℃烘干，稱重。比較菌絲封面時間、轉色時間、出現原基時間、子實體形態和每瓶干重。

2 結果和分析

2.1 不同菌株菌落培養試驗結果

總體來看，3 個菌株的菌絲生長都呈現慢－快－慢的趨勢。由表1 可以看出，H1 菌株長勢最差，平均日均生長只有1.86mm。B1 菌絲生長最快，而且菌落整齊，菌絲致密潔白，匍匐狀緊貼培養基生長，邊緣整齊，氣生性中等，角變率較小，具有優良菌株的性狀。

表1 不同菌株菌落培養試驗結果

2.2 不同菌株液體培養試驗結果

接入液體培養基后，3 個菌株菌絲生長表現差異顯著，具體見表2。菌株B1 菌絲濃密，菌球數較多，菌絲產量較高。H1 菌球數和菌絲干重均最低。

2.3 不同菌株子實體栽培試驗結果

在遮光培養過程中，B1 菌株的菌絲生長速度高于J1 和H1，由表3 可以看出，培養7d 部分瓶中的菌絲已布滿培養基表面，而H1 菌株需要8 ～10 天。施以光照后，三個菌株的轉色時間大致相同，均為2d，B1 菌株出現原基時間早于J1 和H1。3 個菌株的商品性也有不同，H1 的子實體產量最低，且子實體多頭狀、帶狀、片狀等不規則形，表面H1 菌株已出現退化。B1 和J1 的子實體產量大致相同，但B1子實體較粗，商品性狀優于H1。

表2 不同菌株液體菌株培養試驗結果

表3 不同菌株子實體培養試驗結果

3 結論與討論

研究結果表明，3 個菌株的生物學和栽培學特性均有明顯不同，菌株B1 菌絲生長速度最快，菌絲產量高，子實體產量高，且粗長均勻，顏色桔黃，具有較高的經濟價值，可作為生產用菌株。J1 次之，H1已明顯出現退化癥狀，應棄之不用。

蛹蟲草不同菌株表現差異較大，而且種性容易出現變異和退化，所以在大規模栽培前進行菌株子實體栽培、生長條件和育種試驗是十分必要的。目前蛹蟲草人工栽培需要人工控溫控濕，耗能較大，為延長蛹蟲草生產季節和減少人工控溫的能耗，如果能在現有優良菌株的基礎上選育出適合在本地自然氣溫條件下生長的菌株，對蛹蟲草大規模生產將具有重要意義。

［1］代君君，范濤，吳傳華，等. 人工栽培蛹蟲草研究的概述［J］.安徽農業科學，2007，35(18):5469 ～5471.

［2］桂仲爭，朱雅紅.蛹蟲草的人工培育、有效成分及藥理作用研究進展［J］.蠶業科學，2008，34(1):178 ～1841

［3］李森柱，夏鳳娜，楊小兵.蛹蟲草5 個選育菌株的品比試驗［J］.中國食用菌，2006，25(6):15 ～19.

［4］孫軍德，房琳琳，王穎，等. 蛹蟲草不同菌株的生物學特性及系統發育研究［J］.沈陽農業大學學報，2011，42(3):306～310.

［5］田雪梅.兩個蛹蟲草菌株的人工栽培試驗比較［J］.食藥用菌，2012，20(4):229 ～230.