李 維,蘭海楠,付志玲,楊艷紅,郭 風,劉 禹,張 輝,崔煥忠,趙 雪,吳天成,馬思慧,李雁強,鄭 鑫
(吉林農業大學動物科技學院,吉林 長春130118)
英國科學家Bayliss等[1]從動物胃腸中發現了促胰腺素,這是人類首次發現活性肽類的物質。生物活性肽(Biologicallyactivepeptides,BAP)是由25個天然氨基酸以不同組成和排列方式構成的,分子量一般小于6 000Da,在構象上比較松散,是對生物機體的生命活動有益或具有特定生理作用的多功能化合物的總稱[2]。其易消化吸收,并對生物體有降血壓、降膽固醇、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、提高機體免疫力等作用,在生產中能夠改善飼料的適口性、提高動物生產性能,食用安全性較高。
因生物活性肽結構復雜,功能多樣,種類較多,分布廣泛,所以學術界對生物活性肽的分類方法并不統一。按其來源可分為內源生物活性肽和外源生物活性肽;按其生理功能可分為降壓活性肽、降膽固醇活性肽、抗菌活性肽、抗病毒活性肽、抗腫瘤活性肽、抗氧化活性肽、抗凝活性肽、免疫活性肽等;按其材料可分為海洋生物活性肽和陸地生物活性肽;按其形成原因分為天然生物活性肽和人工合成生物活性肽。
2.1 降壓活性肽 趙秀娟等研究發現,在高脂飼料飼喂的Wistar大鼠飼料中按照10g/kg的體質量均勻混合大豆活性肽粉,可顯著降低血清TC(26.0%)和總甘油三酯(24.4%)的含量,而對高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)無影響。Zhao等[3]以海參(Acaudinamolpadioidea)的體壁為研究對象,采用反復水提蛋白、復合酶水解蛋白等方法,最終純化得到1個抑制ACE的IC50為15.9μmol/L的活性多肽,經腸道消化酶作用可增加其活性,并經試驗驗證該肽能夠顯著降低SHR鼠的血壓。ByunHG等[4]首先借助三步膜反應器用多種酶連續水解阿拉斯加雪魚皮,然后利用離子交換色譜、反相高效液相色譜和凝膠過濾色譜分離其水解產物,得到2種分子量在0.9~1.9kDa之間的活性肽,此肽能夠抑制ACE的活性。
2.2 抗菌活性肽 抗菌肽無特殊的受體,是通過物理作用造成細胞膜穿孔從而達到抑菌效果的。許玉澄等研究發現,生物活性肽可促進腸道內有益菌的生長,促進營養的消化吸收和傷口愈合,并有較強的抗菌作用。Oren等[5]從豹鰨中分離得到一種能夠溶解細菌細胞壁的33個氨基酸組成的抗菌肽,其抗菌活性比蜂毒素更強。Rescigno等[6]研究表明,甲殼動物的血細胞溶泡上清液中含有殺滅細菌的物質。
2.3 抗氧化活性肽 Chen等[7]從大豆蛋白酶解物中分離得到了6種氨基酸序列為Ser-Gly-Phe-Ala-Pro、Ala-Glu-Ile-Asn-Met-Pro-Asp-Tyr和Ile-Gln-Gln-Gly-Asn的抗氧化活性肽,經驗證均有抗亞油酸脂質過氧化作用。進一步研究發現,大豆肽的抗氧化活性主要取決于其本身的氨基酸組成、排序和構型,并推斷咪唑基團的結合位點正確與否是決定其抗氧化活性的重要條件之一。陳美珍等[8]從大豆分離蛋白酶解物中分離出了具有清除羥自由基的能力的功能肽,并確定其清除能力主要決定于肽序列和氨基酸側鏈基團。裴新榮等[9]從深海鮭魚魚皮的酶解產物中分離到小分子的海洋膠原肽,經SD大鼠活體試驗證明,可明顯改善D-半乳糖引起的抗氧化應激損傷,并可顯著提高超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)的活性,顯著降低丙二醛(MDA)水平。Chen Shasha等[10]研究表明,肌肽可作為儲存熟肉的氧化型抗酸敗劑,肌肽可抑制鐵、血紅蛋白及脂氧合酶催化的脂質氧化作用。杜偉和王恬[11]研究表明,胰島素和酪蛋白的酶解物對仔豬的肝臟的促生長效果顯著,并能提高其抗氧化能力。
2.4 免疫調節活性肽 潘翠玲等研究表明,用添加大豆蛋白酶解的日糧飼喂仔豬,可顯著促進其胸腺、脾臟和腹股溝淋巴結的生長。李清研究發現,生物活性肽能顯著提高鯉魚血液免疫球蛋白IgM和補體C4的量,并能降低T4的分泌量和血液中尿素的水平,并且發現隨著生物活性肽的濃度的增加其作用越明顯,存在一定的計量依賴性。RuiyueY等[12]研究表明,鮭魚蛋白海洋蛋白肽能顯著提高小鼠的細胞免疫和體液免疫功能,并發現其免疫調節功能與刺細胞因子的分泌有關。
2.5 抗腫瘤活性 McCubbin[13]等從念珠藻(nostocsp.)中提取了7種多肽,經小鼠試驗驗證其對小鼠移植乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌都具有強列的抑制活性。Edwards等[14]從鞘絲藻(lyngbymajuscula)中分離出2種對小鼠P388白血病細胞有抑制作用的脂肽,并測定其IC50均為0.4mg/L。Bernay等[15]人從牡蠣勻漿液中分離得到一種低分子牡蠣活性肽1(bioactivepeptidesofoyster1,BPO-1),經試驗表明,BPO-1可促使癌細胞發生形變,可明顯抑制胃腺癌和肺腺癌細胞的分裂增殖。Huber等[16]研究認為,槲寄生肽能顯著增強粒性白細胞的氧化和吞噬作用。
2.6 降低膽固醇活性肽 陳路等試驗研究發現,雙甘肽Gly-Gly的吸收率比甘氨酸高2~10倍,某些小肽能夠直接被動物吸收,參與生理活動和代謝調節。Yasuyuki等[17]從大豆球蛋白的酶解物中獲得了一種氨基酸序列為 Leu-Pro-Tyr-Pro-Arg的活性肽,研究證明,該活性肽具有降低膽固醇和減肥的作用。姜毓君等發現,抑制緊張素轉化酶活性的物質有顯著降血壓的作用。
3.1 活性肽對飼料適口性的影響 活性肽的氨基酸序列不同其作用也各不相同,有許多肽能夠增進食品的酸甜苦辣的味覺,如苦味肽:Gly-Leu,Phe-Leu,Leu-Phe,Leu-Lys,Arg-Leu和 Arg-Leu-Leu;甜味 肽 Aspartame 等;酸 味 肽 Lys-Gly-Asp-Glu-Ser-Leu-Ala等;各種食品感官肽的作用也不盡相同,有一些肽還被用做各種飼料的化學誘食劑。Fasano認為,短肽比氨基酸更易于吸收,能增強營養物質的吸收。李明等報道,大米蛋白風味肽能有效抑制苦味、增強食品黏度、改善風味,可作為安全可靠的寵物食品。Jin等[18]研究表明,從大米蛋白的酶解產物中分離出來一種可以代替谷氨酸鈉的活性肽,呈現鮮味,該活性肽可與礦物質元素螯合,可減少礦物質元素之間的競爭,還可用于肉制品、即食米飯、湯料、沙司、肉汁以及其他可口食品中。
3.2 活性肽對動物的影響 張青青等將一定量的活性肽添加到仔豬日糧中,發現能顯著提高蛋氨酸、賴氨酸和蘇氨酸的表觀消化率。Dong Shiyuan等[19]研究表明,生物活性肽對斷奶后14~42日齡的仔豬有促生長作用,并且發現生物活性肽比噴霧血粉的增重效果明顯,但飼料轉化率差異不大。孫占田等研究結果表明,小肽和血漿蛋白粉對仔豬有相似的促生長作用。Margolin[20]研究報道,用3%DPS代替血漿蛋白粉飼喂斷奶仔豬,4周后測其日增重差異不大,而料肉比略優與血漿蛋白粉。王恬等研究報道,在仔豬基礎日糧中添加2%活性肽,可顯著增加腸道絨毛的長度并減小隱窩深度,并能減輕小腸絨毛萎縮和隱窩加深的程度。汪官保[21]研究發現,在哺乳仔豬的日糧中添加植物活性肽比魚粉和血漿蛋白粉更能促進仔豬消化器官的發育,其中發現4%植物活性肽比魚粉更能促進胃和胰臟的發育。Cordoba等發現,用大豆水解寡肽飼喂患有產腸毒素大腸桿菌病的仔豬,能促進仔豬的健康恢復,表明該活性肽可促進受損上皮細胞的恢復。
王碧蓮等[22]研究報道,蛋雞飼糧中添加肽制劑,可顯著提高蛋雞的產蛋率和蛋重,降低料蛋比。Fehlbaum等研究表明,豬小腸抗菌肽可顯著增加雛雞小腸絨毛長度,可使絨毛變圓變粗,表面凹溝增多,從而增加小腸的吸收面積。朱碧英等研究表明,用蝦蛋白肽飼喂蛋雞可顯著提高處于衰減期雞的產蛋率。張功研究表明,在蛋雞日糧中添加120mg/kg濃度的大豆活性肽,可顯著提高蛋雞產蛋率,降低料蛋比。楊玉榮[23]研究表明,大豆活性肽能刺激肉雞腸道上皮內淋巴細胞和IgA生成細胞數量的增加。
黃滄海等研究發現,抗菌肽具有和黃霉素相似的促生長和抑制病原菌的作用,并經試驗驗證,高劑量的抗菌肽可顯著提高羅非魚的肥滿度。李清研究表明,在草魚日糧中加入生物活性肽可提高其生長速度,提高其存活率,并能促進礦物質元素的吸收和利用。于輝等研究表明,在草魚日糧中分別添加0.5%酶解酪蛋白、0.5%酪蛋白和0.5%酸解酪蛋白,發現添加0.5%酶解酪蛋白的草魚的相對生長率、蛋白效率比、飼料效率比、血漿中鎂含量及小肽總量均顯著提高,并作用效果好于其他兩組。
生物活性肽屬于多功能因子,隨著各種生物活性的不斷發現,對其生理功能的不斷探究,越來越受到人們的關注。各國對活性肽的研究日益活躍,市場上活性肽的種類和數量不斷增加,因活性肽制品高度安全、性能卓越、能防病抗病等較全面的功能作用,活性肽制劑將成為一種必不可少的飼料添加劑,同時也為進一步發展蛋白質營養理論開辟一條新路。
[1] Bayliss W M,Starling E H.The mechanism of pancreatic secretion[J].Journal of Physiol,1902,28(5):325-353.
[2] 王興涌,范華,李棟.生物活性肽功能和作用研究進展[J].預防醫學情報雜志,2009,9(25):730-732.
[3] Zhao L,Su W,Hu H G,etal.Research progress of collagen peptides Food Sci,2005,26(9):578-581.
[4] ByunH G,Kim Y T,Kim S K,etal.Isolation and characterization of antioxidative peptides from gelatin hydrolysate of Alaska Pollack skin[J].J of agricultural and food chemistry,2001,49(4):1984-1989.
[5] Oren Z,Shai Y.Selective lysis ofbacteria butnotmamma-lian cells by diastereomers of melittin:structure-function study[J].Biochemistry,1997,36(7):1826-1835.
[6] Rescigno M,Chieppa M.Gut-level decisions in peace and war[J].Nature Medicine,2005,11(3):254-255.
[7] Chen H H,Zhou H J,Wu G D,etal.Inhibitory effects of arte-sunate on angiogenesis and on expressions of vascular endothelial growth factor and VEGF receptor KDR/flk-1[J].Pharmacology,2004,71(1):1-9.
[8] 陳美珍,余杰,郭惠敏.大豆分離蛋白酶解物清除羥自由基作用的研究[J].食品科學,2002,23(1):43-47.
[9] 裴新榮,楊睿悅,張召峰,等.海洋膠原肽抗皮膚老化作用的試驗研究[J].中華預防醫學雜志,2008,42(4):235-238.
[10]Chen Shasha,Zhao Nian,Jin Rong,etal.The research and utilization rice protein[J].The Food Industry Technology,2007,28(1):231-234.
[11]杜偉,王恬.乳源性生物活性肽對新生IUGR仔豬肝臟抗氧化功能的影響[J].畜牧與獸醫,2007,39(11):12-13.
[12]Ruiyue Y,Zhaofeng Z,Xinrong P,etal.Immunomodulatory effects ofmarine oligopeptide preparation from Chum Salmon(Oncorhynchus keta)inmice[J].Food Chemistry,2009,113(2):464-470.
[13]McCubbin J A,Maddes M L,Lautens M.Total synthesis of cryptophycin analogues via a scaffold approach[J].Org Lett,2006,8(14):2993-2996.
[14]Edwards D J,Marquez B L,Nogle L M,etal.Structure and biosynthesis of the jamaicamides,new mixed polyketide-peptide neurotoxins from the marine cyanobacterium lyngbta majuscula[J].Chem Biol,2004,11(6):817-833.
[15]Bernay B,Baudy-Floc'h M,Zanuttini B,etal.Ovarian and sperm regulatory peptides regulate ovuration in the oyster Crassostrea gigas[J].Mol Reprod Dev,2006,73(5):607-616.
[16]Huber R,Classen K,Werner M,etal.In vitro immunoreactivity towards lectin-rich or viscotoxin-rich mistletoe(Viscum album L)extracts Iscador applied to healthy individuals[J].Arzneimittelforschung,2006,56(6A):447-456.
[17]Yasuyuki T,Yoshikawa M.Introduction of a lowmolecularweight agonist peptide for complemeant C3areceptor intosoybean proglycinin AlaBlb subunit by site directed muta-genesis[J].Biosci Biotechnol Biochem,2001,65(5):1202-1205.
[18]Jin Rong,Zhao Nian,Chen Shasha,etal.The research and utilization rice protein[J].The Food IndustryTechnology,2007,28(1):231-234.
[19]Dong Shiyuan,i Li Bafang,Zhao Yuanhu,etal.A novel ACE inhibitory peptide isolated from Acaudina molpa-dioidea hydrolysate[J].Peptides,2009,30(6):1028-1033.
[20]Margolin K,Longmate J,Synold T W.Dolastatin-10in melanoma:aphaseⅡand pharmokinetic trial of the California Cancer Consprtium [J].Invest New Drugs,2001,19(4):335-339.
[21]汪官保.植物活性肽對哺乳仔豬生產性能的影響及其促生長機理的研究[D].西寧:青海大學,2007.
[22]王碧蓮.薛曉生.周圍小肽營養研究新進展[J].飼料研究,2000(06):19-20.