喻 敏 李華軍
(中國人民解放軍95924部隊衛生所,湖北 武漢 430313)
腦血管病是嚴重危害老年人的身體健康和生命的主要疾病。隨著研究的不斷深入,發現急性腦梗死病灶是由缺血中心區、周圍的缺血豐富帶組成,腦組織缺血后大量白細胞浸潤,細胞內鈣超載、大量氧自由基生成,神經細胞產生不可逆的損害,引起一系列炎癥反應及損傷。其中血液成分的改變,血液中有形成分如(黏附分子)與多種炎性反應參與等在腦血管淤積〔1〕,阻塞血管,而導致腦梗死的發生。本研究擬利用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)對急性腦梗死患者外周血細胞間黏附分子(CD54)和血小板黏附分子(CD62P)的表達進行研究。
1.1 病例選擇 急性腦梗死:男60例,女30例,共90例;年齡55~70歲,平均63歲。符合第四屆全國腦血管病會議制定標準。(1)根據病史、發病時癥狀、體征及神經科體格檢查、影像學檢查(頭部CT或頭部MRI平掃)病程在7 d內的急性腦梗死病例;(2)神經功能缺失程度計分大于分;(3)無嚴重肝腎疾病、血液系統疾病、出血性疾病依據前循環腦梗死、后循環腦梗死的發生分為:前循環腦梗死(發病48 h~7 d):男40例、女15例、年齡55~68歲平均61.5歲;后循環腦梗死(發病48 h~7 d):男20例、女15例、年齡55~70歲 平均62.5歲;正常對照組為我院收集體檢中心體檢均為健康人員,除外神經疾病,共23例,其中男10例、女13例、年齡55~80歲,平均69歲。
1.2 研究方法 標本采集及測定方法:所有檢測對象晨起后空腹采集靜脈血3~5 ml,30 min內制備滅活,置于-20℃冰箱內儲存。采用酶聯免疫吸附法測定血清中CD54和CD62P水平;酶標試劑盒為上海富眾(亞平寧)生物科技發展有限公司生產。操作的流程均按照說明書進行試驗,應用ELISA對抗體夾心法及ELISA間接法〔2〕。
1.3 統計學方法處理 應用SPSS10.0軟件包進行統計分析軟件分析數據,組間進行t檢驗,各項指標的相關性采用直線回歸分析。
腦梗死患者 CD54〔(455.31±56.26)ng/ml〕和 CD62P〔(1 479.43± 106.5)ng/ml〕水平與健康對照組 〔(184±46.1)、(577.03±58.23)ng/ml〕比較明顯升高(P<0.01)。
在急性腦梗死的發病過程中,神經細胞完全缺血缺氧后,十幾秒出現電位變化,導致大腦皮層生物電活動完全消失,腦內動脈血流中斷持續5 min,神經細胞就可以出現不可逆性損害,細胞內ATP供應不足,釋放大量結合鈣,出現嚴重的細胞內鈣超載〔3〕。大量氧自由基生成,炎性介質的產生,造成神經變性、壞死等腦組織嚴重的病理變化〔4〕。CD54屬于黏附因子免疫球蛋白超家族,存在內皮細胞表面,在體內分布廣泛。發生病變情況下,如內皮細胞、Th細胞、神經膠質細胞。大量研究證實,腦缺血損傷是一個炎癥反應過程,外周血黏附性增高可以與缺血損傷細胞凋亡關系密切,腦梗死發生的嚴重程度有關〔5〕。CD54主要介導細胞黏附及活化,而Th細胞及血管內皮細胞黏附后引起一系列細胞反應及鈣超載。本研究表明,急性腦梗死患者血清中CD54水平明顯高于對照組,與病變程度有明顯關系,腦梗死病情越嚴重黏附分子水平越高。
CD62P主要分布在內皮細胞及α顆粒,是血小板膜表面的一個富含半胱氨酸。高度糖基化的糖蛋白,經組胺、補體、氨基酸及凝血酶等刺激后迅速與質膜融合,在血小板表面進行表達,開啟了血小板的細胞、內皮細胞相互黏附作用。
血中CD62P基礎水平來源于血小板,在病理狀態下,CD62P水平活化內皮細胞分泌組織發生炎癥或系列損傷時,可通過不同機制增強人內皮細胞CD62P。mRNA持續性轉錄,這些均是CD62P參與炎癥反應的重要機制〔6〕。CD62P在急性腦梗死發生發展中,由于血管內皮細胞的損傷,從而導致內皮下膠原暴露,使血小板不斷流入暴露的膠原下,使血小板被活化,血小板“膜顆粒”在瞬間出現易位,在血小板表面表達,可對活化的血小板進行識別〔7〕。在本實驗研究中,急性腦梗死患者CD62P的表達明顯高于正常對照組,更進一步揭示了CD62P表達在促使梗死形成。血小板激活中起關鍵性作用。本實驗研究證明CD62P表達與神經功能缺損程度呈正相關,腦梗死病情好轉時CD62P表達量減少或不表達,進展性腦梗死病情進一步加重趨勢時CD62P表達明顯增加。因此通過對CD62P的檢測科判斷腦梗死預后程度,同時指導治療。綜合上述兩種黏附因子CD54、CD62P的檢測,發現CD54、CD62P在急性腦梗死發病的病理生理過程中的重要參與者,它對動脈粥樣硬化斑塊及血栓形成起重要作用。因此,在腦梗死發病早期,CD54、CD62P是急性腦梗死發病的病理生理過程中的重要參與者,它對動脈粥樣硬化斑塊及血栓形成起重要作用,所以CD54、CD62P在血清中的含量是診斷和預后程度的重要指標。
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