探討實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA在臨床中的應(yīng)用

王金梅

（吉林省四平市傳染病醫(yī)院 檢驗(yàn)科 ，吉林 四平 136000）

探討實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA在臨床中的應(yīng)用

王金梅

（吉林省四平市傳染病醫(yī)院 檢驗(yàn)科 ，吉林 四平 136000）

目的 分析并探討實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA在臨床中的應(yīng)用。方法 首先要對(duì)患者采用血清學(xué)標(biāo)志物這種方法檢測(cè)，進(jìn)一步確定他是乙型肝炎的患者。再次就是選擇500例患者進(jìn)行檢測(cè)，這樣有利于保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。結(jié)果 實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)與采用血清學(xué)標(biāo)志物方法檢測(cè)的乙肝病毒數(shù)據(jù)大致一致，但是采用熒光PCR方法檢測(cè)的病毒DNA數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確，更詳細(xì)。大三陽(yáng)、小三陽(yáng)患者血清中PCR的結(jié)果拷貝數(shù)均較高，而HbsAb（+）或HbsAg（-）的標(biāo)本PCR有個(gè)別陽(yáng)性結(jié)果[2]。結(jié)論 實(shí)時(shí)熒光PCR法可以準(zhǔn)確檢測(cè)出乙肝病毒和其詳細(xì)數(shù)據(jù)，這說(shuō)明實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA具有良好的臨床意義，值得臨床使用。

乙肝病毒；血清學(xué)；拷貝數(shù)目

以前要想檢測(cè)患者是否是乙性肝炎病毒攜帶者，大部分都是采用血清學(xué)標(biāo)志法，要采集患者的血液進(jìn)行檢驗(yàn)，如果操作適當(dāng)不當(dāng)，還容易造成工作人員也感染乙肝病毒。所以各個(gè)國(guó)家的醫(yī)學(xué)專家積極尋找其他可以檢測(cè)乙型肝炎病毒DNA的方法，最終發(fā)現(xiàn)熒光PCR方法可以得到準(zhǔn)確的乙型肝炎病毒DNA的數(shù)據(jù)，此文章就是在探討和分析實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA在臨床中的應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

首先選擇可能攜帶乙型肝炎的患者，這些患者最好是年齡跨度較大，在15～70歲的年齡段中都有患者存在，這樣更有利于實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，防止出現(xiàn)偏差。然后采用血清學(xué)標(biāo)志法進(jìn)一步確定他們是乙肝患者，這樣可以使實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差較小。最重要的是要記錄好乙型肝炎患者中乙肝病毒DNA的數(shù)據(jù)，并且要注意保存仔細(xì)。然后將這500位乙肝病毒攜帶者和患者，再用熒光PCR的方法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，然后仔細(xì)記錄這些數(shù)據(jù)。最后把用血清學(xué)標(biāo)志法檢驗(yàn)的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)與用熒光PCR方法檢驗(yàn)的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)做比較，然后把比較的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并用論文的形式呈現(xiàn)出來(lái)。

1.2 方法

將用血清學(xué)標(biāo)志法檢驗(yàn)的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)作為對(duì)照組，然后把用熒光PCR的方法檢驗(yàn)的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)作為觀察組。然后把觀察組與對(duì)照組的數(shù)據(jù)做比較，發(fā)現(xiàn)觀察組即用熒光PCR的方法檢驗(yàn)乙肝病毒DNA的數(shù)據(jù)與對(duì)照組里的數(shù)據(jù)差別不大，而且從觀察組數(shù)據(jù)里發(fā)現(xiàn)，用熒光PCR方法檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)中PCR拷貝數(shù)較高的是大三陽(yáng)者和小三陽(yáng)者，而HbsAg（-）和HbsAb（+）的PCR中有陽(yáng)性的因素，拷貝數(shù)較低。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn)

顯效：觀察組即用熒光PCR方法檢測(cè)乙肝病毒的數(shù)據(jù)與對(duì)照組即用最普通的檢驗(yàn)方法血清學(xué)標(biāo)志法檢驗(yàn)的乙肝病毒數(shù)據(jù)作比較，發(fā)現(xiàn)差別不大，而且用熒光PCR方法檢測(cè)的乙肝病毒數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確，PCR拷貝數(shù)較高的是大三陽(yáng)者和小三陽(yáng)者。效果不明顯：觀察組即用熒光PCR方法檢測(cè)乙肝病毒的數(shù)據(jù)與對(duì)照組即用最普通的檢驗(yàn)方法血清學(xué)標(biāo)志法檢驗(yàn)的乙肝病毒數(shù)據(jù)做比較，發(fā)現(xiàn)差別效果較小，而且熒光PCR方法在準(zhǔn)確度上還有其他數(shù)據(jù)中也沒(méi)有突出的表現(xiàn)。無(wú)效：觀察組即用熒光PCR方法檢測(cè)乙肝病毒的數(shù)據(jù)與對(duì)照組即用最普通的檢驗(yàn)方法血清學(xué)標(biāo)志法檢驗(yàn)的乙肝病毒數(shù)據(jù)做比較，發(fā)現(xiàn)觀察組的數(shù)據(jù)與對(duì)照組的數(shù)據(jù)差別較大，且對(duì)照組的數(shù)據(jù)不及觀察組的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用spss10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，對(duì)于用熒光PCR方法檢測(cè)的乙肝病毒的DNA數(shù)據(jù)與用血清學(xué)標(biāo)志法檢測(cè)出的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，如果差異較大，即P＜0.05.則有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。如果兩者的數(shù)據(jù)差異較小，即P＞0.05，則沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

通過(guò)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢驗(yàn)乙肝病毒的DNA數(shù)據(jù)很準(zhǔn)確，有良好的臨床意義。且療效標(biāo)準(zhǔn)是顯效，即用熒光PCR 方法檢測(cè)的乙肝病毒DNA數(shù)據(jù)與用普通方法血清學(xué)標(biāo)志法提供的乙型肝炎病毒DNA數(shù)據(jù)相似，且在用熒光PCR方法檢測(cè)的數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。比如數(shù)據(jù)顯示，HbsAg（+）、HbcAb（+）即大三陽(yáng)中的陽(yáng)性率達(dá)到了97%，HbsAg（+）、HbeAb（+）、HbcAb（+）即小三陽(yáng)的陽(yáng)性率則是70%，而HbsAg（-）、HbsAb（-）、HbeAg（-）、HbeAb（-）、HbcAb（-）的陽(yáng)性率則是2.2%。這充分證明了實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢驗(yàn)肝病毒的DNA具有良好的臨床效果，值得臨床應(yīng)用。

3 討 論

乙肝是乙型病毒性肝炎的簡(jiǎn)稱[1]，它屬于內(nèi)科中的消化內(nèi)科，發(fā)病的部位主要是人們的肝臟，是人們至今都非常擔(dān)心的一種病癥[2]。因?yàn)橐腋问且环N具有嚴(yán)重傳染性的疾病，他的傳染途徑主要有血液傳播，所以要杜絕接觸到乙肝患者的血液；母嬰傳播，所以國(guó)家規(guī)定乙肝患者不能進(jìn)行生育，以防下一代也成為乙肝患者；性傳播、皮膚黏膜破損傳播都是乙肝傳染的主要途徑。乙肝根據(jù)病程的長(zhǎng)短也分為急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎，從字面意思來(lái)了解，急性乙型肝炎比慢性乙型肝炎更可怕，甚至?xí)＜暗饺说男悦Ｒ倚筒《拘愿窝赘鶕?jù)病情的輕重也可以分成乙肝攜帶者、重型肝炎患者、活動(dòng)性乙型肝炎患者、肝炎肝硬化患者等。

這個(gè)實(shí)驗(yàn)充分證明了實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)乙肝病毒DNA在臨床中有重要的意義，相比運(yùn)用血清學(xué)標(biāo)志法來(lái)說(shuō)[3]，測(cè)出的數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確，內(nèi)容更加全面，從而為研究乙型病毒型肝炎的其他方面做了充分的準(zhǔn)備。所以，實(shí)時(shí)熒光PCR方法可以進(jìn)行臨床應(yīng)用。

[1] 黃惠宜.250例慢性乙型肝炎患者的HBVDNA、HBsAg、HBeAg與HBVpreS1-Ag臨床關(guān)系的探討[A].第十三次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C].2004.

[2] 郭亞光,樓大勇.乙肝前S1抗原與HBV-DNA、HBe Ag(HBeAb)相關(guān)性的研究[J].安徽醫(yī)藥,2007,11(5):444.

[3] 丁遠(yuǎn)杰.實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的研究[D].長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.

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1671-8194（2013）25-0173-01