孫銘濤 劉甲辰 劉曉華

（中國醫科大學遼陽中心醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000）

酶免法檢測乙型肝炎病毒標志物室間質評水平與臨床檢驗學研究

孫銘濤 劉甲辰 劉曉華

（中國醫科大學遼陽中心醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000）

為了使乙型肝炎病毒標志物 (HBV-M)檢驗結果更準確，保證室間質評結果的可比性，近年來用酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)的方法，參加了衛生部、遼寧省臨床檢驗中心的室間質評 (EQA)活動。從回報的成績可以看到 SI值均＞ 0，證明我院對 HBV-M 的檢測水平高于全國和全省，但參加衛生部檢驗中心的成績還存在差異，符合率高低順序為 HBsAg＞ 抗 -HBs＞ 抗 HBe＞ HBeAg＞ 抗 -HBc，從結果分析，成績差異主要決定于標本的發放，試劑的質量等問題，應引起重視。

酶聯免疫法；乙型肝炎病毒標志物（HBV-M）；室間質評（EQA）

質量控制已成為保證檢驗結果準確性的重要手段。為了使乙型肝炎病毒標志物（HBV-M）檢驗結果更準確，保證室間質評結果的可比性，更好的發揮其在臨床診斷和治療中的重要作用[1-4]，我院在2000年以來先后分別參加了省臨床檢驗中心和衛生部臨床檢驗中心開展的HBV標志物免疫學檢驗室間質評活動。本文對我院自2009至2010年參加質評的回報結果做一回顧性分析，以便總結室間質評成績，更快的提高室間質評水平。

1 資料與方法

1.1 質評血清

均由衛生部和遼寧省臨床檢驗中心提供。

1.2 試劑

由沈陽惠民科技發展有限公司和廈門新創有限公司提供。

1.3 儀器

美國伯樂450酶標儀和1250洗板機。

1.4 方法

酶聯免疫法（ELISA）。所有試驗嚴格按照說明書操作，其中抗-HBc檢測按衛生部臨床檢驗中心要求用原倍樣本測抗-HBc（E），用稀釋的樣本檢測抗-HBc（C），而省臨床檢驗中心要求用原倍樣本測抗-HBc（E）。

2 結 果

2.1 2009～2010年參加衛生部臨床檢驗中心

HBV-M室間質評成績（SI）平均為0.28，符合率平均為97%。

2.2 2009～2010年參加遼寧省臨床檢驗中心HBV-M室間質評成績（SI）平均為0.46，符合率平均為100%。

2.3 2009至2010年HBV-M室間質評活動中，我院檢測結果與預期結果不符的主要有：抗-HBc（C）有八次不符，假陽性和假陰性各占一半。HBeAg三次不符全是假陰性，抗-HBe一次假陽性。

3 討 論

從結果可以看出，我院在參加衛生部和遼寧省臨床檢驗中心HBV -M室間質評活動中SI值均大于零，說明我院成績均高于全國和全省水平，特別是參加全省質評成績最為突出，連續3年符合率為100%，說明我院對省質控血清有較高的檢測水平，但參加衛生部的HBV-M室間質評的成績較省的差，可能有以下原因。

近年來，我院除參加遼寧省臨床檢驗中心HBV-M室間質評成績滿分及符合率達100%外，在參加衛生部臨床檢驗中心HBv-M室間質評的成績存在差異，符合率高低順序為：HBsAg＞抗-HBs＞抗-HBe＞HbeAg＞抗-HBc。其中最理想的是HBsAg、抗-HBs符合率為100%，說明我院對這兩項的檢測水平較高；其次是抗-HBe，只有一次結果不符。另外，HBeAg結果有三次不符。分析這三次結果，都是預期結果陽性，而我院報告為陰性，筆者認為除了工作人員操作有誤差外，還與國產試劑盒的靈敏度不夠和質量不穩定有關。符合率最差的是抗-HBc（C），有八次不符，咎其原因，筆者認為也是試劑盒質量不穩定及廠商規定的稀釋度不統一有關。在全國學術會議上，曾經有多位專家圍繞檢測抗-HBc 標本是否要稀釋的問題爭論不休，最后認為作為報告臨床意義的抗-HBc一定要稀釋標本[5-6]。但從我們參加質評活動的成績來看，至少我們在抗-HBc稀釋的質量上還未達到很高的準確度，從而影響了我們的質評成績，今后還要認真總結經驗。

從我院參加衛生部和省臨床檢驗中心HBV-M室間質評成績可以看到，參加省質評的成績優于參加部質評的成績。這可能與部臨床檢驗中心發放的質評血清難度要大于省臨床檢驗中心的緣故，而且還于質評血清發放過程中的運輸等因素有關。由于客觀原因，部質評血清采用一次郵寄，而且標本都是液體（容易變質），而省質評血清是凍干的，發放時各市統一領取，保證了運輸的質量。故在質評血清發放質量保證方面省優于部臨床檢驗中心[7-8]。這也可能是參加部臨床檢驗中心室間質評成績不如參加省臨床檢驗中心室間質評成績的原因之一。

通過分析質評結果可見，我院近年來在參加衛生部和省臨床檢驗中心HBV-M室間質評的活動中，雖然取得了較好的成績，但仍然存在一些差距。由于酶方法學影響因素多，標準化問題沒解決，質控工作有難度。我們認為要做好 HBV標志物的檢測，提高室間質評成績，首先要搞好室內質控。設法避免不同品牌試劑造成的陰陽性錯誤，第一次用靈敏度高的試劑，第二次用特異性好的試劑。優質試劑盒一旦選用，不要經常更換。提高每一位檢驗技術人員的質控意識和操作水平。同時盡可能用洗板機洗板，除去個體洗板差異。必須用酶標儀讀數，消除主觀因素的影響，保持結果的統一標準。每次質評結果回報時，要認真總結經驗教訓，及時發現問題，分析問題，并努力解決問題，從而更快更好的提高質評水平。

[1]龍江山,龍克光,付瑤.酶聯免疫法檢測乙肝病毒標志物室間質評水平的臨床檢驗學研究[J].中華醫學檢驗雜志,2008,31(1):41-42.

[2]鄭懷竟.臨 床 免 疫實 驗 室 質 量 管 理[M].北京:北 京醫科大學中國協和醫科大學聯合出版社,1997: 67-84.

[3]叢玉隆,王淑清.血清分析儀研究進展及臨床應用[J].中華醫學檢驗雜志,2007,30(1):63-65.

[4]彭文偉.病毒性肝炎的防治[M].廣州:廣東科學技術出版社,2003: 21-63.

[5]葉應 撫,王毓 三.全國臨床檢驗操作 規 程[M].南 京:東 南大學出版社,2003:18-26.

[6]周 新.檢 驗 醫學 考核 指 南[M].武 漢:湖 北 科 學 技 術 出版 社,2003: 201-230.

[7]尹 伯 元 .放 射 免 疫 分 析 在 醫 學 中 的 應 用[M].北 京 :原 子 能 出 版社,2003:11-22.

[8]中華人民共和國衛生部醫政司編.全國臨床檢驗操作規程[M].北京:人民衛生出版社,2003:20-28.

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